細(xì)胞樣本中甘油含量檢測試劑盒
- 公司名稱 上海信帆生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/10/24 16:25:11
- 訪問次數(shù) 1147
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ELISA試劑盒,,國產(chǎn)ELISA試劑盒,進(jìn)口elisa試劑盒,,食品檢測試劑盒,,農(nóng)殘試劑盒,化學(xué)培養(yǎng)基及生物標(biāo)準(zhǔn)品等
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
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所有產(chǎn)品僅供科研使用,,不能用于食用和醫(yī)療等
細(xì)胞樣本中甘油含量檢測試劑盒
適用范圍:測定實(shí)體組織,、細(xì)胞中的甘油濃度。組成 (105 次微板測定或 30 次 1 ml 比色杯測定):
(1) 裂解液 50 ml
(2) R1 試劑 16 ml
(3) R2 試劑 4 ml
(4) 4 mmol/L 甘油標(biāo)準(zhǔn)品 1 ml
4 oC,,儲存 3 月,。
所需設(shè)備:酶標(biāo)儀、生化分析儀或 721,、722 型可
見光分光光度計,。佳工作波長 550nm,如無此波
長建議優(yōu)先選用 570nm,、次選 530,、490nm。
一 組織細(xì)胞裂解
細(xì)胞(包括分化的脂肪細(xì)胞)裂解: 消化,、離心收集細(xì)胞,。或直接在培養(yǎng)皿內(nèi)裂解,。通常6孔板單孔約2x106個細(xì)胞,75cm2瓶約1x107細(xì)胞,。按比例每 1~2 x 106細(xì)胞加 0.1ml 裂解液,,混勻,靜置 10 分鐘,。
動物組織裂解:
切記要預(yù)先將新鮮組織切稱重后再進(jìn)行保存,。組織凍存后再進(jìn)行解凍、剪切,、稱重可能會產(chǎn)生嚴(yán)重的測量誤差,。離心管精確稱重,加入組織塊后再稱重,,二者相減(即減量稱重法)計算組織量(約 100mg),。強(qiáng)烈建議按比例每 1mg 組織加10µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質(zhì)含量變異而產(chǎn)生的誤差。(注意,;裂解液用量在 1ml 或更多可保證有效的裂解與脂質(zhì)提?。S秒妱痈咚賱驖{器或手動玻璃勻漿器破碎組織,。(不推薦超聲方法,,因其不能*和均勻破碎,。應(yīng)根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)調(diào)整初始的組織細(xì)胞加入量),而后,,靜置 10 分鐘,。
二. 裂解液處理:
1. 取適量上清液轉(zhuǎn)移到 1.5ml 離心管中,進(jìn)行步驟
2 的操作,。余下的裂解液可用 BCA 法蛋白定量試劑盒進(jìn)行蛋白定量或-20oC 儲存,。
2. 70oC 加熱 10 分鐘滅活脂肪酶,可能出現(xiàn)絮狀沉淀,。
3. 室溫 5000rpm 離心 5 分鐘,,上層清液即可用于酶學(xué)測定。
三 工作溶液配制:按 4:1 比例,,取 4 ml 試劑 R1 與1 ml 試劑 R2 混合即可,,立即使用或 4oC 保存<1 天,變色棄去,。(注意:謹(jǐn)防來源不明但容易發(fā)生的甘油污染,,可來自操作者本人或標(biāo)準(zhǔn)品液體微粒濺射等。)
細(xì)胞樣本中甘油含量檢測試劑盒