10186ES70 全血直接PCR試劑盒
- 公司名稱 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號 10186ES70
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2022/2/9 15:18:46
- 訪問次數(shù) 904
聯(lián)系方式：曹女士400-6111-883 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,，謝謝!
企業(yè)簡介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化技術(shù)為驅(qū)動,，聚焦生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料,，從事分子、蛋白和細(xì)胞三大品類生物試劑的研發(fā),、生產(chǎn)與銷售的高新技術(shù)企業(yè),，通過打通分子酶、蛋白,、抗體,、核酸,、細(xì)胞的技術(shù)開發(fā)路徑，成為國內(nèi)少數(shù)同時覆蓋三大品類生物試劑,、兼?zhèn)浜诵募夹g(shù)自主研發(fā)能力和規(guī)?；a(chǎn)能力的高新技術(shù)企業(yè)，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域,、診斷與檢測領(lǐng)域和生物醫(yī)藥領(lǐng)域,。
主營業(yè)務(wù)
公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗(yàn)，構(gòu)建了品質(zhì)優(yōu)良,、類型齊全,、種類豐富的產(chǎn)品管線。自公司成立以來,，公司研發(fā),、生產(chǎn)和銷售的生物試劑超過3000種，涵蓋分子,、蛋白,、細(xì)胞三大品類的生物試劑，能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購需求,。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列,、NGS系列、逆轉(zhuǎn)錄系列,、核酸提取與純化系列,、PCR系列、分子克隆系列,、體外轉(zhuǎn)錄系列,、抗體、蛋白純化系列,、蛋白分析系列,、重組蛋白、細(xì)胞分析系列,、細(xì)胞培養(yǎng)系列,、細(xì)胞轉(zhuǎn)染系列、報告基因檢測系列等多個品類的生物試劑,，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究,、診斷檢測和生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。
發(fā)展歷程
榮譽(yù)資質(zhì)
翌圣生物通過申請商標(biāo)和軟件著作權(quán)的方式保障核心技術(shù)和市場競爭力,，不斷加強(qiáng)公司品牌建設(shè),。截至2022年3月31日，公司已經(jīng)獲得授權(quán)18項(xiàng)（其中發(fā)明14項(xiàng),、實(shí)用新型1項(xiàng),、外觀設(shè)計3項(xiàng)）和45項(xiàng)與生物試劑相關(guān)的軟件著作權(quán),，擁有經(jīng)國家知識產(chǎn)權(quán)局商標(biāo)局核準(zhǔn)的注冊商標(biāo)權(quán)37項(xiàng)以及4項(xiàng)境外注冊商標(biāo)，是國家高新技術(shù)企業(yè)和上海市專精特新企業(yè),。
創(chuàng)新平臺
經(jīng)過多年的產(chǎn)品研發(fā)技術(shù)經(jīng)驗(yàn)的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新,，翌圣生物積極開展“產(chǎn)學(xué)研”合作，與擁有生物催化與酶領(lǐng)域國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的湖北大學(xué),、擁有教育部工業(yè)生物領(lǐng)域重點(diǎn)研究基地的江南大學(xué)展開合作,，優(yōu)化生物試劑關(guān)鍵原料的生產(chǎn)和表達(dá)工藝。翌圣生物以基因工程技術(shù),、生物信息技術(shù),、細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù),、生化分析技術(shù)等生命科學(xué)領(lǐng)域的共性生物技術(shù)為基礎(chǔ),，建立了六大核心技術(shù)平臺——雙向分子酶理性設(shè)計與定向進(jìn)化平臺、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺,、分子診斷試劑關(guān)鍵原料研發(fā)平臺,、高通量測序建庫試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺和mRNA醫(yī)藥應(yīng)用研發(fā)平臺,，目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項(xiàng)核心技術(shù),，打通分子酶、蛋白,、抗體,、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開發(fā)路徑,，覆蓋技術(shù)研發(fā),、產(chǎn)品升級、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關(guān)鍵環(huán)節(jié),。
工業(yè)化生產(chǎn)
翌圣生物擁有按照準(zhǔn)GMP 標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)運(yùn)營的工業(yè)化生產(chǎn)基地,，配有噸級發(fā)酵線、工業(yè)級 AKTA 純化線和全自動包裝線,。同時,，公司通過了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認(rèn)證，從原料控制,、生產(chǎn)管理,、質(zhì)檢管控、倉儲運(yùn)輸?shù)葘ιa(chǎn)線進(jìn)行360度管理監(jiān)督,，保證產(chǎn)品過程的可控制性及可追溯性,，竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品,。
客戶服務(wù)
翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量,、高效及時的響應(yīng)能力,、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務(wù)獲得了眾多科研用戶和工業(yè)用戶的認(rèn)可，為檢測公司,、治療公司,、工具類公司和科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)室提供應(yīng)用于科學(xué)研究、體外診斷,、基因測序,、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國科學(xué)院,、清華大學(xué),、北京大學(xué)、復(fù)旦大學(xué),、上海交通大學(xué),、浙江大學(xué)等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥,、藥明康德,、之江生物、圣湘生物,、斯微生物,、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶建立了穩(wěn)定,、緊密的合作關(guān)系,，公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science,、Cell等國際頂級期刊論文發(fā)表中,。
公司企業(yè)文化
幫助客戶創(chuàng)造價值，讓世界更健康更快樂
◎ 成為生命科學(xué)工具領(lǐng)域全球Top⑩
◎ 具備驅(qū)動產(chǎn)業(yè)變革的技術(shù)創(chuàng)新能力
◎ 擁有一支持續(xù)學(xué)習(xí)型的翌圣鐵軍
翌圣生物始終秉承“幫助客戶創(chuàng)造價值,，讓世界更健康更快樂”的使命,，專注于技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品升級，不斷拓展核心技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域,，為客戶提供更為的產(chǎn)品與服務(wù),，助力我國打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時,，翌圣生物將進(jìn)一步推進(jìn)國際化戰(zhàn)略,，繼續(xù)布局和拓展海外市場，為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻(xiàn)力量,。
分子生物學(xué)試劑,，細(xì)胞生物學(xué)試劑，免疫學(xué)試劑,，蛋白組學(xué)試劑等
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
|---|
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Animal Blood Direct PCR Kit (With Dye) 全血直接PCR試劑盒 | 10186ES50 | 50 T | 323.00 |
Animal Blood Direct PCR Kit (With Dye) 全血直接PCR試劑盒 | 10186ES70 | 200 T | 983.00 |
產(chǎn)品描述
全血直接PCR試劑盒是一款可以直接對全血樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增的試劑盒,，無需DNA提取或樣品處理,，大大降低了污染風(fēng)險，縮短了檢測時間,。
試劑盒中包含配方優(yōu)化的2× Blood Master Mix,，具有很強(qiáng)抑制物耐受性，人血的模板大加入量可達(dá)45%,，鼠血的可達(dá)20%,，可以靈敏的擴(kuò)增血液樣本中基因組和外源目的DNA篇段。2× Blood Master Mix包含了用于PCR擴(kuò)增除模板和引物外的所有組分,，擴(kuò)增產(chǎn)物末端加A,，適用于Hieff Clone®快速克隆試劑盒（貨號：10907ES60/10908ES60）。
該試劑盒可用于直接擴(kuò)增的血樣類型包括：新鮮血液,、4℃貯存血液,、冷凍血液以及儲存在Whatman 903®和FTA®商用卡上的干xue漬，且兼容所有常規(guī)抗凝劑（EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素等）。適用樣本來源包括人血,、鼠血,、雞血、鳥血,、牛血,、狗血等。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | |
10186ES50（50T） | 10186ES70（200T） | ||
10186-A | 2× Blood Master Mixa | 500 µL | 1 mL× 2 |
a）2× Blood Master Mix：包含Taq DNA聚合酶,、dNTP混合物,、MgCl2、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑,、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等,，產(chǎn)品已混合溴酚藍(lán)染料（不含SDS），PCR產(chǎn)物可以直接進(jìn)行電泳,。
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸,。-20℃保存。避免反復(fù)凍融,。
操作方法
1. PCR反應(yīng)體系配制
組分 | 體積（μL） | 體積（μL） | 終濃度 |
2× Blood Master Mix | 10 | 25 | 1× |
Forward Primer (10 μM) | 0.5 | 1 | 0.2 μM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.5 | 1 | 0.2 μM |
抗凝全血 | X | X | - |
ddH2O | To 20 | To 50 | - |
【注】：使用前務(wù)必充分混勻,，避免劇烈震蕩產(chǎn)生過多氣泡。
a）模板使用量：進(jìn)行基因組上的目的片段檢測,，建議使用少量的血液量作為模板,；檢測血液樣本中某種病毒或細(xì)菌等的目的片段，建議擴(kuò)大PCR體系并使用較大量的血液模板。血液模板多占PCR體系的45%（人血）,、20%（鼠血）,。若模板使用含有血液的采集卡，可截取直徑1-4 mm的血點(diǎn),，直接加入20-50 μL PCR反應(yīng)體系進(jìn)行擴(kuò)增,。
b）引物濃度：通常引物終濃度為0.2 μM,，也可以根據(jù)情況在0.1-0.5 μM之間進(jìn)行調(diào)整,。
c）反應(yīng)體系：推薦使用20 μL或 50 μL，以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性,。
d）體系配制：配制好PCR反應(yīng)體系,，置于渦旋儀上渦旋混勻，瞬時離心將反應(yīng)液集于管底,。
2. PCR反應(yīng)條件設(shè)置
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
變性 | 95℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50℃～65℃ | 20 sec | |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
【注】： a）預(yù)變性：95℃,，5 min可以讓白細(xì)胞裂解，釋放可用于PCR擴(kuò)增的基因組DNA,。請勿縮短時間或降低溫度,。
b）退火溫度：退火溫度設(shè)置為引物Tm值即可。然而,，使用高的退火溫度可以有效減少非特異性擴(kuò)增,，并提高全血模板的擴(kuò)增效率。因此,，如擴(kuò)增產(chǎn)物特異性較差,，可以建立一個溫度梯度反應(yīng)去尋找引物模板適退火溫度。
c）延伸時間：按30 sec/kb設(shè)定,，如不足30 sec,，設(shè)置30 sec即可。
d）擴(kuò)增循環(huán)數(shù)：35個循環(huán)已可以擴(kuò)增足量產(chǎn)物,。太多的循環(huán)將會導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增增加,。
3. 擴(kuò)增產(chǎn)物分析
PCR完成后，建議將反應(yīng)液于1000× g (大約4000 rpm) 離心1～3 min以沉淀血細(xì)胞碎片,，之后取上清進(jìn)行下游分析,。該步驟可有效去除多種血液組分。當(dāng)使用高濃度血液模板時此步尤為重要,，因?yàn)榻?jīng)過PCR循環(huán),，反應(yīng)管中會存在大量的血細(xì)胞碎片。這些碎片會干擾下游的檢測,，如瓊脂糖電泳檢測,。注意：由于血液本身的原因，PCR 結(jié)束后在 PCR 管的底部會出現(xiàn)透明凝膠狀物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象,。
4. 對照反應(yīng)
在PCR結(jié)果分析時，不管是陽性結(jié)果或陰性結(jié)果,，如果沒有對照反應(yīng),，都不能確定結(jié)果是否可靠。為了便于后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析,，建議在進(jìn)行PCR時,，設(shè)置陽性和陰性PCR對照反應(yīng)以便于排除假陽性或假陰性的干擾。
4.1 陽性對照反應(yīng)體系
組分 | 體積（μL） | 體積（μL） | 終濃度 |
2× Blood Master Mix | 10 | 25 | 1× |
Forward Primer (10 μM) | 0.5 | 1 | 0.2 μM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.5 | 1 | 0.2 μM |
模板DNA | X | X | 100-200 ng |
ddH2O | To 20 | To 50 | - |
【注】：a）模板DNA：選用樣本純化的DNA,。
b）引物的選擇：建議選擇該樣本較易擴(kuò)增的基因的引物,，如 β-actin 基因或 GAPDH 等。
4.2 陰性對照
PCR反應(yīng)體系被污染會導(dǎo)致PCR結(jié)果出現(xiàn)假陽性,，需要設(shè)置陰性對照來排除,。將使用的移液器槍頭浸泡在2× Blood Master Mix中，添加引物,，ddH2O進(jìn)行PCR擴(kuò)增,；另取ddH2O作為模板，用目的基因引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,，以排除PCR體系是否被污染和實(shí)驗(yàn)是否有其他污染源,。
注意事項(xiàng)
1. 盡量使用新鮮抗凝血。若凍存血,，應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 解凍后2× Blood Master Mix可能出現(xiàn)渾濁，冰上放置1-2 min,，待溶液澄清后,，上下顛倒混勻，不影響試劑性能,。
3. 建議擴(kuò)增片段長度1 kb以內(nèi),，以便擴(kuò)增效率*。
4. 為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。
常見問題與解決方法
常見問題 | 可能原因 | 解決方法 |
陽性對照、待測樣本均無條帶,。 | PCR反應(yīng)體系或反應(yīng)條件不合適,。 | 使用梯度PCR摸索PCR *反應(yīng)條件。 |
PCR試劑保存不當(dāng)失去活性,。 | 2× PCR Mix應(yīng)保存于-20℃,，使用時避免反復(fù)凍融,。若使用頻繁，可在4℃短時間存放,。 | |
引物設(shè)計問題,。 | 嘗試重新設(shè)計引物進(jìn)行檢查。 | |
陽性對照有目的條帶,，待測樣本無條帶或條帶弱,。 | 血液樣本保存不當(dāng)，基因組DNA降解,。 | 抗凝全血可在4℃保存2-8天,，需長時間保存可將樣本置于在-20℃或-70℃凍存，并避免反復(fù)凍融,。 |
模板加入量不適合,。 | 可在PCR體系10%-30%范圍內(nèi)優(yōu)化血液加入量,；若是擴(kuò)增血液樣本中的病毒或細(xì)菌DNA篇段,，可將模板量增加至30%-40%。 | |
PCR循環(huán)數(shù)不足,。 | 適當(dāng)增加PCR的循環(huán)數(shù),，推薦在35-40循環(huán)為佳。因?yàn)槟０鍙?fù)雜,，一般PCR反應(yīng)要比用純化的 DNA模板多5-10個循環(huán)為佳,。 | |
非特異性擴(kuò)增 | PCR退火溫度太低，循環(huán)數(shù),、引物濃度或模板濃度太高,。 | 增加PCR退火溫度，降低PCR循環(huán)數(shù),、引物濃度或模板濃度,。 |
PCR引物錯配。 | 重新設(shè)計PCR引物,。 | |
配制PCR反應(yīng)體系時溫度太高或配制完成后放置時間太久,。 | PCR反應(yīng)體系的配制在低溫下進(jìn)行，配制完成后盡快進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng),。 | |
陰性對照出現(xiàn)目的條帶 | 操作工具或試劑污染,。 | 實(shí)驗(yàn)所有試劑或器材均應(yīng)高壓滅菌。操作時應(yīng)小心輕柔,，防止將靶序列吸入加樣槍內(nèi)或?yàn)R出離心管外,。 |
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Animal Tissue Direct PCR Kit 動物組織直接PCR試劑盒 | 10180ES50/70 | 50/200 T | 383/1353 |
Mouse Tissue Direct PCR Kit 小鼠組織直接PCR試劑盒HOT | 10181ES50/70 | 50/200 T | 293/883 |
Animal Blood Direct PCR Kit 全血直接PCR試劑盒 | 10182ES50/70 | 50/200 T | 293/883 |
Plant Tissue PCR Kit 植物組織直接PCR試劑盒HOT | 10183ES50/70 | 50/200 T | 353/1213 |
Animal Tissue Direct PCR Kit (With Dye) 動物組織直接PCR試劑盒 | 10184ES50/70 | 50/200 T | 433/1453 |
Mouse Tissue Direct PCR Kit (With Dye) 小鼠組織直接PCR試劑盒 | 10185ES50/70 | 50/200 T | 323/983 |
Plant Tissue PCR Kit (With Dye) 植物組織直接PCR試劑盒 | 10187ES50/70 | 50/200 T | 393/1353 |
HB190220
相關(guān)分類
該廠商的其他產(chǎn)品
- 13344ES 2× Ultima HF Amplification Mix for MGI®
- 10618ES90 T7 RNA聚合酶(50 U/μL）
- 10184ES70 動物組織直接PCR試劑盒
- 10323ES80 Endonuclease IV
- 10200ES60 50× ROX Reference Dye
- 10114ES60 抗體法熱啟動C-Taq DNA聚合酶
- 13113ES60 Hifair V NCP Multiplex One Step RTqPCR Probe Kit
- 13114ES60 Hifair V NCP Multiplex One Step RTqPCR ProbeKit
采購中心
化工儀器網(wǎng)