使用TSKgel UP-SW3000進行單克隆抗體分析柱

近年來,，抗體藥物市場在逐步擴大,，未來的幾年仍將持續(xù)發(fā)展。越來越多的抗體藥物將會應用到疾病的治療中,。尺寸排阻色譜法（SEC）廣泛用于抗體中單體,，二聚體,，聚集體和片段等的分析和定量中。為實現(xiàn)更高的分離度和更快的分析時間,，色譜柱生產(chǎn)廠家優(yōu)化了填料顆?；瘜W和色譜柱填充方法,近年來,2μm和亞2μm粒徑SEC色譜柱相繼問世.

通過這種方法使得一些樣品的分析結果得到了改善，但由于一些新型抗體藥物具有高度的疏水性,，抗體在色譜柱凝膠基質上的非特異性吸附使得抗體藥物的分析仍然具有一定的挑戰(zhàn),。在本應用指南中，使用TSKgel®UP-SW3000,，2μmSEC色譜柱分析單克隆抗體（mAb）,，并在pH 6.7的磷酸鈉緩沖液中添加15％IPA。如圖所示,，峰分離度和保留時間變化均不受影響,。

HPLC實驗條件

色譜柱：TSKgel UP-SW3000，2μm,，4.6 mm ID x 30 cm

儀  器：Chromeleon®（7.2版）運行的UltiMate®3000 UHPLC系統(tǒng)

流動相：100 mmol / L KH2PO4 / Na2HPO4中的15％IPA,，pH 6.7，100 mmol / L Na2SO4,、0.05％NaN3

流  速：0.30 mL / min

檢  測：紫外線@ 280 nm

溫  度：30?C

壓  力：22 MPa（最大色譜柱壓力為34 MPa）

進樣量：5μL,，4 mg / mL

樣  品：USP mAb標準品

使用TSKgel UP-SW3000進行單克隆抗體分析柱

結果與討論

將USP mAb標準品注射到TSKgel UP-SW3000 4.6 mm ID×30 cm色譜柱上，利用磷酸鈉緩沖液pH 6.7為流動相,，樣品具有出色的重現(xiàn)性,，如圖1所示。該圖顯示了以0.3 mL / min的流速連續(xù)進樣14針USP mAb標準樣品,，單體,，二聚體，聚集體和碎片峰的保留時間幾乎不變,，每次進樣的峰寬和峰形非常一致,。

北京綠百草科技發(fā)展有限公司成立于1999年，坐落于北京市昌平區(qū)企業(yè)墅上區(qū),，是一家專業(yè)經(jīng)營純化填料,、色譜柱、化學試劑和實驗室設備及相關技術服務的科技型企業(yè),，產(chǎn)品主要應用于制藥,、生物,、食品,、環(huán)境和農(nóng)業(yè)等領域。憑借較好的產(chǎn)品和服務,，綠百草科技與廣大客戶建立了長期穩(wěn)定的戰(zhàn)略合作關系,，被眾多企業(yè)和科研機構認定為“供應商”,，得到了政府部門的關懷和有力支持。
    經(jīng)過十多年的快速發(fā)展,，綠百草科技創(chuàng)建了產(chǎn)品種類齊全,、技術服務的色譜耗材平臺。綠百草科技被眾多國際供應商選擇為他們在中國區(qū)的代理,，包括美國Restek公司,、美國Zymo Research生物科技公司、日本三菱化學株式會社,、加拿大SiliCycle股份有限公司,、日本GL Sciences株式會社、美國Benson聚合物股份有限公司,、日本東洋曹達株式會社,、日本大賽璐化學工業(yè)株式會社、日本Nacalai Tesque株式會社,、日本信和化工株式會社,、日本住化分析株式會社等。同時,，還提供美國USP標準物質,、歐洲藥典標準物質EDQM、英國化學學會LGC標準物質,、加拿大TRC標準物質等,。目前，綠百草科技已成為國內(nèi)制藥,、生物,、食品、環(huán)境和農(nóng)業(yè)等領域的較大供應商之一,。