分光光度計(jì)是將成分復(fù)雜的光,，分解為光譜線的科學(xué)儀器。測(cè)量范圍一般包括波長(zhǎng)范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200～380 nm的紫外光區(qū),。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源,。鎢燈的發(fā)射光譜：鎢燈光源所發(fā)出的380～780nm波長(zhǎng)的光譜光通過(guò)三棱鏡折射后，可得到由紅,、橙,、黃、綠,、藍(lán),、靛、紫組成的連續(xù)色譜,；該色譜可作為光度計(jì)的光源,。

分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源，通過(guò)系列分光裝置,，從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源，光線透過(guò)測(cè)試的樣品后,，部分光線被吸收,，計(jì)算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度,。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比,。單色光輻射穿過(guò)被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí)，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長(zhǎng)度）成正比,，其關(guān)系如下式：

A=-lg(I/I,。)=-lgT=kLc

式中 :A 為吸光度；

I,。為入射的單色光強(qiáng)度,；

I 為透射的單色光強(qiáng)度；

T 為物質(zhì)的透射率,；

k 為摩爾吸收系數(shù),；

L 為被分析物質(zhì)的光程，即比色皿的邊長(zhǎng),；

c 為物質(zhì)的濃度,；

       物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收波長(zhǎng),，以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液,，測(cè)定其吸收度,即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量,。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對(duì)光有吸收外,，很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過(guò)處理使其顯色后再測(cè)定,故又稱比色分析,。由于顯色時(shí)影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器,，故測(cè)定時(shí)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r(shí)操作,。