背景知識

酶聯(lián)免疫斑點檢測（Enzyme-Linked Immunospot Assay，ELISPOT）可以分解成“酶聯(lián)免疫"和“斑點"兩部分,。“酶聯(lián)免疫"與ELISA中的含義相同,，都是指基于酶促放大反應(yīng)的免疫學(xué)檢測。與ELISA一樣,，ELISPOT的抗體也是包被于固體載體上,，所不同的是：ELISA抗體捕獲的抗原來自樣品溶液中已經(jīng)存在的、均勻分布的抗原分子,，而ELISAPOT抗體捕獲的抗原來自樣品細(xì)胞在檢測當(dāng)時新鮮分泌的抗原分子,；ELISA顯示出來的是或深或淺的有色溶液，而ELISAPOT顯示出來的是沉積在固體基板上或多或少的有色斑點,。

隨著酶聯(lián)免疫分析技術(shù)在醫(yī)學(xué)及生物學(xué)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用, 使體外檢測各種細(xì)胞因子及抗體研究有了新的突破。在研究免疫應(yīng)答機(jī)制時以往常用用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測體液中游離的細(xì)胞因子（CK）或抗體,，但由于游離的循環(huán)抗體或 CK 的半哀期不同,，使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結(jié)合，而不能確切的反映體內(nèi)的抗體及CK 的水平,。80 年代,，國外的科研工作者根據(jù) ELISA 技術(shù)的基本原理,，建立了體外檢測特異性抗體分泌細(xì)胞和 CK 分泌細(xì)胞的固相酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)（ELISPOT）。因其具有較高的特異性和敏感性,，目前正被國內(nèi)外廣泛應(yīng)用,，對探索自身免疫系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制具有重要意義。

應(yīng)用范圍：

德國BIOSYS公司產(chǎn)品,，該EliSpot Reader是針對35-100mm培養(yǎng)碟,、載片、6-384孔多孔板和微量培養(yǎng)板的自動檢測和分析儀器,。適用于目前實驗室常用的各種培養(yǎng)板上酶聯(lián)斑點(Elispot),、病毒斑（ Viral Plaque）、克隆形成（CFU）,、腫瘤細(xì)胞集落形成（HTCFA）,干細(xì)胞集落形成試驗等實驗結(jié)果的分析,。

Elispot，SARS COV2測定,，抗病毒,，藥物，氟蟲,，細(xì)胞/活/死/凋亡細(xì)胞,，轉(zhuǎn)染，MCMV和HCMV測定,，HEK 293測定,，FOCI測定，中和測定,，馬立克氏病病毒,，類器官，轉(zhuǎn)基因測定,，菌落的細(xì)胞感染測定 計數(shù),，抗生素效力，腺病毒,。

For Elispot, SARS COV2 Assay, cell infection assay antiviral, drug, flourospot, live/dead/apoptotic cell, transfection, MCMV and HCMV assay, HEK 293 assay, FOCI assay, neutralisation assay, Marek's disease virus, organoids, transgene assay, colony counting, antibiotic potency, adenovirus

德國biosys公司介紹

德國biosys由化學(xué)家兼工程師Werner Freber創(chuàng)建于1986年,，專注于 EliSpot酶聯(lián)免疫斑點計數(shù)和定量自動化檢測分析設(shè)備30多年，biosys公司的立體3D雙光照明（增強(qiáng)斑點與背景的對比度,，有效抑制板孔側(cè)壁反光造成的“幻影現(xiàn)象”,，提高檢測度），能進(jìn)行單斑點,、每孔光密度測定以定量細(xì)胞因子分泌的照明系統(tǒng),，解決了ELISPOT斑點計數(shù)的快速化，標(biāo)準(zhǔn)化和斑點信息的詳細(xì)化，并且可以對細(xì)胞因子進(jìn)行定量分析,，是能進(jìn)行單斑點,、每孔光密度測定以定量細(xì)胞因子分泌的照明系統(tǒng)，獲得應(yīng)用于ELISPOT斑點識別的3D雙光源技術(shù),，*實現(xiàn)對ELISPOT膜板和ELISPOT透明板的良好識別,，采用改進(jìn)機(jī)械結(jié)構(gòu)的前置式載物臺和自動開關(guān)密閉檢測室，同一孔中同時識別多至12色ELISPOT斑點,，*實現(xiàn)熒光ELISPOT檢測,，歐盟科技項目：Eureka Project 2956（多種細(xì)胞因子分析儀）儀器。

biosys的bioreader（bioreader 7000系列）和 biocount（biocount6000系列）已成為Elispot酶聯(lián)免疫斑點檢測分析的金標(biāo)準(zhǔn),。

ELISPOT技術(shù)解決方案提供商,。biosys 的產(chǎn)品包括 ELISPOT 分析儀硬件、分析軟件,、試劑和標(biāo)準(zhǔn)樣等,。CTL擁有自己的，符合GLP規(guī)范的高通量ELISPOT實驗室,，是世界上能提供全套 ELISPOT 服務(wù),，包括 ELISPOT 的質(zhì)量控制、標(biāo)準(zhǔn)化,、臨床應(yīng)用和技術(shù)服務(wù),、E L I S P O T技術(shù)培訓(xùn)和承擔(dān)來自N I H和F D A等部門重大基金的綜合性技術(shù)服務(wù)提供商。

Biosys酶聯(lián)免疫斑點圖像計數(shù)和分析產(chǎn)品特點：

●立體3D雙光照明系統(tǒng)：

能進(jìn)行單斑點,、每孔光密度測定以定量細(xì)胞因子分泌的照明系統(tǒng),。
● 彩色成像及分析系統(tǒng)：

高分辨率2340×2000 分辨率SONY fire wire真彩數(shù)碼成像系統(tǒng)，可進(jìn)行雙色或三色Elispot實驗結(jié)果的檢測,。也適用于病毒斑(Viral Plaque),、克隆形成(CFU)、腫瘤細(xì)胞集落形成（HTCFA）,干細(xì)胞集落形成試驗等,。  數(shù)據(jù)量高達(dá)5M 的圖像數(shù)據(jù)（單孔）﹑雙色以上的圖像分析功能, 一體化HP 20’ 液晶顯示器.
● 高精度X－Y定位載板臺：

采用高精度齒輪步進(jìn)電機(jī),，避免了皮帶輪步進(jìn)電機(jī)的打滑和老化，定位精度<0.01mm,。

  高精度微步進(jìn)電機(jī),、齒輪傳動方式、樣品架移動精度< 0.01mm
● 通用性強(qiáng)：

適用各種載玻片,、35-100mm培養(yǎng)碟,、6 / 12 / 24 / 48 / 96/384孔各型培養(yǎng)板和滴定板。對于實驗室常用的U-Cytech公司,、 Mabtech公司,、 R&D公司,、 Diaclone公司、 Millipore公司,、Whatman公司、 Nunc公司等各型實驗室常用ELISPOT KIT（透明板,、白色板,、PVDF和尼龍膜板）、Greiner等公司的透明培養(yǎng)板,、不透明（白色）培養(yǎng)板,、以及PVDF膜培養(yǎng)板均適用，檢測Elispot斑點同時可以分析腫瘤細(xì)胞的集落,、克隆斑,、病毒斑的識別。
您可以從任何來源和細(xì)胞系（無論是人還是動物）中選擇Elispot分析,。

● 自動聚焦：

需進(jìn)行不同類型培養(yǎng)板的檢測時,，無須手動調(diào)焦，轉(zhuǎn)換更為方便,。
●高靈敏性,，高特異性的優(yōu)點：

動態(tài)“像素周圍識別”，模糊,、彌散,、過大、過小斑點以及高背景或不規(guī)則背景均可檢測,。

“自動邊緣識別技術(shù)”,“動態(tài)背景識別” Bioreader不是采用一個固定的背景平均“洗去”值,，對不規(guī)則背景有很大意義。
Bioreader自動識別和去除纖維, 還可以調(diào)節(jié)圖像參數(shù), 不同程度“洗去”背景,，讓背景和斑點顏色對比,。
●高分辨率：

每孔可檢測多至2000個斑點，直徑>3µm 的斑點即可被有效檢測（通常設(shè)定檢測的斑點大小為20-50µm）,。

所有Bioreader型號均配備5 MPixel相機(jī),，Bioreader-F-z-i可使用集成的顯微變焦鏡頭提供多達(dá)200倍的放大倍率。如果用戶需要更多印版格式并正在尋找便宜的變焦效果,，則可選更多像素的相機(jī),，可以升級光學(xué)組件和攝像頭
●邊沿識別系統(tǒng)：

尤其針對透明板、白色PVDF板,，可有效識別板孔邊緣,，保證整個板孔的計數(shù)。
●光密度值測定：

應(yīng)用ELISA透光測量原理,，可對每個斑點,，每個孔進(jìn)行光密度值測定,，定量分析細(xì)胞因子分泌。
●*的WASH OUT背景補(bǔ)償功能：

對于背景重的培養(yǎng)板孔可進(jìn)行自動背景補(bǔ)償調(diào)節(jié),。
●測量結(jié)果可信：

已經(jīng)過MABTECH, U-Cytech, Diaclone, Pharmingen, R&D等公司ELISPOT產(chǎn)品的驗證,，測量結(jié)果可信度高。
●用戶自定義參數(shù)和再分析：

用戶可根據(jù)試驗情況設(shè)置斑點識別參數(shù),，直接重新分析已掃描數(shù)據(jù),，不必重復(fù)掃描,。相同參數(shù)下分析結(jié)果可重復(fù)性為+/-*。
●“One－Click”測量區(qū)域選擇：

直觀的板孔選擇界面，可輕松進(jìn)行單孔,、任意孔區(qū)域,、全板掃描,。
●智控分析方式：

用戶可手動選擇需去除的斑點,，自定義需去除的破損區(qū)域或無法識別區(qū)域，測量結(jié)果更可信,。
●數(shù)據(jù)分析全面：

包括培養(yǎng)孔原始數(shù)據(jù)如每孔斑點數(shù),、斑點幾何形狀（直徑、圓度,、曲率,、毛糙度）參數(shù)、每個斑點坐標(biāo),、光密度（提示細(xì)胞因子量）等以及樣本均數(shù),、方差、統(tǒng)計學(xué)分布等多種統(tǒng)計數(shù)據(jù)和分析圖表,。
●直接輸出模式：

可將整板圖像,，單孔圖像，每孔斑點數(shù),，斑點詳細(xì)數(shù)據(jù),、分布、和統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果直接輸出到Word,、Excel,、Powerpoint?？蛇x擇HTML, BMP, JPEG, PDF等多種格式,。
●檢測快速：超高精度掃描每個培養(yǎng)板約需12-15分鐘；快速掃描每個培養(yǎng)板約需6-8分鐘 ,。
● 歐盟CE認(rèn)證,、符合21 CFR PART 11認(rèn)證要求

●軟件方面
預(yù)設(shè)試驗分析模式、方便使用,；分析參數(shù)開放,、人機(jī)互動更可靠
Bioreader預(yù)先設(shè)置30多種針對各種板型的分析方法,，分析參數(shù)開放，用戶還可自定義分析方法,，人機(jī)互動可分析各種不同情況的Elispot實驗板結(jié)果,。

●歷史悠久，產(chǎn)品成熟度高,、文獻(xiàn)量大：

30多年歷史驗證,，1500多個實驗室成功使用，國內(nèi)有50多的單位成功使用,，無技術(shù)和應(yīng)用風(fēng)險。

相機(jī)和光學(xué)分辨率

在多孔板上,，Bioreader®7000 Fzi micro的大分辨率是多少,？

單細(xì)胞> 3 µ，聚焦點10-2000 µ或噬菌斑100-5000 µ,，細(xì)胞克隆50-2000 µ或更多,。

BIOSYS使用“真實”光學(xué)放大倍數(shù)來實現(xiàn)此分辨率

 德國Biosys酶聯(lián)免疫斑點圖像計數(shù) 總代理

德國Biosys酶聯(lián)免疫斑點圖像計數(shù) 總代理

Bioreader5000的性能及特點簡介

熒光Elispot
Bioreader 5000系列可以檢測熒光Elispot斑點
Biorader 5000是Elipsot領(lǐng)域商業(yè)化能檢測熒光Elipsot斑點的儀器.
這也是Elipsot領(lǐng)域同時檢測3種以上細(xì)胞因子的新的應(yīng)用儀器

圖像處理方面 五大*圖像技術(shù)，分辨率更高,、斑點圖像更清晰,、結(jié)果

產(chǎn)品特點：

l       專業(yè)的外觀設(shè)計

l       一體化HP 20’ 液晶顯示器

l       3D立體圖像照明系統(tǒng)

l       前置載物臺、密閉式檢測室

l       真彩2340×2000 分辨率的索尼公司火線（Firewire）數(shù)碼攝像系統(tǒng)

l       數(shù)據(jù)量高達(dá)5M 的圖像數(shù)據(jù)（單孔）﹑雙色以上的圖像分析功能

l       高精度微步進(jìn)電機(jī),、齒輪傳動方式,、樣品架移動精度< 0.01mm

l       五大*圖像技術(shù)，分辨率更高,、斑點圖像更清晰,、結(jié)果

l       預(yù)設(shè)試驗分析模式、方便使用,；分析參數(shù)開放,、人機(jī)互動更可靠

l       快速檢測：2-3 分鐘完成96孔板的檢測

l       簡潔的軟件操作界面，規(guī)范的文件管理

l       適用6/12/24/96 孔任何品牌/類型的微孔板

l       適用ELISPOT/病毒斑/腫瘤細(xì)胞的集落/單克隆抗體的細(xì)胞克隆

l       軟件設(shè)計符合美國FDA 21 CFR PART 11

l       符合歐盟CE 標(biāo)準(zhǔn)

l       歐盟科技項目：Eureka Project 2956 (多種細(xì)胞因子分析儀)