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RNA

mRNA定制合成服務(wù)

高得率,，高性價(jià)比

APExBIO 提供高得率和高性價(jià)比的 mRNA 和長鏈RNA（多個(gè)堿基）的定制合成。在微克到毫克的級(jí)別上，開展廣泛的mRNA修飾服務(wù),。mRNA 可從客戶提供的 DNA 模板生成,；或者我們可以從零開始， 提供完整的mRNA體外合成,。我們?yōu)樗械臉?biāo)準(zhǔn) mRNA 片段進(jìn)行 mCAP,、ARCA 和 EZ Cap加帽或修飾核苷酸的處理。

有關(guān)訂購和更多信息,，請(qǐng)下載我們的客戶mRNA定制合成問卷 (Custom mRNA Synthesis Questionnaire.PDF) 并通過電子郵件,。我們將很快給您答復(fù)并提供報(bào)價(jià)。

Modified Nucleotide-containing mRNA Synthesis

mRNA體外轉(zhuǎn)錄合成（IVT, in vitro transcription）

為了mRNA能最終有效地在體外翻譯,， 需要在體外轉(zhuǎn)錄合成mRNA時(shí),，摻入5’端的m7G加帽結(jié)構(gòu)和3’端的多聚腺苷酸[poly(A)尾]結(jié)構(gòu)。加帽的過程,，是通過T7 RNA 聚合酶共轉(zhuǎn)錄,，在mRNA分子5’端摻入諸如ARCA (Anti-Reverse Cap Analog)。 加尾的過程,，是用Poly(A)聚合酶在mRNA分子3’端,，加上poly(A)尾， 再用DNase酶消化DNA模板,。5-甲基-胞苷(5-Methyl-CTP), 假尿苷(Pseudo/ ψ-UTP)和其他修飾核苷酸也可摻入mRNA, 來降低免疫原性和加強(qiáng)穩(wěn)定性,。合成后的mRNA適用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染、微注射,、體外翻譯和RNA疫苗等,。

定制合成 的mRNA 擁有廣泛的應(yīng)用：

    --用于基因組編輯的mRNA，比如Zinc-finger Nuclease mRNA,，TALEN mRNA,，Cas9 mRNA和Recombinase mRNA等。

    --報(bào)告基因的mRNA,，比如EGFP mRNA和 Luc mRNA, 用于熒光顯微鏡,、流細(xì)胞測(cè)量和生物發(fā)光成像等。

    --重組mRNA, 用于non-integrating generation of iPSC,。

產(chǎn)品驗(yàn)證:

相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)      產(chǎn)品名稱      貨號(hào)      產(chǎn)品名稱

B8175    ARCA     B8174    mCAP

B7972    Pseudo-UTP  B7967    5-Methyl-CTP

B8061    5-Methoxy-UTP   K1046    RNase Inhibitor, Murine

K1047    HyperScribe™ T7 High Yield RNA Synthesis Kit       K1053    HyperScribe™ Poly (A) Tailing Kit

K1060    HyperScribe™ T7 High Yield Fluorescein RNA Labeling Kit    K1061        HyperScribe™ T7 High Yield Cy3 RNA Labeling Kit

K1062    HyperScribe™ T7 High Yield Cy5 RNA Labeling Kit  K1063    HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit (ARCA, T7, poly(A))

K1064    HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit Plus 1 (ARCA, 5mCTP, ψUTP, T7, poly(A))  K1065    HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit Plus 2 (ARCA, 5-moUTP, T7, poly(A))

K1066    HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit II (EZ Cap Reagent AG (3' OMe), T7, poly(A))   K1067    HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit II Plus 1 (EZ Cap Reagent AG (3' OMe), 5mCTP, ψUTP, T7, poly(A))

K1068    HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit II Plus 2 (EZ Cap Reagent AG (3' OMe), 5-moUTP, T7, poly(A))     B8176    EZ Cap™ Reagent AG

B8178    EZ Cap™ Reagent AG (3' OMe)

mRNA純化:

由T7 RNA聚合酶在體外轉(zhuǎn)錄合成的mRNA,，可能含有各種污染物：比如未反應(yīng)*的小分子底物、反應(yīng)所需的蛋白酶,，以及反應(yīng)中產(chǎn)生的非特異性產(chǎn)物,，如過短或過長或未*加帽的mRNA等。 某些RNA序列甚至?xí)T導(dǎo)高水平的免疫原性,。

APExBIO提供高效的純化技術(shù),，可去除相關(guān)污染物,，從而提高下游應(yīng)用的處理效率。

硅膠膜純化柱（Silica-gel Membrane Spin Column）

它是一種用于快速核酸純化的固相萃取技術(shù),。mRNA可以在特定條件下,，結(jié)合到硅凝膠膜的固相，并在水中或TE (pH 7)中進(jìn)行后續(xù)洗滌和洗脫步驟,。這種方法清除了大多數(shù)蛋白質(zhì),、DNA和NTPs。

HPLC純化法（?KTA avant系統(tǒng)）：

mRNA的純化,，可以通過?KTA avant系統(tǒng),，使用alkylated non-porous polystyrene-divinylbenzene copolymer microspheres和優(yōu)化的緩沖體系，然后進(jìn)行mRNA分析和mRNA分離,。

HPLC 純化法可以從體外合成和化學(xué)修飾后的mRNA 中,，去除雙鏈DNA和其他污染物，使 mRNA 具有更高水平的翻譯,，減少免疫原性或 RNA sensor激活,。

我們所有的 mRNA 產(chǎn)品都提供：

    -將mCAP/ARCA/EZ Cap摻入到轉(zhuǎn)錄合成的mRNA片段中，以提高翻譯效率,。

    -通過加入經(jīng)過修飾的核苷酸（5mCTP, ψUTP）和poly（A）尾,，減少宿主細(xì)胞免疫反應(yīng)并增強(qiáng)穩(wěn)定性。

    -在合成mRNA過程中,，加入DNase酶,，降解DNA模板。

    -用磷酸酶去除RNA末端的5'三磷酸鹽(5’ triphosphates),，進(jìn)一步減少哺乳動(dòng)物細(xì)胞的先天免疫反應(yīng),。

    -采用強(qiáng)大的純化系統(tǒng)，提供高產(chǎn)量的 mRNA來適應(yīng)大多數(shù)下游應(yīng)用,。

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其他的這些是菌株

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