1原理：TTC（2,，3，5—氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感復合物,，1894年*合成用來檢測種子的生存能力,，1958年開始用來染色檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結構酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,，與正常組織中的脫氫酶反應而呈紅色,，而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降，不能反應,，故不會產(chǎn)生變化呈蒼白,。
2 取腦：可麻醉后直接取腦或經(jīng)生理鹽水灌注后取腦。因為腦組織未用多聚甲醛固定,，所以較軟,，取腦時更應仔細，保持大腦的完整性,。
3 －20度冰箱中速凍20分鐘左右,，便于切片。
4 切片：一般切成5－6片,，每隔2mm切一片,。第*刀在腦前極與視交叉連線中點處；第二刀在視交叉部位,；第三刀在漏斗柄部位,；第四刀在漏斗柄與后葉尾極之間。（參考：張均田,，主編.現(xiàn)代藥理試驗方法）,。如果需計算面積的話，應切得均勻或用專門的腦槽,。
5將切片置于TTC中,，常規(guī)濃度為2%,，也有用1%或更低濃度的。
6用錫箔紙蓋住后,，放入37C溫箱15～30min,，不時翻動腦片，使均勻接觸到染色液,。也可以用將腦片放入多孔板,，再滴入TTC，覆以圓形蓋玻片使均勻染色,。
7 染色后效果：為皮層下梗死,。