大容量生化培養(yǎng)箱SPX-1500安裝視頻

技術(shù)參數(shù)：

生化培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用于細(xì)菌,、霉菌、微生物,、組織細(xì)胞的培養(yǎng)保存以及水質(zhì)分析與BOD測試,，適合育種試驗(yàn)、植物栽培,。是生物,、遺傳工程、醫(yī)學(xué),、衛(wèi)生防疫,、環(huán)境保護(hù)、農(nóng)林畜牧等行業(yè)的科研機(jī)構(gòu),、大專院校,、生產(chǎn)單位或部門實(shí)驗(yàn)室的重要試驗(yàn)設(shè)備。

大容量生化培養(yǎng)箱SPX-1500安裝視頻

主要特征：

1生化培養(yǎng)箱采用鏡面不銹鋼內(nèi)膽,，四角半圓弧易清潔,，箱內(nèi)擱板間可調(diào)。

2電腦智能控溫儀,，具有設(shè)定,、測定溫度雙數(shù)字顯示和PID自整功能，控溫精準(zhǔn),、可靠,。

3生化培養(yǎng)箱采用雙重六結(jié)構(gòu),，隔熱性能好。采用全鋼化玻璃門,，便于觀察箱內(nèi)情況,。

4模塊式制冷裝置，配置延時(shí)啟動(dòng),，高,、低壓力多重保護(hù)。

5生化培養(yǎng)箱采用*的不銹鋼循環(huán)風(fēng)道,，強(qiáng)迫空氣循環(huán),，溫度均勻。

6設(shè)有大視角觀察窗,、照明燈,。

生化培養(yǎng)箱在多管發(fā)酵法的應(yīng)用

1 .多管發(fā)酵法

　　初發(fā)酵實(shí)驗(yàn) 發(fā)酵管內(nèi)裝有單倍或三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液，并在內(nèi)倒置有小玻璃管,。每個(gè)樣品用三個(gè)不同的水樣量接種,，同一接種水樣量要有五管，將水樣分別接種到裝有乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的發(fā)酵管中,，在37℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h,。乳糖能起選擇作用，因?yàn)楹芏嗉?xì)菌不能發(fā)酵乳糖,，而大腸菌群能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣,。培養(yǎng)液中加入溴甲酚紫作為酸度指示劑，細(xì)菌產(chǎn)酸后,，培養(yǎng)液即由原來的紫色變成黃色,。產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管表明試驗(yàn)陽性，如在倒管內(nèi)產(chǎn)氣不明顯,，可輕拍發(fā)酵管,，有小氣泡升起為陽性。

　　復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn) 輕微振蕩初發(fā)酵試驗(yàn)陽性結(jié)果的發(fā)酵管,，用3mm接種環(huán)將培養(yǎng)物(2-3環(huán))轉(zhuǎn)接到EC培養(yǎng)液中,，在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h(提高培養(yǎng)溫度可造成不利于來自自然環(huán)境的大腸菌群的生長)。培養(yǎng)后立即觀察,，發(fā)酵管產(chǎn)氣則證實(shí)為糞大腸菌群陽性,。

　　2.濾膜法

　　濾膜是一種微孔性濾膜，孔徑0.45μm,。將水樣注入已滅菌的放有濾膜的過濾器中,，經(jīng)過抽濾，細(xì)菌即被截留在膜上,，然后將濾膜貼于M-FC培養(yǎng)基上,，在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24 h±2h,。糞大腸菌群菌落在M-FC培養(yǎng)基上呈藍(lán)色或藍(lán)綠色，其他非糞大腸菌群菌落成灰色,、淡黃色或無色,。正常情況下，由于溫度和玫瑰酸鹽試劑的選擇性作用,，在M-FC培養(yǎng)基上很少見到非糞大腸菌菌落,。

　　二.兩種方法的注意事項(xiàng)

　　1.培養(yǎng)溫度的要求 總大腸菌群中的細(xì)菌除生活在腸道中外，在自然環(huán)境中的水與土壤中也經(jīng)常存在,，但此等在自然環(huán)境中生活的大腸菌群培養(yǎng)的合適溫度為25℃左右,，如在37℃培養(yǎng)則仍可生長，但如將培養(yǎng)溫度再升高至44.5℃,，則不再生長，而直接來自糞便的大腸菌群細(xì)菌,，習(xí)慣于37℃左右生長,，如將培養(yǎng)溫度升高至44.5℃仍可繼續(xù)生長。因此,，可用提高培養(yǎng)溫度的方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)分,，兩種方法也都基于此理。將接種好的樣品或裝有濾膜的培養(yǎng)基放入 培養(yǎng)皿要沉到水浴箱底部,。

　　2.加氯水樣的處理 經(jīng)氯處理消毒過的水樣,，水中含有一定量的余氯，使大腸菌群處于受損或受抑制狀態(tài),，在采集水樣時(shí)應(yīng)提前在采樣瓶中加硫代硫酸鈉,，硫代硫酸鈉可以脫氯，使受損的細(xì)菌得以復(fù)蘇與修復(fù),，從而避免出現(xiàn)計(jì)數(shù)結(jié)果偏低甚至假陰性的現(xiàn)象,。此外余氯對濾膜法培養(yǎng)的細(xì)菌其抑制作用尤為明顯，所以抽濾時(shí)應(yīng)對水樣進(jìn)行大量無菌水稀釋,，以減少余氯的殘留,。

　　3.樣品的保存 采樣用的容器使用前應(yīng)蓋好瓶蓋，用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好,，置干燥箱160℃-170℃干熱滅菌2h,，或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min。采樣后水樣的正確保存也很重要,，如保存不當(dāng)可使樣品中的大腸菌群細(xì)菌死亡或在一定條件下再生長,，這些都將影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。檢測室接到水樣后,，應(yīng)立即檢測,，如因故不能檢測時(shí),，應(yīng)立即將樣品置于冰箱內(nèi)(2℃-10℃)并于2小時(shí)內(nèi)檢測。

　　4.培養(yǎng)物質(zhì)的制備與保存

　?、?多管發(fā)酵法所使用的培養(yǎng)液在分裝于各發(fā)酵管中后,，應(yīng)將發(fā)酵管盡快放于高壓蒸汽滅菌器中，在115℃滅菌20min(注意：這個(gè)溫度也應(yīng)控制好,，既達(dá)到滅菌的作用,，還要防止培養(yǎng)物質(zhì)分解流失)，然后貯存于冰箱或暗處備用,。

　?、?濾膜法所采用的M-FC培養(yǎng)基多使用外購的成品，培養(yǎng)基中苯胺藍(lán)的純度和質(zhì)量往往影響菌落的顏色,，因此,，無菌包裝的成套培養(yǎng)基在使用前，先接種典型糞大腸菌,，以觀察對比菌落的顏色,，來鑒定其穩(wěn)定性。

　　5.結(jié)果統(tǒng)計(jì)

　?、?多管發(fā)酵法的結(jié)果是根據(jù)不同接種量的發(fā)酵管所出現(xiàn)陽性結(jié)果的數(shù)目,，從MPN表中查得相應(yīng)的MPN指數(shù)，來計(jì)算每升水中糞大腸菌群細(xì)菌的MPN值,。MPN是“Most Probable Number”的縮寫,，指zui大可能數(shù)，它是根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)理論,，估計(jì)水體中的菌群密度和衛(wèi)生質(zhì)量的一種方法,，所以準(zhǔn)確判斷不同接種量發(fā)酵管的陽性數(shù)是非常重要的，否則將導(dǎo)致較大偏差,。

　?、?濾膜法的結(jié)果是計(jì)數(shù)濾膜上呈藍(lán)或藍(lán)綠色的菌落，來計(jì)算出每升水樣中的糞大腸菌群數(shù),。所以為便于計(jì)數(shù),，減少誤差，理想的水樣體積是一片濾膜上生長20-60個(gè)糞大腸菌群菌落,。

　　三.在實(shí)際中的應(yīng)用探討

　　1.檢測方法對樣品的適用性

?、?多管發(fā)酵法由于只需要根據(jù)水樣的取樣量來決定將樣品培養(yǎng)于何種培養(yǎng)液中(單倍或是三倍乳糖)進(jìn)行培養(yǎng)，因此理論上可適用于各種水樣,，但由于受發(fā)酵管容積的限制,，其更適合檢測水源水、地表水和污染源廢水(取樣量不大)，而且如果接種的水樣量不是MPN表中的三種接種量時(shí),，還需用公式進(jìn)行換算,。

　　⑵.濾膜法主要是采用抽濾裝置將細(xì)菌截留在濾膜上,，然后將濾膜貼附在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),，因此可用于檢測體積較大的水樣，但受濾膜孔徑的限制,，在檢測混濁度高(污染源廢水),、非大腸桿菌類細(xì)菌密度大(河湖水)的水樣時(shí)，對菌落計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)有一定影響,，此外,，如水樣中有毒性物質(zhì)較高，也會(huì)在濾膜上形成累積,，抑制細(xì)菌培養(yǎng),。

　　2.檢測時(shí)間及操作過程的繁瑣度

　　⑴.多管發(fā)酵法需要經(jīng)過初發(fā)酵試驗(yàn)和復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)兩個(gè)過程后才能根據(jù)不同接種量的發(fā)酵管所出現(xiàn)陽性結(jié)果的數(shù)目,，從MPN表中查得相應(yīng)的MPN指數(shù),，從而zui后得出每升水中糞大腸菌群細(xì)菌的MPN值?？梢钥闯觯喙馨l(fā)酵法的培養(yǎng)時(shí)間至少需要2天以上,，且對接種量,、每一接種量的發(fā)酵管數(shù)都有嚴(yán)格要求(MPN表多采用9管、15管發(fā)酵管,，接種量為10ml,、1ml、0.1ml3種體積查詢),，否則結(jié)果難以統(tǒng)計(jì),。

　　⑵.濾膜法目前主要采用成套NPS(濾膜+培養(yǎng)基+培養(yǎng)皿)進(jìn)行細(xì)菌截留和培養(yǎng),，操作簡單,，使用時(shí)只需用少量無菌水潤濕培養(yǎng)基墊即可使用，培養(yǎng)時(shí)間1天左右,，能比多管發(fā)酵法更快地獲得結(jié)果,，還具有高度的再現(xiàn)性和精密性。此外由于采用單片無菌包裝,，節(jié)省了滅菌時(shí)間,，還避免操作過程中的二次污染，并且長有菌落的濾膜片可在紫外線滅菌,、干燥后作為檢測記錄保存,，更符合計(jì)量認(rèn)證規(guī)范,。

　　3.檢測成本的考慮

　　⑴.多管發(fā)酵法所用的發(fā)酵管,、小玻璃倒管和塑料蓋可在清洗,、高壓滅菌和紫外線消毒后重復(fù)使用，液態(tài)培養(yǎng)基可自行配制或采用市售已配好的綜合培養(yǎng)基,，檢測的成本不高,。由于其方法較繁瑣，目前正有一種經(jīng)過US EPA認(rèn)證的水和廢水中糞大腸菌群檢測的標(biāo)準(zhǔn)方法逐步取代它,，這種在美國,、日本和加拿大等國家廣泛使用的檢測技術(shù)在國內(nèi)也有一定使用(北京市環(huán)境檢測中心、北京市排水集團(tuán)檢測中心等),，這種方法就是使用IDEXX colilert試劑來檢測水中糞大腸菌,，雖然它是基于多管發(fā)酵法原理，不過卻將其操作大大簡化了,。當(dāng)然,，伴隨著操作的簡化，檢測成本也大幅提高,，設(shè)備基本上全是進(jìn)口的,，前期投入大概在8萬元至10萬元人民幣之間，且由于采樣瓶,、試劑和密封計(jì)數(shù)盤都是一次性使用,，單個(gè)樣品的檢測成本也將達(dá)到200元人民幣左右。

　?、?濾膜法主要采用的抽濾裝置(拋光不銹鋼3歧管過濾器,、500ml漏斗、無油隔膜真空正壓兩用泵和手動(dòng)無菌水加液器)也基本上來自于進(jìn)口,，目前很多單位使用的都是德國賽多利斯公司生產(chǎn)的產(chǎn)品,，其前期投入大概在2萬元至3萬元人民幣左右(包括100套無菌包裝的NPS，12元/每套),。由于每個(gè)樣品需采用3種不同的稀釋比進(jìn)行過濾培養(yǎng),，要使用3套NPS，所以單個(gè)樣品的檢測成本在50元人民幣左右,。

　　四.建議

　　從兩者在幾個(gè)方面的比較可以看出,，濾膜法具有省時(shí)、省料,、設(shè)備要求低以及可以采集較多的檢測水樣等優(yōu)點(diǎn),，而且隨著應(yīng)急檢測機(jī)制的建立，當(dāng)需要我們對各種突發(fā)環(huán)境污染事件(醫(yī)院廢水是否加氯處理、河湖是否受生活廢水污染)迅速做出反應(yīng),，更快地獲得肯定結(jié)果的時(shí)候,，其優(yōu)點(diǎn)越發(fā)突出。

因此在實(shí)際檢測工作中,，我們可以將濾膜法作為主要檢測方法,，并采取措施克服其易受水樣混濁度、其它菌種和有毒物質(zhì)干擾的局限性,，快速反映水質(zhì)情況,，為監(jiān)督管理部門提供科學(xué)數(shù)據(jù);將多管發(fā)酵法作為輔助方法，通過其來對濾膜法培養(yǎng)的可疑菌種進(jìn)行鑒定,，從而使檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確,，只有這樣，水中的細(xì)菌學(xué)檢測才能順利,、高效的開展,。