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Biometra-Mastercycler nexus 家族：

網(wǎng)絡(luò)時(shí)代,，Eppendorf 創(chuàng)新的Mastercycler nexus PCR 儀是您日常實(shí)驗(yàn)的可靠伙伴。精準(zhǔn)的溫度控制,、直觀的圖形化程序編輯,、友好的中文操作界面以及溫馨及時(shí)的提醒，讓您的PCR 操作更放心,、更省心,。

*的flexlidTM 熱蓋，可以自動(dòng)調(diào)節(jié)高度，適應(yīng)從小體積PCR 管,、0.2 ml PCR 管、0.5 ml PCR 管到各種規(guī)格的PCR 板,。一臺(tái)Mastercycler nexus 梯度或普通PCR 儀可以連接兩臺(tái)Mastercycler nexus eco 經(jīng)濟(jì)型PCR 儀,，幫您顯著提高樣品處理通量。

Mastercycler nexus 還具有多種人性化的設(shè)計(jì),，低能耗,、體積小巧、*運(yùn)行,，不僅節(jié)能環(huán)保,、節(jié)省實(shí)驗(yàn)室空間，還為您提供舒適的工作環(huán)境,。

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BiometraPCR儀 - 技術(shù)原理：

DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶,、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制,。 　

但是，DNA聚合酶在高溫時(shí)會(huì)失活,，因此,，每次循環(huán)都得加入新的DNA聚合酶，不僅操作煩瑣,，而且價(jià)格昂貴,，制約了PCR技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展。發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷,、同時(shí)也大大降低了成本,，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床

1）內(nèi)參照法：在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,，內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標(biāo)記,，下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),，內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增,。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長(zhǎng)度不同,，二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高 效液相分離開來,，分別測(cè)定其熒光強(qiáng)度，以內(nèi)標(biāo)為對(duì)照定量待檢測(cè)模板

2）競(jìng)爭(zhēng)法：選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競(jìng)爭(zhēng)性模板,。在同一反應(yīng)管中,，待測(cè)樣品與競(jìng)爭(zhēng)模板用同一對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增（其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記）。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,，競(jìng)爭(zhēng)性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,，而待測(cè)模板不被酶切，可通過電泳或高 效液相將兩種產(chǎn)物分開,，分別測(cè)定熒光強(qiáng)度,，根據(jù)已知模板推測(cè)未知模板的起始拷貝數(shù)

3）PCR－ELISA法：利用生物素等標(biāo)記引物，擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,，再加入生物素酶標(biāo)抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物,，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),，若加入內(nèi)標(biāo),，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，也可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)目的

2．內(nèi)標(biāo)在傳統(tǒng)定量中的作

由于傳統(tǒng)定量方法都是終點(diǎn)檢測(cè),，即PCR到達(dá)平臺(tái)期后進(jìn)行檢測(cè),，而PCR經(jīng)過對(duì)數(shù)期擴(kuò)增到達(dá)平臺(tái)期時(shí)，檢測(cè)重現(xiàn)性極差,。同一個(gè)模板在96孔PCR儀上做96次重復(fù)實(shí)驗(yàn),，所得結(jié)果有很大差異，因此無法直接從終點(diǎn)產(chǎn)物量推算出起始模板量,。加入內(nèi)標(biāo)后,，可部分消除終產(chǎn)物定量所造成的不準(zhǔn)確性。但即使如此,，傳統(tǒng)的定量方法也都只能算作半定量,、粗略定量的方法

建立樣品準(zhǔn)備

這個(gè)區(qū)域?qū)ｉT用作樣品的準(zhǔn)備，在制備和操作用于核酸提取的試劑時(shí)應(yīng)該采取預(yù)防措施：⑴PCR產(chǎn)物和帶有要擴(kuò)增序列的DNA克隆不能在這個(gè)房間操作,。⑵組織培養(yǎng)物,、組織標(biāo)本和血清樣品都帶進(jìn)樣品準(zhǔn)備間處理，以根據(jù)應(yīng)用的需要提取DNA或RNA。⑶用于樣品處理的工具不能被用作普通分子克隆的工具,，也不能用作操作靶序列,。⑷DNA樣品應(yīng)該用有專門的防護(hù)或正壓活塞式移液管操作，以防止在吸取樣品時(shí)有氣溶膠遺留,。⑸大體積樣品應(yīng)該用單獨(dú)包裝的無菌一次性移液管吸取,。⑹管子打開前都要簡(jiǎn)短離心以減少氣溶膠的產(chǎn)生，而且管子不能用力崩開,，這樣會(huì)產(chǎn)生氣溶膠。⑺任何時(shí)候都應(yīng)該穿實(shí)驗(yàn)服和帶手套,，手套要經(jīng)常更換,，尤其在抽提過程中每一步之間都要更換。實(shí)驗(yàn)服要專門用于樣品準(zhǔn)備間,，經(jīng)常清洗

2,、樣品準(zhǔn)備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作，這樣增加了樣品之間污染的機(jī)會(huì),。為了避免這一問題,，反轉(zhuǎn)錄一步可以在樣品準(zhǔn)備區(qū)進(jìn)行。在RNA-PCR中應(yīng)用UNG以防止污染的方法也有報(bào)道

3,、建立前PCR區(qū)

該去專門用于準(zhǔn)備各種反應(yīng),，這個(gè)區(qū)域必須保持干凈，而且沒有來自克隆和樣品準(zhǔn)備的污染,。前PCR區(qū)必須要有試劑和準(zhǔn)備,，特別是專門用于前PCR區(qū)的正壓活塞式移液管。

Biometra PCR儀維修承諾：

（1） 嚴(yán)格按維修程序及操作規(guī)程維修,，確保維修質(zhì)量,。

（2） 嚴(yán)把配件質(zhì)量關(guān)，杜絕偽劣配件的使用,。

（3） 服務(wù)熱線24小時(shí)有人值班,，24小時(shí)內(nèi)做出回應(yīng)。維修車間及前臺(tái)節(jié)假日和周六日不休息,，保證用戶隨到隨修,；建立上門維修制度；及時(shí)成立搶修小組,，可隨時(shí) 到達(dá)現(xiàn)場(chǎng)搶修,。

（4） 收費(fèi)方面嚴(yán)格執(zhí)行我公司《維修收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)》，更換舊件返還給客戶,，不夸大故障,，杜絕亂收費(fèi)。

（5） 外地顧客遠(yuǎn)程故障判斷、技術(shù)故障解答,、需要郵遞配件迅速辦理,。外地客戶自行送修的我們會(huì)加急為您的機(jī)器排除故障，當(dāng)天加急完成維修,。

（6） 經(jīng)我中心維修的機(jī)器一律實(shí)行保修,，保修期為三個(gè)月，在保修期內(nèi)如因維修質(zhì)量或更換配件質(zhì)量出現(xiàn)問題,，我中心負(fù)責(zé)返修,。

（7） 客戶在我中心維修過機(jī)器，可憑收費(fèi)單據(jù)及保修單在我公司再次維修此機(jī)器時(shí),，享受維修費(fèi)半價(jià)待遇,。

（8） 建立回訪制度：定期對(duì)我公司維修過的機(jī)器使用情況以及我公司的服務(wù)質(zhì)量情況進(jìn)行跟蹤了解，向用戶調(diào)查滿意率,、建立用戶滿意率調(diào)查表,。

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