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安徽皖儀科技股份有限公司

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耶拿(全國)BiometraPCR儀售后維修電話

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 廣州潤禾茂科技有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號(hào)
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 其他
  • 更新時(shí)間 2022/1/6 14:50:19
  • 訪問次數(shù) 358

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全國售后維修服務(wù)中心;

產(chǎn)地類別 進(jìn)口 價(jià)格區(qū)間 1-3.5萬
儀器種類 其它PCR儀 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

北京.廣州.武漢.BiometraPCR儀售后維修電話:

北京Biometra維修中心:400-115.6785    急修用戶:135-2223.3163
廣州Biometra維修中心:020-8568.1121  急修用戶:177-2802.3252
武漢Biometra維修中心:400-115.6785    急修用戶:173-4331.3195

Biometra-pcr儀反應(yīng)體系與反應(yīng)條件標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
①引物長度:15-30bp,,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),,避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),,否則會(huì)形成引物二聚體,,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),,被擴(kuò)增的靶序列好有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。

Biometra-pcr儀 - 工作原理;
類似于DNA的天然復(fù)制過程,,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物,。
PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)  聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)間后,,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,,以便它與引物結(jié)合,,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;②模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,,溫度降至55℃左右,,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;③引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,,以dNTP為反應(yīng)原料,,靶序列為模板,按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理,,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程,,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板,。
 每完成一個(gè)循環(huán)需2~4分鐘,,2~3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。

Biometra-熒光定量PCR所使用的熒光化學(xué)可分為兩種:熒光探針和熒光染料,。
現(xiàn)將其原理簡述如下:
熒光探針:PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán),。探針完整時(shí),,報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步,。



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