PS-304 不銹鋼開口直壁容器

蛔蟲卵測定、沉淀集卵法

容量：10L帶刻度

配套 1ML 網(wǎng)格 浮游生物計數(shù)框 和 5ML S型 浮游生物計數(shù)框

沉淀集卵法主要通過樣品濃縮,，雜質(zhì)分離,，鏡檢計數(shù)等環(huán)節(jié)對水中蠕蟲卵進行測定，用60目篩網(wǎng)過濾去除樣品中較大的雜質(zhì),，利用回傳卵比重大于水和易于沉淀的特定特性過夜沉淀濃縮水樣,，用虹吸的方法棄去上清液，用表面活性劑吐溫80作為殘液及沉淀轉(zhuǎn)移時的清洗劑,，進一步離心濃縮轉(zhuǎn)移的剩余物,，收集到的濃縮物用乙酸-乙酸鈉緩沖液混勻控制溶液PH值，獲得最佳親水-親脂平衡,，加入乙酸乙酯吸收水中的脂肪類雜質(zhì)使蛔蟲卵更易下沉,，再次離心濃縮樣品并棄去上部脂肪雜質(zhì)層及緩沖液層，獲得的含卵沉淀層用飽和硝酸鈉溶液混勻,，于計數(shù)框中靜置漂浮后鏡檢,，即可測得水樣中蛔蟲卵的數(shù)量。

不銹鋼開口直壁容器10L（蛔蟲卵測定）蛔蟲卵測定 沉淀集卵法：

蛔蟲卵分受精卵和未受精卵,。受精卵呈寬橢圓形,。蛔蟲卵一旦進入人體,，在它發(fā)育到成熟的整個過程中都會給人體造成危害,。蛔蟲卵在土壤,、肥料,、人體等自然界廣泛存在！防止糞便污染環(huán)境是切斷蛔蟲傳播途徑的重要措施,。

　　蛔蟲卵死亡率直接影響肥料的效果,，可采用五格三池貯糞法，使糞便中蟲卵大部分沉降在池底,。由于糞水中游離氨的作用和厭氧發(fā)酵,，蟲卵可被殺滅，同時也會增加肥效,。在用于糞做肥料的地區(qū),，可采用泥封堆肥法，三天后，糞堆內(nèi)溫度可上升至52℃或更高,，可以殺死蛔蟲卵。

　　那么蛔蟲卵死亡率又是如何測定的呢,？依據(jù)GB/T 19524.2—2004如下：將堿性溶液與肥料樣品充分混合,，分離蛔蟲卵，然后用密度較蛔蟲卵密度大的溶液為漂浮液,，使蛔蟲卵漂浮在溶液的表面,，從而收集檢驗。

　　1,、蛔蟲卵分離

　　稱取5.0～10.0 g樣品（顆粒較大的樣品應(yīng)先進行研磨）,，放于容量為50 mL離心管中，注入NaOH溶液25～30 mL,另加玻璃珠約10粒,，用橡皮塞塞緊管口,，放置在振蕩器上，靜置30 min后,，以200～300 r/ min頻率振蕩10～15 min,。振蕩完畢，取下離心管上的橡皮塞,，用玻璃棒將離心管中的樣品充分攪勻,，再次用橡皮塞塞緊管口，靜置15～30 min 后,，振蕩10～15 min,。

　　2、離心沉淀

　　從振蕩器上取下離心管,，拔掉橡皮塞,，用滴管吸取蒸餾水，將附著于橡皮塞上和管口內(nèi)壁的樣品沖入管中,，以2000～2500 r/ min速度離心3～5 min后,，棄去上清液。然后加適量蒸餾水,，并用玻璃棒將沉淀物攪起,，按上述方法重復(fù)洗滌三次。

　　3,、 離心漂浮

　　往離心管中加入少量飽和 NaNO3 溶液,，用玻璃棒將沉淀物攪成糊狀后，再徐徐添加飽和 NaNO3 溶液,，隨加隨攪,，直加到離管口約1 cm為止，用飽和 NaNO3 溶液沖洗玻璃棒，洗液并入離心管中,，以2000～2500 r/ min速度離心3～5 min,。

　　用金屬絲圈不斷將離心管表層液膜移于盛有半杯蒸餾水的燒杯中，約30次后,，適當(dāng)增加一些飽和NaNO3 溶液于離心管中,，再次攪拌、離心及移置液膜,，如此反復(fù)操作３～４次,，直到液膜涂片觀察不到蛔蟲卵為止。

　　4,、抽濾鏡檢

　　將燒杯中混合懸液,，通過覆以微孔火棉膠濾膜的高爾特曼氏漏斗抽濾。若混合懸液的渾濁度大,，可更換濾膜,。

　　抽濾完畢，用彎頭鑷子將濾膜從漏斗的濾臺上小心取下,，置于載玻片上,，滴加二、三滴甘油溶液,，于低倍顯微鏡下對整張濾膜進行觀察和蛔蟲卵計數(shù),。當(dāng)觀察有蛔蟲卵時，將含有蛔蟲卵的濾膜進行培養(yǎng),。

　　5 ,、培養(yǎng)

　　在培養(yǎng)皿的底部平鋪一層厚約1 cm 的脫脂棉，脫脂棉上鋪一張直徑與培養(yǎng)皿相適的普通濾紙,。為防止霉菌和原生動物的繁殖,，可加入甲醛溶液或甲醛生理鹽水，以浸透濾紙和脫脂棉為宜,。

　　將含蛔蟲卵的濾膜平鋪在濾紙上,，培養(yǎng)皿加蓋后置于恒溫培養(yǎng)箱中，在28 ℃～30 ℃ 條件下培養(yǎng),，培養(yǎng)過程中經(jīng)常滴加蒸餾水或甲醛溶液,，使濾膜保持潮濕狀態(tài)。

　　6,、 鏡檢

　　培養(yǎng)10～15 d ,，自培養(yǎng)皿中取出濾膜置于載玻片上，滴加甘油溶液,，使其透明后,，在低倍鏡下查找蛔蟲卵,，然后在高倍鏡下根據(jù)形態(tài)，鑒定卵的死活,，并加以計數(shù),。鏡檢時若感覺視野的亮度和膜的透明度不夠，可在載玻片上滴一滴蒸餾水,，用蓋玻片從濾膜上刮下少許含卵濾渣,，與水混合均勻，蓋上蓋玻片進行鏡檢,。

　　7、 判定

　　凡含有幼蟲的,，都認為是活卵,，未孵化或單細胞的都判為死卵。

　　8,、 結(jié)果計算

　　式中：

　　K —蛔蟲卵死亡率（%）

　　N1—鏡檢總卵數(shù)

　　N2—培養(yǎng)后鏡檢活卵數(shù)