品牌：porvair sciences

MicroluteTM PPP*改變了蛋白質(zhì)沉淀的世界

貨號(hào)：240010  240100  240200

Porvair Sciences推出了新-一代高通量蛋白質(zhì)沉淀----MicroluteTM ppp蛋白質(zhì)沉淀板（PPP）,。Microlute™ PPP是我們樣品制備材料系列中的-新產(chǎn)品,，致力于使科學(xué)家從血漿和血清中有效沉淀蛋白質(zhì)。我們的蛋白質(zhì)沉淀板專為簡(jiǎn)化自動(dòng)化而設(shè)計(jì),，可防治滲漏和堵塞,，從而實(shí)現(xiàn)-佳沉淀效果。

Microlute™ 蛋白質(zhì)沉淀板如何工作,？
   由于生物樣品中所含的蛋白質(zhì),，下游應(yīng)用通常會(huì)面臨干擾。為了優(yōu)化諸如藥物研究等領(lǐng)域的分析結(jié)果,，科學(xué)家需要一種能夠有效地從諸如血漿或血清等生物流體的蛋白質(zhì)基質(zhì)中去除小分子的工具,。如果殘留在樣品中，蛋白質(zhì)會(huì)沉淀到HPLC流動(dòng)相中,，并導(dǎo)致儀器阻塞,，甚至通過(guò)抑制或增強(qiáng)離子源中的離子來(lái)影響LC-MS分析物的響應(yīng),。

   使用CRASH方法，我們的Microlute™ PPP用乙腈使蛋白質(zhì)變性,，并過(guò)濾出絮凝劑,，使研究人員可以一次處理96個(gè)樣品。CRASH蛋白質(zhì)凈化技術(shù)恰如其分地做到了：當(dāng)添加乙腈時(shí),，樣品中的蛋白質(zhì)會(huì)從溶液中“崩裂”并直接沉淀在每個(gè)孔中,，從而解決了上述所有常見問(wèn)題。

Microlute™ 蛋白質(zhì)沉淀板的主要功能和優(yōu)點(diǎn):

   成功的質(zhì)譜分析（MS）在很大程度上取決于高質(zhì)量,、無(wú)蛋白質(zhì)樣品的分離,。傳統(tǒng)上，科學(xué)家使用常見的基于離心的技術(shù)（例如鹽誘導(dǎo)或等電沉淀）從生物體液中去除蛋白質(zhì),。而使用蛋白質(zhì)沉淀板,，Porvair Sciences提供了另一種蛋白質(zhì)沉淀方法。

   96孔過(guò)濾板的高通量形式具有一系列優(yōu)勢(shì),，其中包括低結(jié)合力的新型雙重熔塊,，可-大程度地回收分析物/化合物，從而防止泄露,，并確保在施加真空時(shí)樣品始終流過(guò)沉淀板,。Microlute™ PPP套件還帶有可選的排放蓋和頂蓋墊，用于渦流樣品混合,。

訂購(gòu)信息：

操作指南介紹

   生物樣品通常含有干擾下游應(yīng)用的蛋白質(zhì),。 如果不去除蛋白質(zhì)，它們會(huì)沉淀到HPLC流動(dòng)相中,， 從而導(dǎo)致色譜柱或系統(tǒng)堵塞,。 使用LC-MS，分析物的響應(yīng)會(huì)受到蛋白質(zhì)的影響,，從而導(dǎo)致離子抑 制或離子源增強(qiáng),。 Microlute™蛋白質(zhì)沉淀板（Porvair Sciences，貨號(hào)：240100）旨在有效地從血漿和血清中沉淀蛋白質(zhì),。 新穎的雙重玻璃料設(shè)計(jì)可確保樣品一直保持到準(zhǔn)備使用為止,，沒有泄漏，并且樣品流速穩(wěn)定,。

方法步驟

1. 將蛋白質(zhì)沉淀板放在合適的收集板上（貨號(hào)：219250）

2. 在板的每個(gè)孔中加入300ul乙腈,。

3. 向每個(gè)孔中添加100ul血漿樣品。

4. 通過(guò)以500轉(zhuǎn)/分鐘的速度將沉淀板和收集板放在平板振蕩器上2分鐘,，將溶液混合在每個(gè)孔 中,。

5. 以500 x g的速度離心3分鐘，以將上清液收集在潔凈的收集板上。

注意事項(xiàng)

• 可以使用真空歧管或正壓代替離心機(jī),。

• 乙腈與血漿樣品的比例為3：1,。

• 適用于血清或血漿樣品

應(yīng)用案例：

Summary簡(jiǎn)介

   高質(zhì)量、不含蛋白質(zhì)的樣品的分離是成功進(jìn)行質(zhì)譜（MS）分析的重要先決條件,。 蛋白質(zhì)通常通過(guò)鹽誘導(dǎo)或等電沉淀而沉淀,。 Porvair Sciences提供了另一種用于蛋白質(zhì)沉淀的96孔濾板。 與傳統(tǒng)的基于離心的技術(shù)相比,，高通量格式對(duì)實(shí)驗(yàn)是有利的,。 在此簡(jiǎn)短的應(yīng)用筆記中，說(shuō)明了Microlute™蛋白質(zhì)沉淀板去除蛋白質(zhì)的功效,。

   生物樣品中通常含有干擾下游應(yīng)用的蛋白質(zhì),。對(duì)血漿或血清等生物體液中的小分子進(jìn)行藥理研究需要在分析之前將其從蛋白質(zhì)基質(zhì)中去除。 如果不去除蛋白質(zhì),，它們會(huì)沉淀到HPLC流動(dòng)相中,，從而導(dǎo)致色譜柱或系統(tǒng)堵塞。 使用LC-MS,，分析物的響應(yīng)會(huì)受到蛋白質(zhì)的影響，從而導(dǎo)致離子抑制或離子源增強(qiáng),。

   Microlute™蛋白質(zhì)沉淀板（Porvair Sciences,，貨號(hào)：240100）設(shè)計(jì)用于從血漿和血清中有效沉淀蛋白質(zhì)。 新穎的雙重玻璃料設(shè)計(jì)確保樣品在使用前保持正常,，沒有泄漏,，并且在施加真空時(shí)樣品的流速恒定。 為了證明Microlute™蛋白質(zhì)沉淀板的性能,，將使用溶劑沉淀法的血漿蛋白裂解,，并與領(lǐng)-先競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手進(jìn)行了比較。

Method方法

   按照制造商的說(shuō)明,，使用100μl豬血漿（Sigma P2891）進(jìn)行蛋白裂解,，并遵循操作規(guī)程。 簡(jiǎn)而言之,，將每個(gè)沉淀板加載到Porvair Sciences 96孔收集板上（產(chǎn)品代碼：219250）,。 將乙腈與豬血漿以3：1的比例添加，在平板振蕩器上攪拌約1-3分鐘,，然后以500 x g離心3分鐘以收集洗脫液,。 使用Porvair Sciences UltravapTM Levante全自動(dòng)蒸發(fā)儀，使用96直針頭（產(chǎn)品代碼：229226和229036）在30°C,，4 psi氮?dú)饬飨?，針?7mm至41mm的條件下將洗脫液干燥35分鐘。 然后將樣品重新溶于100 ml PBS中，并使用BIORAD DCTM蛋白質(zhì)測(cè)定法（產(chǎn)品代碼：5000111）測(cè)試蛋白質(zhì)含量,。 樣品重復(fù)三次,。.

Results結(jié)果

Microlute™蛋白質(zhì)沉淀板呈現(xiàn)清晰的濾液，沒有蛋白質(zhì)突破的跡象,。與競(jìng)爭(zhēng)者相比,，洗脫液中蛋白質(zhì)的含量要低得多（圖1）。 Microlute™蛋白沉淀板還具有更高的重現(xiàn)性,。

使用MicroluteTM ppp蛋白質(zhì)沉淀板的結(jié)果

Conclusion結(jié)論

Microlute™蛋白質(zhì)沉淀板為蛋白質(zhì)沉淀提供了一種簡(jiǎn)單且經(jīng)濟(jì)高效的解決方案,。 這份簡(jiǎn)短的應(yīng)用說(shuō)明著重介紹了血漿中蛋白質(zhì)的大量減少，其高通量形式允許在HPLC或LCMS的下游應(yīng)用,。 新型雙重熔塊具有低結(jié)合力,，因此可-大程度地回收分析物/化合物。 Microlute™蛋白沉淀板無(wú)泄漏,，可有效阻止沉淀,，并且易于自動(dòng)化，是高通量蛋白沉淀的理-想選擇,。