產(chǎn)品介紹

在Mg²⁺存在的條件下，DNA酶對DNA的每條鏈都起作用,，DNA酶的作用位點具有隨機性,。在Mn²⁺存在的條件下,，DNase I在DNA的兩條鏈上的*位置切割，從而產(chǎn)生1-2個核苷酸長度的平末端或突出末端,。

該產(chǎn)品不包含RNA酶抑制劑,，在使用時，需注意RNA酶的污染,。

在不同的緩沖體系下,，降解一定質(zhì)量的DNA所需的酶量可能有所不同，例如,，在鹽濃度大于100 mM時會抑制DNA酶的活性,。

10×反應(yīng)緩沖液是由400mM Tris-HCl (pH 8.0)，100mM MgSO₄以及10mM CaCl₂組成,。

酶儲存緩沖液: DNase 的儲存緩沖液為 10mM HEPES (pH 7.5),，50% glycerol (v/v)， 10mM CaCl2和 10mM MgCl2,。

熱失活: 在含有終止緩沖液的條件下 65 ℃反 應(yīng) 10 min,。

抑制劑: EGTA； EDTA,； 鹽濃度>100mM 將 會抑制 DNA 酶的活性,。

分子量: 31,000 kDa

必要條件: Ca 2? 及 Mg 2? 或 Mn 2? 。

來源: 牛胰腺

終止緩沖液: 20mM EGTA (pH 8.0),。

酶活性單位的定義: DNA 酶的單位活性是在 50 uL 40mM Tris-HCl (pH 7.9),，10mM NaCl， 6mM MgCl2 和 10mM CaCl2組成的緩 沖液中 37 ℃,，10 min 降解 1ug lambda DNA 所需的酶量,。在這些條件下，1 個單位的 DNA 酶活性和 1 個 Kunitz 單位近似相同,。

使用建議

該產(chǎn)品不包含 RNA 酶抑制劑,，在使用 時，需注意 RNA 酶的污染,。 在不同的緩沖體系下,，降解一定質(zhì)量的 DNA 所需的酶量可能有所不同，例如,，在鹽 濃度大于 100 mM 時會抑制 DNA 酶的活性,。

質(zhì)量控制

RNA 酶測定: 為了檢測 RNA 酶的活性，將 50ng [ 3 H]RNA 與 5 個單位的不含 RNA 酶的 DNA 酶在 37℃,，轉(zhuǎn)錄緩沖液中孵育 1 個小 時,，通過閃爍計數(shù)檢測產(chǎn)生的放射性標(biāo)記的 核苷酸。