美國伯樂T100 PCR維修電話

      BIO-RAD 公司具有20多年專業(yè)的PCR儀生產(chǎn)經(jīng)驗，業(yè)界半導體PCR儀的潮流,，滿足廣大客戶的不同需求,。T100 PCR儀傳承伯樂性能穩(wěn)定、技術(shù)創(chuàng)新的理念,，是科研人員的明智之選,。流線型簡潔設(shè)計的T100包括諸多優(yōu)點，如智能化觸屏操作,，具有8道編程梯度溫度以及快速,、穩(wěn)定的控溫性能，讓您的PCR實驗如此簡單,。

節(jié)省編程時間：直觀的觸屏操作,，使編程更為便捷 
快速優(yōu)化實驗流程：溫度梯度功能確保在一次實驗中優(yōu)化PCR條件，快速獲得**結(jié)果 
節(jié)省實驗室空間：機身小巧緊湊,，更堅固,，便于安防
**的文件管理模式：個性化文件夾及USB閃存，易于保存和備份程序
數(shù)據(jù)的高度一致性：性能穩(wěn)定,，升降溫速快,，重復性高，結(jié)果可靠
 

美國伯樂T100 PCR維修電話

* 主屏幕：超大5.7” 彩色 VGA觸摸屏 
* 用戶界面：直觀的圖形顯示,，易于編程 
* 數(shù)據(jù)端口：USB 
* 樣品體積：1-100ul 
* 樣品容量：96x0.2ml 
* 升降溫速率：**4℃/秒,，平均3℃/秒 
* 溫度范圍：4-100℃ 
* 溫度均一性：±0.5℃ 
* 溫度**性：±0.5℃ 
* 梯度溫差范圍：1-25℃ 
* 梯度溫控范圍：30-100℃ 
* 存儲程序：500個，通過USB擴展可無限

 故障一 ：假陽性
出現(xiàn)的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致,，有時其條帶更整齊,，亮度更高。
引物設(shè)計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,，因而在進行PCR擴增 時,，擴增出的PCR產(chǎn)物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,，容易出現(xiàn)假陽 性,。需重新設(shè)計引物。
靶序列或擴增產(chǎn)物的交叉污染：這種污染有兩種原因：一是整個基因組或大片段的交 叉污染,，導致假陽性,。這種假陽性可用以下方法解決：操作時應(yīng)小心輕柔，防止 將靶序列吸入加樣*內(nèi)或濺出離心管外,。除酶及不能耐高溫的物質(zhì)外,，所有試劑或 器材均應(yīng)高壓消毒。所用離心管及樣進*頭等均應(yīng)一次性使用,。必要時,，在加標本 前,，反應(yīng)管和試劑用紫外線照射，以破壞存在的核酸,。二是空氣中的小片段核酸污 染,，這些小片段比靶序列短，但有一定的同源性,?？苫ハ嗥唇樱c引物互補后,，可擴 增出PCR產(chǎn)物，而導致假陽性的產(chǎn)生,，可用巢式PCR方法來減輕或消除,。
 故障二 ： 出現(xiàn)非特異性擴增帶
　　PCR擴增后出現(xiàn)的條帶與預計的大小不一致，或大或小,，或者同時出現(xiàn)特異性擴增帶 與非特異性擴增帶,。非特異性條帶的出現(xiàn)，其原因：一是引物與靶序列不*互補,、 或引物聚合形成二聚體,。二是Mg2+離子濃度過高、退火溫度過低,，及PCR循環(huán)次數(shù) 過多有關(guān),。其次是酶的質(zhì)和量，往往一些來源的酶易出現(xiàn)非特異條帶而另一來源的酶 則不出現(xiàn),，酶量過多有時也會出現(xiàn)非特異性擴增,。其對策有：必要時重新設(shè)計引 物。減低酶量或調(diào)換另一來源的酶,。降低引物量,，適當增加模板量，減少循環(huán)次 數(shù),。適當提高退火溫度或采用二溫度點法(93變性,，65左右退火與延伸)。
 故障三： 出現(xiàn)片狀拖帶或涂抹帶
　　PCR擴增有時出現(xiàn)涂抹帶或片狀帶或地毯樣帶,。其原因往往由于酶量過多或酶的質(zhì)量 差,，dNTP濃度過高，Mg2+濃度過高,，退火溫度過低,，循環(huán)次數(shù)過多引起。其對策有：減少酶量,，或調(diào)換另一來源的酶,。減少dNTP的濃度,。適當降低Mg2+濃 度。增加模板量,，減少循環(huán)次數(shù),。
 故障四：母鏈結(jié)合
當PCR反應(yīng)加熱至90-95左右時，會使模板DNA產(chǎn)生變形,，解開為單鏈,，當退火冷卻至55-60左右時，因為引物分子量較小,，運動速度較快,，和母鏈碰撞的機會很多，所以退火時引物優(yōu)先會與母鏈相互結(jié)合,。引物如果太大,，會導致退火時無法激發(fā)模板，即引物無法優(yōu)先與模板鏈相互結(jié)合,，而是與較多的互補模板鏈相互結(jié)合,。所以引物不能太大，一般不可以超過30個脫氧核苷酸的長度,。
 故障五：緩沖液
PCR緩沖液不僅對 pH 的變化 有緩 沖作用 ,，而 且有利 于模板 退火 和引物 的 K離子 ，以及含有能夠激活 DNA 聚合酶的 MgZ+離子 ,，還有 DNA聚合酶 的穩(wěn)定劑 等,。所以緩 沖液 中通 常會 含 有MgClz、Tris·HC1(pH 8．4,，室溫 ),、KCI、明 膠 等,。Mg 離子對 Taq酶的活性以及專一性都具有一定 的影 響,，Mg2+離子濃度過高 時，Taq酶專一性降低 而活性會加強 ,，所 以當 Mg2+離子 的濃度過高 ,，會導致非 特異性擴增產(chǎn)物積累，而當 Mg 離子 的濃度過 低 ,，會 導至擴增 量降低 ,。MgCIz** 濃度一 般為1．5mmol／mL左右 。