LifeAct-TagGFP2蛋白

LifeAct-TagGFP2蛋白

應(yīng)用領(lǐng)域

• 細(xì)胞骨架組織
  • 無毒肌動(dòng)蛋白可視化
  • 熒光染色
• 細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)
  • 細(xì)胞過程中的肌動(dòng)蛋白動(dòng)力學(xué)
  • 活細(xì)胞成像和顯微鏡

技術(shù)指標(biāo)

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請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)肌動(dòng)蛋白可視化的更多詳細(xì)信息。

在此處下載完整的“ Actin可視化”應(yīng)用指南,，以PDF格式,。

技術(shù)特點(diǎn)

• 重組蛋白,，凍干
• C端His標(biāo)簽
• 建立活細(xì)胞和固定細(xì)胞中F-肌動(dòng)蛋白染色的規(guī)程
• 出色的信噪比
• 具有出色生物相容性的活體樣品的無毒F-肌動(dòng)蛋白染色

LifeAct是一種17個(gè)氨基酸的肽，來源于釀酒酵母蛋白,。LifeAct可以染色活的或固定的真核細(xì)胞中的絲狀肌動(dòng)蛋白（F-actin）結(jié)構(gòu),。

請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)LifeAct的詳細(xì)信息。

使用LifeAct-TagGFP2蛋白在活細(xì)胞中可視化F-肌動(dòng)蛋白

LifeAct-TagGFP2蛋白非常適合快速有效地可視化活細(xì)胞中的細(xì)胞骨架,。對(duì)于染色過程,，您可以使用任何適用于您感興趣的細(xì)胞的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移方法。

注意：請(qǐng)記住,，與mRNA或DNA轉(zhuǎn)染相比,，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的實(shí)際含量通常較低。為了充分可視化細(xì)胞內(nèi)F-肌動(dòng)蛋白,，您應(yīng)該使用高質(zhì)量的顯微鏡設(shè)備,。

LifeAct-TagGFP2蛋白轉(zhuǎn)移后，Rat1成纖維細(xì)胞中F-肌動(dòng)蛋白的活細(xì)胞成像（30 µg / ml,，3分鐘）,。

肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的超分辨顯微鏡（STED）

使用LifeAct-TagGFP2蛋白，可以詳細(xì)顯示肌動(dòng)蛋白的細(xì)胞骨架,。在該實(shí)驗(yàn)中,，將固定的Rat1成纖維細(xì)胞與LifeAct-TagGFP2蛋白在µ-Slide VI 0.4 ibiTreat中孵育。進(jìn)行了模擬發(fā)射損耗（STED）顯微鏡檢查,，以創(chuàng)建超分辨率圖像,。

使用LifeAct-TagGFP2蛋白對(duì)Rat1成纖維細(xì)胞中肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的超分辨率顯微鏡檢查。顯微鏡是在STEDYCON超分辨率STED納米顯微鏡系統(tǒng)（德國(guó)哥廷根Abberior Instruments GmbH）上使用Plan-Neofluar 100x / 1.4物鏡進(jìn)行的,。

使用LifeAct-TagGFP2蛋白在固定細(xì)胞中觀察F-肌動(dòng)蛋白

除了在活細(xì)胞中工作外,，LifeAct-TagGFP2蛋白還是一種快速簡(jiǎn)便的解決方案，可在多種固定細(xì)胞中進(jìn)行高效F-肌動(dòng)蛋白染色,。

注意：在固定過程中,，甲醇和丙酮會(huì)破壞肌動(dòng)蛋白。因此,，建議避免與LifeAct-TagGFP2蛋白結(jié)合使用任何含甲醇或丙酮的固定劑,。

CHO-K1

HT1080

MCF7

大鼠1

用Triton X-100滲透福爾馬林固定的細(xì)胞，并在LifeAct-TagGFP2蛋白溶液（PBS中10 µg / ml）中孵育1小時(shí),。

方法比較：使用LifeAct在活細(xì)胞中可視化F-Actin

1并非所有這些組合都已在所有指示的細(xì)胞類型中進(jìn)行了測(cè)試,。我們鼓勵(lì)您使用此表作為指導(dǎo)，以了解如何地使用LifeAct系統(tǒng),。

注：楊清辰發(fā)布