廣州檢驗科PCR實驗室裝修設(shè)計

從PCR實驗室平面布局,、通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)兩個方面進(jìn)行設(shè)計要點分析，供設(shè)計和建設(shè)單位的相關(guān)人員參考,。

PCR實驗室平面布局設(shè)計要點分析

1,、平面功能分區(qū)要點分析

根據(jù)《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)》1.1條的要求，PCR實驗室一般由試劑儲備區(qū),、標(biāo)本制備區(qū),、擴增區(qū)、擴增分析區(qū)4個區(qū)域組成,。

PCR實驗室區(qū)域的設(shè)置并不是一成不變的，以下幾種情況需要說明：

①如果樣本在擴增之前需要粉碎處理,，則需要增加一個區(qū)域用于樣品的粉碎;

②如果采用實時熒光PCR法,，則擴增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個區(qū);

③如果采用全自動化PCR分析儀，則標(biāo)本制備區(qū),、擴增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個區(qū),。

以4個區(qū)域的實驗室設(shè)置進(jìn)行設(shè)計要點分析，如圖所示,。

▲圖1 典型PCR 實驗室工藝平面圖

2,、實驗室功能與設(shè)備設(shè)計要點分析

(1)試劑儲備區(qū)

該區(qū)域主要完成試劑和主反應(yīng)混合液的儲存、配制和封裝工作,。所有運送到該區(qū)域的試劑和材料不應(yīng)經(jīng)過其他區(qū)域，試劑和原材料應(yīng)在本區(qū)內(nèi)儲存和制備,。本區(qū)域的氣壓應(yīng)相對外界保持正壓,。該區(qū)域的設(shè)備主要是冰箱、天平,、混勻器,、低速離心機、加樣器,、可移動紫外燈等,。由于該區(qū)域有多種試劑，所以“安全”應(yīng)是平面設(shè)計首要考慮因素,，平面設(shè)計時應(yīng)保持通風(fēng)流暢,、逃生暢通。首先,，實驗臺布置在房間的兩側(cè),，中間的過道全部通向走廊便于疏散,。同時根據(jù)人體工程學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)，實驗臺與實驗臺通道設(shè)計為1500mm,，中間的通道可滿足兩邊坐人中間過人的要求,。

(2)標(biāo)本制備區(qū)

該區(qū)域的功能是樣本的保存,、核酸提取和貯存,、樣本加入擴增反應(yīng)管和測定DNA的合成。樣本應(yīng)直接運送至該區(qū)并儲存在本區(qū)內(nèi),，不得經(jīng)過其他區(qū)域,。對于氣流壓力的控制，由于在本區(qū)內(nèi)加樣操作可能產(chǎn)生氣溶膠,，為避免氣溶膠擴散出去對外界造成污染,，本區(qū)應(yīng)對外界保持負(fù)壓;同時本區(qū)相對于擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)以及擴增產(chǎn)物分析區(qū)為正壓，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染,。

該區(qū)域的設(shè)備主要是生物安全柜,、加樣器、臺式高速離心機,、臺式低速離心機,、水浴鍋、冰箱,、混勻器和可移動紫外燈等,。其中需要注意的是，生物安全柜.好選用B2型,，這種生物安全柜所有的吸入氣流和垂直氣流都經(jīng)過高效過濾器過濾后排到室外,，不再進(jìn)入生物安全柜循環(huán)或者返回該區(qū)域，這種生物安全柜可避免提取核酸在柜內(nèi)反復(fù)循環(huán),，造成標(biāo)本之間交叉“污染”,，出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

(3)擴增區(qū)

該區(qū)域的功能是DNA擴增和擴增片段的測定,。此外,，反應(yīng)混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液和已制備的DNA模板(來自標(biāo)本制備區(qū))的加入等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。對于氣流壓力的控制,，相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓,，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染,，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)不必要的走動,。個別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺內(nèi)進(jìn)行。

該區(qū)域的設(shè)備主要是核酸擴增熱循環(huán)儀,、加樣器,、超凈臺等,。其中熱循環(huán)儀的電源應(yīng)，并配備一個穩(wěn)壓電源或UPS,，以防止由于電壓的波動對擴增測定的影響,。

(4)分析區(qū)

該區(qū)域的功能是擴增產(chǎn)物的分析。該區(qū)域可能會用到某些可致基因突變的有毒物質(zhì),，應(yīng)特別注意實驗人員的安全防護(hù),。對于氣流壓力的控制，該區(qū)域是PCR實驗的后一步,，壓力應(yīng)為.低,，相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出,。為避免氣溶膠所致的污染,，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動。

該區(qū)域的設(shè)備主要是加樣器,、電泳儀(槽),、電轉(zhuǎn)印儀,、雜交爐或雜交箱、水浴箱,、DNA測序儀,、酶標(biāo)儀和洗板機等。

3,、人流與物料流線設(shè)計要點分析

進(jìn)入實驗室區(qū)域工作人員應(yīng)該按照以下路徑：

走道→緩沖間→實驗區(qū)

工作人員退出實驗室的路徑為：

實驗區(qū)→緩沖間→走道

進(jìn)入各個區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行,，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開時,，不得將工作服帶出,。這種人員的單向流動可以降低因人員的流動帶來的交叉污染風(fēng)險,。

所有的物品進(jìn)入實驗區(qū)必須經(jīng)過雙扉互鎖傳遞窗,，利用傳遞窗消毒后才可進(jìn)入,，實驗室內(nèi)所有物品也必須經(jīng)過傳遞窗才可以傳遞到實驗室以外的清潔公共區(qū)。這種物品有組織的單向流動可以降低物品的差錯和混淆的風(fēng)險,。

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