TissueLyser II自動化樣品破碎

用于中到高通量樣本破碎,，適用于分子分析

• 破碎過程便利、安全
• 適配器專為高通量破碎而優(yōu)化
• 提供多種配件
• 確保難裂解組織獲得高重復性結(jié)果
• QIAGEN樣本處理體系的重要組成部分

通過不銹鋼珠,、碳化鎢珠或玻璃珠在塑料樣品管中的高速震動,，TissueLyser II可同步破碎多個生物樣本。借助適當?shù)倪m配器,，可同時處理48或192個樣本,。也可使用研磨罐處理大體積樣本。同時提供各種研磨珠,、研磨珠分配器,、收集管及管蓋,。TissueLyser II包括適配器在內(nèi)的所有配件與TissueLyser（已停產(chǎn)）兼容。

可靠檢測miRNA,。

將大鼠腎臟置于RNAlater RNA Stabilization Reagent中穩(wěn)定，使用TissueLyser II,，在QIAzol Lysis Reagent中25 Hz破碎25 mg樣本2 x 5分鐘,。使用miRNeasy Mini Kit，采用手動步驟 (Manual) 或在QIAcube全自動核酸純化儀 (QIAcube) 上進行自動化處理,，純化包含miRNA的總RNA,。使用miScript System進行Real-time RT-PCR，檢測2種不同的miRNA——miR-16和miR-25,。

高效破碎動物組織。

冷凍 (Frozen) 組織 (20 mg) 或?qū)⑵渲糜赗NAlater RNA Stabilization Reagent (RNAlater) 中穩(wěn)定,，然后使用TissueLyser II破碎 (肝臟和肌肉破碎2 x 2分鐘,；皮膚破碎2 x 5分鐘)。使用RNeasy Mini Kit (肝臟),、RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit (皮膚) 或RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (肌肉) 純化RNA,。[A] 采用1.2 %的甲醛瓊脂糖凝膠分析顯示了清晰的核糖體RNA條帶，表示具有完整的RNA,。[B] 利用A₂₆₀ nm吸光度測量,，定量RNA產(chǎn)量。

從植物組織中純化RNA具有可重復性,。

使用TissueLyser II破碎冷凍的植物葉子 (2 x 1分鐘)。使用RNeasy Plant Mini Kit純化RNA,，并在1.2 %的甲醛瓊脂糖凝膠上進行分析,。核糖體RNA條帶清晰均勻，表示可重復純化出完整的RNA,。T：番茄 (100 mg),；A：擬南芥 (25 mg)；C：棉花 (100 mg),；M：玉米 (100 mg)；R：油菜 (100 mg),。

從動物組織中純化DNA,，具有可重復性,。

將一只大鼠的心臟切成96 x 25 mg的小塊,，然后使用TissueLyser II破碎 (2 x 15秒)。在QIAcube全自動核酸純化儀上使用DNeasy Blood & Tissue Kit (采用Reagent DXzui大程度減少裂解起泡現(xiàn)象) 進行自動DNA純化,。48個樣本的瓊脂糖凝膠分析顯示了各樣本中的DNA量*,。M：分子量標準。

從動物組織中純化完整的蛋白,。

將組織樣本(50 mg) 置于Mammalian Cell Lysis Buffer中預冷至4°C，使用TissueLyser II 20 Hz破碎3 x 90秒,。使用針對∝-tubulin,、β-actin和GAPDH的抗體對裂解物 (15 μg) 進行western印跡分析。同時分析純化的蛋白質(zhì) (1 μg,、100 ng和10 ng),，作為陽性對照。Lu：肺,；He：心臟,；Sp：脾；Li,；肝,；Ki：腎；Br：腦,；Th：胸腺,。

從革蘭氏陽性菌中純化RNA,，具有可重復性。

使用RNAprotect Bacteria Reagent穩(wěn)定B. subtilis培養(yǎng)物,。使用TissueLyser II,，在裂解緩沖液中30 Hz破碎單個樣本 (各2.5 x 10⁸個細胞) 5分鐘。使用RNeasy Protect Bacteria Mini Kit純化總RNA,，并在甲醛瓊脂糖凝膠上進行分析,。

TissueLyser II.

Performance

TissueLyser II尤其適合高通量的樣本破碎，適用于人類,、動物和植物組織,、細菌和酵母?？杉兓@得高品質(zhì)的DNA,、RNA、miRNA和蛋白質(zhì)，甚至對于難裂解的組織也具有高度的可重復性（參見"Efficient disruption of animal tissues",、"Reproducible RNA purification from plant tissues",、"Reproducible DNA purification from animal tissue"、"Purification of intact protein from animal tissue",、"Reproducible RNA purification from Gram-positive bacteria"和"Reliable detection of miRNAs"）,。

Principle

基因分型、基因表達分析和蛋白質(zhì)組學研究均要求對生物樣本進行高效破碎,，以確保獲得高產(chǎn)的DNA,、RNA和蛋白質(zhì)。TissueLyser II體系通過研磨珠的高速震蕩來實現(xiàn)對樣本的有效破碎,。TissueLyser II可快速,、*的破碎樣本，*釋放生物分子,，并可同時對樣本進行勻,，協(xié)助后續(xù)使用的QIAGEN試劑盒進行純化（參見"QIAGEN purification kits compatible with QIAGEN disruption systems"）。

QIAGEN提供從樣本收集到DNA,、RNA和蛋白質(zhì)純化的完整解決方案,，TissueLyser II是其中關鍵的組成部分。TissueLyser II可作為QIAsymphony SP等QIAGEN自動化儀器高通量制備和分析樣本的補充（參見"QIAGEN high-throughput automation"）,。這一即用型儀器可從1–96個樣本中自動純化DNA,、RNA和蛋白質(zhì)。TissueLyser II也適用于QIAGEN手動樣本制備試劑盒（參見"QIAGEN purification kits compatible with QIAGEN disruption systems"）,。

進行RNA研究時,，新鮮收集的組織可在RNAlater RNA Stabilization Reagent中穩(wěn)定，可有效避免操作過程中RNA的降解,。對于需要純化DNA,、 RNA和蛋白質(zhì)的應用，可使用Allprotect Tissue Reagent,，將新鮮收集的組織中的待分析物迅速穩(wěn)定,。

QIAGEN高通量自動化儀器 >

Procedure

TissueLyser Adapter Sets使用微型收集管,，可處理多達2 x 96個樣本，或使用2 ml微型離心管,，處理多達2 x 24個樣本,。如果在樣本破碎過程中不使用裂解緩沖液，則需要將適配器置于–80°C環(huán)境中預冷,。在破碎時樣品管需保持密封,，以避免交叉污染,，這對于real-time RT-PCR或芯片分析等高敏感性的下游應用尤其重要,。根據(jù)樣本類型不同,，破碎使用不銹鋼珠、碳化鎢珠或玻璃珠進行,。TissueLyser Bead Dispensers用來方便的將單個珠子加入到離心管中,，或同時將96個研磨珠加入到收集管中。TissueLyser II也可配合Grinding Jar Sets使用,，破碎大體積樣本,。

Applications

TissueLyser II自動化樣品破碎每批可處理多達192個樣本，因此是遺傳學,、轉(zhuǎn)錄組學和蛋白質(zhì)組學研究中獲得生物信息的理想解決方案,。TissueLyser II是新一代高通量測序的shou選破碎儀器。TissueLyser II可與多種QIAGEN樣本純化試劑盒配套使用,，樣本純化可以手動進行,，也可以在QIAcube全自動核酸純化儀、QIAsymphony SP核酸提取純化分析儀,、EZ1 Advanced,、BioRobot或BioSprint工作站上自動進行。