現(xiàn)有凍存方法存在的問題：

1,、DMSO對(duì)細(xì)胞存在一定的毒性,，用量受到限制，降低或者不使用DMSO,，尋找其它替代物是比較的選擇,。

2、血清,，即使是純化得到的白蛋白,，由于其動(dòng)物來源的特性，會(huì)極大增加帶來病毒等感染物質(zhì)的可能,。而且,，血清來源受限，價(jià)格昂貴,，所以其使用也必然會(huì)受到越來越多的限制,。因此,，尋找替代血清的非滲透性保護(hù)劑也顯得尤為必要,。

3、目前,，成熟和穩(wěn)定的凍存細(xì)胞技術(shù)是將加有保護(hù)劑的細(xì)胞懸液置于-196℃液氮中,，這樣可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而保持細(xì)胞的特性，在需要的時(shí)候經(jīng)過復(fù)蘇程序,，使得細(xì)胞重新生長增殖以用于實(shí)驗(yàn),。細(xì)胞儲(chǔ)存在-196℃液氮中，理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無限的,，但是液氮凍存步驟繁瑣,，需要經(jīng)過程序降溫，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,，然后移至-20℃冰箱30分鐘,，再移至-80℃冰箱保存16-18個(gè)小時(shí)（或隔夜），最后才移至液氮罐中進(jìn)行長期的儲(chǔ)存,。（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個(gè)小時(shí),，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量的死亡,。）

賽爾瑞成科學(xué)家團(tuán)隊(duì)在細(xì)胞凍存領(lǐng)域進(jìn)行了大量研究工作,，分別于2015年研發(fā)了 “Cellregen無血清細(xì)胞凍存液”（貨號(hào)：CF0101） 和2020年研發(fā)了 “無血清低DMSO細(xì)胞凍存液”（貨號(hào)：CF0201,；申請(qǐng)?zhí)枺?02010307890.6）。這兩款凍存液均是不含血清,，含DMSO,，非程序降溫、可-80℃長期冷凍保存的通用型細(xì)胞凍存液 ,，區(qū)別在于“Cellregen無血清細(xì)胞凍存液”（貨號(hào)：CF0101）的DMSO含量為10%,， “無血清低DMSO細(xì)胞凍存液”（貨號(hào)：CF0201）DMSO的含量為5%，產(chǎn)品均獲得了廣大科研工作者的喜愛,。

鑒于某些類型的細(xì)胞對(duì)DMSO敏感,，使用含DMSO的細(xì)胞凍存液可能會(huì)影響細(xì)胞的功能，賽爾瑞成繼續(xù)研究工作,，開發(fā)出一款無血清,、無DMSO、無毒性,、非程序降溫,、-80℃可長期冷凍保存的凍存液體系：CRD0無血清無DMSO細(xì)胞凍存液（貨號(hào)：CF0301）。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1,、高安全性,，不含血清及動(dòng)物源成分，病毒,、霉菌和支原體等污染可能性低,，各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。
2,、無DMSO,，對(duì)細(xì)胞無潛在的毒性作用。
3,、細(xì)胞存活率高,，無批次差異。
4,、凍存液配方,，可直接使用，方便簡捷,。
5,、可直接存放于-80℃冰箱凍存，無需經(jīng)過費(fèi)時(shí)的程序降溫過程（省時(shí),、省力,、省錢），不需要采用程序降溫儀，更不需要放置在-196℃液氮,。
6,、可原位凍存，比如雜交瘤細(xì)胞的亞克隆,，可以大規(guī)模減少工作量,，避免污染。

CRD0無血清無DMSO細(xì)胞凍存液凍存效果：

圖1. 3T3細(xì)胞復(fù)蘇后細(xì)胞狀態(tài)圖                

         3T3細(xì)胞存活率>90%    

圖2. ATDC5細(xì)胞復(fù)蘇后細(xì)胞狀態(tài)圖

       ATDC5存活率>90%

圖3 小鼠脾臟T細(xì)胞復(fù)蘇后細(xì)胞凋亡圖  

三個(gè)批次復(fù)蘇率均>95%,，且批次間凍存效果無明顯差異

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