一、PCR實驗室四要素

1,、試劑準備區(qū)

         用于試驗試劑的準備,。該區(qū)域為正壓，目的是防止污染物質(zhì)溢入,。該區(qū)域內(nèi)部又可分為3個區(qū)域：普通提取試劑的準備區(qū),、PCR試劑準備區(qū)和PCR主反應液準備區(qū)。在普通提取試劑的準備區(qū)內(nèi)準備一些樣品核酸提取時所需的裂解液,、提取液等,；PCR試劑準備區(qū)用于PCR試劑的制備和保存。例如準備引物,、探針等PCR試劑,。為了防止交叉污染，避免反復冷凍和解凍,，試劑存貯溶液應該被平均為小的工作體積,，儲存在這個房間以備后用：PCR主反應液準備區(qū)將進行主反應混合液(除了樣品。所有PCR所需試劑的混合)添加到PCR管的操作,。重要提示：不能將其它房間的材料(包括擴增,、模板和目標核酸或陽性對照、供應品,、或設備)帶進試劑準備區(qū),。

2、樣品準備區(qū)

         該區(qū)域無壓力設置要求,。該區(qū)域是用于對樣品進行分樣,，將樣品進行研磨、粉碎,、勻漿的區(qū)域,。由于在這些粉碎、研磨和勻漿處理過程中會產(chǎn)生氣溶膠,，因此,，存在陽性樣品污染后續(xù)操作的可能性。該區(qū)域與后面的區(qū)域應嚴格隔離,，應放在與后面的三個區(qū)域隔開的獨立的房間中,。在樣品準備區(qū)內(nèi)還可設立一個專用的封閉區(qū)或房間用于樣品的接收和儲存。這個房間可以放置冰箱用于樣品儲存,，應該和樣品準備區(qū)其它區(qū)域隔離開,。樣品準備區(qū)域的人員不得進入試劑準備區(qū),。

3、核酸提取區(qū)

         核酸提取區(qū)是進行樣品核酸提取的區(qū)域,。該區(qū)域為負壓,，目的是防止核酸溢出造成污染。樣品準備區(qū)又包括從樣品中進行核酸提取和純化的區(qū)域以及將核酸加到包含PCR主反應混合液管中的操作區(qū)域,。添加完樣品后,，PCR管的蓋子要盡可能快地蓋好。使用PCR板和膠蓋時,，陽性對照和含目標序列的樣品要與待測樣本分開操作,，以避免模板添加時造成交叉污染

4、擴增和產(chǎn)品檢測區(qū)

         該區(qū)域是用來進行PCR擴增和PCR分析的,。PER儀放置在這個區(qū)域,。房間保持負壓，目的是防止核酸溢出,。在該區(qū)域人員一定要一直穿戴工作服和手套,，在離開房間前脫去，防止擴增子污染其它地點,。所有用于擴增和產(chǎn)品檢測的設備要用于這個房間,。PCR分析]二作也設置在該區(qū)域，例如：酶切,、測序,、克隆等，但實驗室應盡可能把這些活動分隔在不同區(qū)域或不同房間,。以降低擴增產(chǎn)物的污染風險,。如果沒有條件在該區(qū)域設立負壓，此區(qū)域必須建立排風裝置,。

二,、PCR實驗室的功能分區(qū)

1、基因擴增實驗室的設計通常有四大分區(qū)：試劑儲存和準備區(qū),、標本制備區(qū),、核算擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū),。這四個分區(qū)原本就不需要連接在一起,，且在物理空間上必須是獨立的，各區(qū)域無論在空間上還是在使用中,，應處于的分隔狀態(tài),，不能有空氣的直接相通。

2、PCR實驗室的功能區(qū)分布：

① 基因擴增實驗室的用房分區(qū)可分散布置,，可集中布置,；集中布置的分布原則是依次排列、獨立分區(qū),；4個基本分區(qū)可根據(jù)需要進行遞增/減。如下為PCR實驗室功能分區(qū)的常見布局

② 建筑上,，緩沖間是阻隔空氣交換的首要措施

③ 進入工作區(qū)域應嚴格按照單一方向進行,，即：試劑儲存和準備區(qū)——標本制備區(qū)——核算擴增區(qū)——產(chǎn)物分析區(qū)

三、PCR實驗室類型

         PCR實驗室可以是分散形式,，也可以是組合形式,。完成一組PCR實驗，通常應經(jīng)過試劑配制,、樣品處理,、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個實驗過程，若實驗工藝需要,，還應增加樣品粉碎過程,。

①分散形式PCR實驗室：

         所謂分散形式PCR實驗室，是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠,，呈分散布置形式,。對于這種布置形式的PCR實驗室建設設計，由于各個實驗之間不易相互干擾,，因此無需特殊條件要求,。

②組合形式PCR實驗室：

         所謂組合形式, 是指完成基因擴增四個實驗過程的實驗用房相鄰布置，組成獨立實驗區(qū)域的形式,。對于組合形式PCR實驗室的建設設計,，由于各個實驗間集中布置，容易造成相互干擾,，因此,，對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設緩沖間,，以減少室內(nèi)外空氣交換,。

WOL 承接 PCR檢測實驗室 無菌操作室 設計裝修

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