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人生長激素釋放因子試劑盒

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人生長激素釋放因子試劑盒

人生長激素釋放因子試劑盒通常指人促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA 試劑盒,,以下是具體介紹:

檢測原理


一般采用雙抗體夾心法。將純化的抗人 GHRH 抗體包被在微孔板上作為固相抗體,,加入含有 GHRH 的標準品或待測樣本,,樣本中的 GHRH 會與固相抗體特異性結合。再加入 HRP 標記的抗 GHRH 抗體,,形成 “抗體 - 抗原 - 酶標抗體” 復合物,。洗滌后加入底物 TMB,在 HRP 催化下 TMB 轉化為藍色,,加酸后變?yōu)辄S色,,顏色深淺與樣本中 GHRH 含量正相關,通過酶標儀在 450nm 波長測吸光度值,,與標準曲線對比計算出樣本中 GHRH 濃度,。

試劑盒組成


不同品牌略有差異,但通常包含:


  1. 酶聯(lián)板:一般為 96 孔或者 48 孔,,為反應提供固相載體,。

  2. 標準品:通常為 2 瓶凍干品,復溶后可得到已知濃度的 GHRH 標準溶液,,用于制作標準曲線,。

  3. 樣品稀釋液:用于稀釋待測樣本,使樣本濃度處于試劑盒的檢測范圍內,。

  4. 生wu素標記抗體稀釋液:用來稀釋生wu素標記的抗體,。

  5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液:用于稀釋辣根過氧化物酶標記的親和素。

  6. 生wu素標記抗體:與樣本中的 GHRH 和固相抗體結合,,形成夾心結構,。

  7. 辣根過氧化物酶標記親和素:與生wu素標記抗體結合,參與顯色反應,。

  8. 底物溶液:如 TMB 底物溶液,,在酶的作用下發(fā)生顯色反應。

  9. 濃洗滌液:使用時需用蒸餾水稀釋,,用于洗滌酶標板,,去除未結合的物質。

  10. 終止液:如 2N H?SO?溶液,,用于終止顯色反應,。

樣本處理


  1. 血清:靜脈采血后,,待血液自然凝固,1000×g 離心 15 分鐘,,取上清,。

  2. 血漿:使用 EDTA、檸檬酸鹽或肝素作為抗凝劑,,采血后 1000×g 離心 60 分鐘,,取血漿。

  3. 細胞上清液:細胞培養(yǎng)后,,1000×g 離心 32 分鐘,,取上清。

  4. 組織勻漿:組織加生理鹽水搗碎,,1000×g 離心 33 分鐘,,取上清。若不立即使用,,應在 - 20℃或 - 70℃保存,。

技術指標


以常見試劑盒為例:


  1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數 R 值大于等于 0.9900。

  2. 靈敏度:檢測濃度小于 10pg/ml,。

  3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應,。

  4. 重復性:板內、板間變異系數均小于 15%,。

保存與運輸


  1. 保存:未開封的試劑盒一般在 2-8℃保存,。已開封的試劑盒,不同組件保存條件可能不同,,標準品等可能需 - 20℃保存,。

  2. 運輸:通常采用 4℃藍冰運輸,確保試劑盒在運輸過程中處于穩(wěn)定的低溫環(huán)境,。




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