廣州檢驗(yàn)科PCR實(shí)驗(yàn)室裝修設(shè)計(jì)

從PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局,、通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)兩個(gè)方面進(jìn)行設(shè)計(jì)要點(diǎn)分析，供設(shè)計(jì)和建設(shè)單位的相關(guān)人員參考,。

PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局設(shè)計(jì)要點(diǎn)分析

1,、平面功能分區(qū)要點(diǎn)分析

根據(jù)《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)》1.1條的要求，PCR實(shí)驗(yàn)室一般由試劑儲(chǔ)備區(qū),、標(biāo)本制備區(qū),、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增分析區(qū)4個(gè)區(qū)域組成,。

PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域的設(shè)置并不是一成不變的,，以下幾種情況需要說(shuō)明：

①如果樣本在擴(kuò)增之前需要粉碎處理，則需要增加一個(gè)區(qū)域用于樣品的粉碎;

②如果采用實(shí)時(shí)熒光PCR法,，則擴(kuò)增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個(gè)區(qū);

③如果采用全自動(dòng)化PCR分析儀,，則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個(gè)區(qū),。

以4個(gè)區(qū)域的實(shí)驗(yàn)室設(shè)置進(jìn)行設(shè)計(jì)要點(diǎn)分析,，如圖所示。

▲圖1 典型PCR 實(shí)驗(yàn)室工藝平面圖

2,、實(shí)驗(yàn)室功能與設(shè)備設(shè)計(jì)要點(diǎn)分析

(1)試劑儲(chǔ)備區(qū)

該區(qū)域主要完成試劑和主反應(yīng)混合液的儲(chǔ)存,、配制和封裝工作。所有運(yùn)送到該區(qū)域的試劑和材料不應(yīng)經(jīng)過(guò)其他區(qū)域,，試劑和原材料應(yīng)在本區(qū)內(nèi)儲(chǔ)存和制備,。本區(qū)域的氣壓應(yīng)相對(duì)外界保持正壓。該區(qū)域的設(shè)備主要是冰箱,、天平,、混勻器、低速離心機(jī),、加樣器,、可移動(dòng)紫外燈等,。由于該區(qū)域有多種試劑，所以“安全”應(yīng)是平面設(shè)計(jì)首要考慮因素,，平面設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)保持通風(fēng)流暢,、逃生暢通。首先,，實(shí)驗(yàn)臺(tái)布置在房間的兩側(cè),，中間的過(guò)道全部通向走廊便于疏散。同時(shí)根據(jù)人體工程學(xué)的標(biāo)準(zhǔn),，實(shí)驗(yàn)臺(tái)與實(shí)驗(yàn)臺(tái)通道設(shè)計(jì)為1500mm,，中間的通道可滿足兩邊坐人中間過(guò)人的要求。

(2)標(biāo)本制備區(qū)

該區(qū)域的功能是樣本的保存,、核酸提取和貯存,、樣本加入擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定DNA的合成。樣本應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)并儲(chǔ)存在本區(qū)內(nèi),，不得經(jīng)過(guò)其他區(qū)域,。對(duì)于氣流壓力的控制，由于在本區(qū)內(nèi)加樣操作可能產(chǎn)生氣溶膠,，為避免氣溶膠擴(kuò)散出去對(duì)外界造成污染,，本區(qū)應(yīng)對(duì)外界保持負(fù)壓;同時(shí)本區(qū)相對(duì)于擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)以及擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)為正壓，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染,。

該區(qū)域的設(shè)備主要是生物安全柜,、加樣器、臺(tái)式高速離心機(jī),、臺(tái)式低速離心機(jī)、水浴鍋,、冰箱,、混勻器和可移動(dòng)紫外燈等。其中需要注意的是,，生物安全柜.好選用B2型,，這種生物安全柜所有的吸入氣流和垂直氣流都經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)濾后排到室外，不再進(jìn)入生物安全柜循環(huán)或者返回該區(qū)域,，這種生物安全柜可避免提取核酸在柜內(nèi)反復(fù)循環(huán),，造成標(biāo)本之間交叉“污染”，出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果,。

(3)擴(kuò)增區(qū)

該區(qū)域的功能是DNA擴(kuò)增和擴(kuò)增片段的測(cè)定,。此外，反應(yīng)混合液(來(lái)自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液和已制備的DNA模板(來(lái)自標(biāo)本制備區(qū))的加入等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行,。對(duì)于氣流壓力的控制,，相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染,，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng),。個(gè)別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。

該區(qū)域的設(shè)備主要是核酸擴(kuò)增熱循環(huán)儀,、加樣器,、超凈臺(tái)等。其中熱循環(huán)儀的電源應(yīng),，并配備一個(gè)穩(wěn)壓電源或UPS,，以防止由于電壓的波動(dòng)對(duì)擴(kuò)增測(cè)定的影響。

(4)分析區(qū)

該區(qū)域的功能是擴(kuò)增產(chǎn)物的分析,。該區(qū)域可能會(huì)用到某些可致基因突變的有毒物質(zhì),，應(yīng)特別注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。對(duì)于氣流壓力的控制,，該區(qū)域是PCR實(shí)驗(yàn)的后一步,，壓力應(yīng)為.低，相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出,。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動(dòng),。

該區(qū)域的設(shè)備主要是加樣器,、電泳儀(槽)、電轉(zhuǎn)印儀,、雜交爐或雜交箱,、水浴箱、DNA測(cè)序儀,、酶標(biāo)儀和洗板機(jī)等,。

3、人流與物料流線設(shè)計(jì)要點(diǎn)分析

進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室區(qū)域工作人員應(yīng)該按照以下路徑：

走道→緩沖間→實(shí)驗(yàn)區(qū)

工作人員退出實(shí)驗(yàn)室的路徑為：

實(shí)驗(yàn)區(qū)→緩沖間→走道

進(jìn)入各個(gè)區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行,，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色),。工作人員離開(kāi)時(shí)，不得將工作服帶出,。這種人員的單向流動(dòng)可以降低因人員的流動(dòng)帶來(lái)的交叉污染風(fēng)險(xiǎn),。

所有的物品進(jìn)入實(shí)驗(yàn)區(qū)必須經(jīng)過(guò)雙扉互鎖傳遞窗，利用傳遞窗消毒后才可進(jìn)入,，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有物品也必須經(jīng)過(guò)傳遞窗才可以傳遞到實(shí)驗(yàn)室以外的清潔公共區(qū),。這種物品有組織的單向流動(dòng)可以降低物品的差錯(cuò)和混淆的風(fēng)險(xiǎn)。

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