實(shí)驗(yàn)儀器

超凈工作臺,、CO2培養(yǎng)箱,、生物倒置顯微鏡、6孔板(其他的也可以,，但感覺6孔比較好,，大小適中)、marker筆,、直尺20,、微升槍頭(滅菌)、無血清培養(yǎng)基,、PBS

細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min (超凈臺內(nèi))

實(shí)驗(yàn)流程

1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,，均勻得劃橫線，大約每隔0.5~1cm- -道,，橫穿過孔,。每孔至少穿過5條線。

2.在空中加入約5X105個細(xì)胞,，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿,。

3.第二天用槍頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線劃痕,，槍頭要垂直,，不能傾斜。

4.用PBS洗細(xì)胞3次,，去處劃下的細(xì)胞,，加入無血清培養(yǎng)基。

5.放入37度5%CO2培養(yǎng)箱,，培養(yǎng),。按0, 6, 12, 24小時取樣，拍照,。

細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)服務(wù)內(nèi)容與方法

1,、使用marker筆在6孔板背后，均勻得劃橫線,大約每隔0.5-1cm-道,，橫穿過孔,。每孔至少穿過5條線。

2,、在孔中加入約5*105個細(xì)胞,，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿,。

3,、第二天用槍頭比著直尺,，盡量垂至于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直,，不能傾斜,。

4、用PBS洗細(xì)胞3次,，去除劃下的細(xì)胞,，加入無血清培養(yǎng)基。

5,、放入37度5%co2培養(yǎng)箱,，培養(yǎng),。按0, 6, 12, 24小時取樣,，拍照。