1取材和固定

切取組織時(shí)應(yīng)使用鋒利的刀,、剪,，切取組織塊時(shí)，從刀的根部開始向后拉動(dòng)切開組織,。組織塊的厚度約為0.2~0.3cm,，大小為1.5cm×1.5cm x 0.3cm為宜。取好的組織塊置于10%福爾馬林中固定48小時(shí),；

2洗滌與脫水

將固定后的組織用流水沖洗,，去除殘留的固定液和雜質(zhì)。不同濃度的乙醇逐級(jí)脫水,，50%,、70%、85%、95%直至純酒精（無(wú)水乙醇）,，每級(jí)2小時(shí),。脫水必須在有蓋的瓶中進(jìn)行，以防止高濃度乙醇吸收空氣中水分導(dǎo)致濃度降低而使脫水不*,。需要保存的材料可脫水至70%乙醇時(shí)停留其中,，如需長(zhǎng)期保存，可加入等量的甘油,。

3透明

將組織塊置入純乙醇和二甲苯的等體積混合液中2小時(shí),，再進(jìn)入純二甲苯兩小時(shí)，再一次純二甲苯兩小時(shí),；材料經(jīng)過(guò)透明,，會(huì)顯示出前一步脫水的效果如何，若脫水*,，組織則顯現(xiàn)透明狀態(tài),，如組織中有白色云霧狀，說(shuō)明脫水不凈,，須返工處理,，但返工的效果往往不好。使用二甲苯透明時(shí),，應(yīng)避免其揮發(fā)和吸收空氣中的水分,，并保持其無(wú)水狀態(tài)。

4浸蠟

浸蠟須在恒溫箱中進(jìn)行,。先把組織材料塊放在熔化的石蠟和二甲苯的等量混合液浸漬1～2小時(shí),，再先后移入2個(gè)熔化的石蠟液中浸漬各3小時(shí)左右；

5包埋

包埋是使浸透蠟的組織塊包裹在石蠟中,。具體做法是,；先準(zhǔn)備好紙盒，將熔蠟倒入盒內(nèi),，迅速用預(yù)溫的鑷子夾取組織塊平放在紙盒底部,，切面朝下，再輕輕提起紙盒,，平放在冷水中,，待表面石蠟?zāi)毯罅⒓磳⒓埡邪慈胨校蛊溲杆倮鋮s凝固,，30min后取出,。

6切片

切片前將蠟塊在-20度冰箱中至少放置30min，以增加硬度,。將切片刀裝在刀片機(jī)的刀架上并固定緊,，固定蠟塊底座或蠟塊,，調(diào)整蠟塊與刀至合適位置，刀刃與蠟塊表面呈5度角,。調(diào)整切片機(jī)上的切片厚度為4-7μm,，然后切片。