制備液相的目的是對產(chǎn)品的單體進(jìn)行提取和純化。與傳統(tǒng)的純化方法（如蒸餾,、萃?。┍容^，它是一種更有效的分離方法,，因此被廣泛應(yīng)用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上,。隨著合成、植化,、生化和制藥等領(lǐng)域?qū)Ω呒兌冉M份的需求不斷增加,，制備型液相色譜儀應(yīng)用的領(lǐng)域也在迅速的擴(kuò)大發(fā)展。  

制備液相色譜儀的使用步驟  

一,、開機(jī)  

1,、接通電腦和儀器電源(接通電源之前可先把吸頭拿到要使用的流動相瓶中)；  

2,、開儀器電源開關(guān),，一般先上后下，下為檢測器開關(guān),；  

3,、檢查流動相是否夠，儀器上記錄的溶劑量時(shí)候正確,；  

4,、開電腦,；  

5、打開儀器聯(lián)機(jī)軟件進(jìn)入界面,，點(diǎn)擊啟動設(shè)置泵流速為10,，此時(shí)儀器中應(yīng)該有液體流出；  

6,、點(diǎn)擊平衡然后點(diǎn)擊每個波長和調(diào)整,；  

沖一段時(shí)間，待壓力穩(wěn)定后可以進(jìn)樣,。  

二,、進(jìn)樣  

1,、將進(jìn)樣器扭到load朝上,，吸取一定量待分離液，  

快速注入,，做過的是吸取0.2毫升,；  

2、點(diǎn)擊控制界面菜單欄中“運(yùn)行控制”按鈕—樣品信息—設(shè)置信息存儲路徑(每次都要做),；  

3,、扭動進(jìn)樣器，使處于inload狀態(tài),，保留時(shí)間開始計(jì)時(shí),；  

4、接峰,；  

5,、所有峰出來后，點(diǎn)擊菜單欄中的中斷—中斷,，準(zhǔn)備重復(fù)進(jìn)樣,。  

三、關(guān)機(jī)  

1,、點(diǎn)擊中斷后沖幾分鐘,，將流速設(shè)為0，待壓力為0后將吸頭轉(zhuǎn)移到甲醇中,，并把流速設(shè)為10,；  

2、沖到已經(jīng)沒有東西被沖下為止,，一般需要半個小時(shí),。一般此時(shí)壓力早已穩(wěn)定；  

3,、將流速設(shè)為0,，點(diǎn)擊界面上的關(guān)閉(在啟動旁邊),；  

4、關(guān)閉窗口,，彈出的窗口都點(diǎn)肯定的,，如確定是等。  

日常簡易保養(yǎng)及維護(hù)  

1,、流動相的抽濾要求：色譜純試劑,，二次蒸餾水，緩沖鹽一定要過濾,。  

2,、制備型液相色譜儀吸濾頭：特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞；亦可用注射器吸取流動相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞,。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗,；清洗不成功則需要更換。  

3,、單向閥：如遇到泵壓不穩(wěn)或流動相不能抽取,，則可能是單向閥出現(xiàn)問題，卸下用異丙醇超聲波清洗,，清洗時(shí)須按其安裝的反相放置在小燒杯中,，切記不可與安裝方向倒置超洗！  

4,、泵頭：泵頭漏液或出現(xiàn)其它故障一般要申請維修（如漏液,，或更換柱塞桿及其密封墊等）。  

5,、過濾片：當(dāng)色譜峰出現(xiàn)異常情況時(shí),，有可能是此部件被污染，拆下用異丙醇超洗或更換制備型液相色譜儀過濾墊片  

6,、排液閥：此處不能*密封或漏液時(shí)一般是其中的墊片污染或磨損,，可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。  

7,、手動進(jìn)樣器：平時(shí)應(yīng)注意用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進(jìn)樣分析狀態(tài)清洗,；如出現(xiàn)漏液現(xiàn)象，原因極可能為轉(zhuǎn)子密封墊磨損或污染,，一般須申請維修或更換制備型液相色譜儀配件,。  

8、制備型液相色譜儀流通池：在色譜峰不正常時(shí)可能是此部件被污染可拆卸后取出其中的墊片用異丙醇超洗（可根據(jù)說明書進(jìn)行操作或申請維修）,。  

9,、工作站：出現(xiàn)死機(jī)可重啟計(jì)算機(jī)；不正常運(yùn)行時(shí)，首先可更換電腦測試其硬件故障,；或在本機(jī)上重新插撥接口,、重新安裝軟件。  

進(jìn)行分析時(shí)保留時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移,，有時(shí)發(fā)生快速變化,，有以下幾點(diǎn)原因：  

1、溫度控制不好,，解決方法是采用恒溫裝置,，保持柱溫恒定。  

2,、流動相發(fā)生變化,，解決辦法是防止流動相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等,。  

3,、柱子未平衡好，需對柱子進(jìn)行更長時(shí)間的平衡,。  

4,、流速發(fā)生變化,，解決辦法是重新設(shè)定流速,，使之保持穩(wěn)定。  

5,、泵中有氣泡,，可通過排氣等操作將氣泡趕出。  

6,、流動相不合適,，解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合。  

制備液相色譜主要用于以下領(lǐng)域：  

1.天然藥物化學(xué),、中藥化學(xué),。這是國內(nèi)目前廣泛的使用方法，為了弄清楚植物中的微量有效成分,，開放手工色譜柱早已不夠用了,，幾乎每個搞天然藥化的實(shí)驗(yàn)室都至少有一臺液相，土豪實(shí)驗(yàn)室人手一臺液相,。  

2.蛋白純化,。相對于前者，蛋白純化的起步要稍微晚一點(diǎn),，但是發(fā)展很迅速,。同時(shí)，由于外國儀器廠家在這個領(lǐng)域的優(yōu)勢不算太大，目前國內(nèi)也在這個領(lǐng)域加快發(fā)展,，搶占地盤,。  

3.藥物雜質(zhì)純化。由于合成工藝并不能做到100%的產(chǎn)率,，往往伴有副產(chǎn)品,，如何獲得微量的雜質(zhì)并確定結(jié)構(gòu)和含量，這就得靠液相色譜,。  

4.手性化合物的制備,。這個主要是有機(jī)合成和方法學(xué)的在用。