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漿蛋白WB實(shí)驗(yàn)

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WB實(shí)驗(yàn)

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   上海達(dá)為科生物科技有限公司,,位于上海長(zhǎng)江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué),、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),,能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究,、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù),。

公司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員,。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士后)2人,,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,,主要致力于基因組學(xué),、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué),、代謝組學(xué),、生物化學(xué)、病理檢測(cè),、基因檢測(cè)等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過高度細(xì)分,、較好的服務(wù)平臺(tái),,為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。目前,,,,涉及臨床醫(yī)學(xué)、腫瘤生物學(xué),、免疫學(xué),、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等生命科學(xué),、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域,。

我們的目標(biāo)是為了使您的工作更輕松、更快捷,。為了實(shí)現(xiàn)一站式服務(wù)我們不斷更新實(shí)驗(yàn)方法和引進(jìn)新的產(chǎn)品,,控制和降低各種成本,,為您的研究加油。這既是一項(xiàng)長(zhǎng)期而艱巨的工作,,又是一項(xiàng)光榮的工作,,同時(shí)也是我們企業(yè)發(fā)展的動(dòng)力源泉。

 

 

 

 

制作動(dòng)物模型 細(xì)胞培養(yǎng) 分子生物學(xué)檢測(cè) 病理學(xué)形態(tài)檢測(cè) 蛋白質(zhì)技術(shù) 免疫學(xué)檢測(cè) 提供培訓(xùn)服務(wù)各種檢驗(yàn)儀器設(shè)備,、玻璃儀器及器具,、一次性耗材等

應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

 一個(gè)基因表達(dá)的終結(jié)果是產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)(或酶)。因此檢測(cè)蛋白質(zhì)是測(cè)定基因表達(dá)的主要標(biāo)志,,檢測(cè)蛋白質(zhì)的方法很多,,除ELISA法外,也可用與檢測(cè)DNARNA相類似的吸印方法,。前兩法有“南”和“北”之意,,故本法遂被延伸稱為Western(西)印跡法,該法能用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分辨出與專一抗血清結(jié)合的專一性蛋白質(zhì),。將聚丙烯酰胺凝膠上分辨出的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上并與一體共孵,。一抗專一地與待分離蛋自質(zhì)的抗原決定簇結(jié)合,然后用另一種蛋自質(zhì),,如135I-蛋白A或辣根過氧化物酶連接的山羊抗IgG檢測(cè)已結(jié)合上去的抗體,。本法所需時(shí)間6小時(shí)或過夜。 蛋白質(zhì)的聚丙烯酰胺凝膠電泳 幾乎所有蛋白質(zhì)電泳分析都在聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行,,而所用條件總要確保蛋白質(zhì)解離成單個(gè)多肽亞基并盡可能減少其相互間的聚集,。常用的方法是將強(qiáng)陰離子去污劑SDS與某一還原劑并用,并通過加熱使蛋白質(zhì)解離后再加樣于電泳凝膠上,。變性的多肽與SDS結(jié)合并因此而帶負(fù)電荷,,由于多肽結(jié)合SDS的量幾乎總是與多肽的分子量成正比而與其序列無關(guān),因此SDS多肽復(fù)合物在聚丙烯酰凝膠電泳中的遷移只與多肽的大小相關(guān),。在達(dá)到飽和的狀態(tài)下,,每克多肽約可結(jié)合1.4克去污劑,借助已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)參照物,,則可測(cè)算出多肽鏈的分子量,。 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳大多在不連續(xù)緩沖系統(tǒng)中進(jìn)行,其電泳槽緩沖液的pH值與離子強(qiáng)度不同于配膠緩沖液,,當(dāng)兩電極間接通電流后,,凝膠中形成移動(dòng)界面,并帶動(dòng)加入凝膠的樣品中所含的SDS多肽復(fù)合物向前推進(jìn),。樣品通過高度多孔性的積層膠后,,復(fù)合物在分離膠表面聚集成一條很薄的區(qū)帶(或稱積層)。曲于不連續(xù)緩沖系統(tǒng)具有把樣品中的復(fù)合物全部濃縮于極小體積的能力,,故大大提高了SDS聚丙烯酰胺凝膠的分辨率,。 泛使用的不連續(xù)緩沖系統(tǒng)早是由Ornsstein1964)和Davis1964)設(shè)計(jì)的,,樣品和積層膠中含Tris-ClpH6.8),上下槽緩沖液含Tris-甘氨酸(pH8.3),,分離膠中含Tris-ClpH8.8)的,。系統(tǒng)中所有組分都含有0.1%的SDSLaemmli, 1970),樣品和積層膠中的氯離干形成移動(dòng)界面的先導(dǎo)邊界而甘氨酸分子則組成尾隨邊界,,在移動(dòng)界面的兩邊界之間是一電導(dǎo)較低而電位滴度較陡的區(qū)域,,它推動(dòng)樣品中的多肽前移并在分離膠前沿積聚,此處pH值較高,,有利于甘氨酸的離子化,,所形成的甘氨酸離子穿過堆集的多肽并緊隨氯離子之后,沿分離膠泳動(dòng),。從移動(dòng)界面中解脫后,,SDS多肽復(fù)合物成一電位和pH值均勻的區(qū)帶泳動(dòng)穿過分離膠,并被篩分而依各自的大小得到分離,。



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