猴胚胎腎上皮細胞Marc-145懸浮適應(yīng)株;價格
- 公司名稱 上海研生實業(yè)有限公司
- 品牌 ATCC
- 型號
- 產(chǎn)地 進口/國產(chǎn)
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2018/5/8 16:17:27
- 訪問次數(shù) 306
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猴胚胎腎上皮細胞Marc-145懸浮適應(yīng)株,;價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造,。
細胞名稱 猴胚胎腎上皮細胞Marc-145懸浮適應(yīng)株;價格
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次),。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),,晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61),。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮,、分散,,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,,待細胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),,按公式計算出細胞數(shù),。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-CRMP2/Dpysl2(collapsin response mediator protein-2)/FITC 熒光素標記抗二氫嘧啶酶樣2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Lectin/FITC 熒光素標記抗凝集素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CCDC134 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白134抗體 規(guī)格 0.2ml
GPA33(glycoprotein A33 transmembrane) 糖蛋白A33(跨膜)抗原 0.5mg
HDLBP 英文名稱: 高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SLPI/ALK1 分泌型白細胞蛋白酶抑制因子抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Lectin/FITC 熒光素標記抗凝集素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
INH-BGnRH(Mouse inhibin B) ELISA Kit 小鼠抑制素BMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Cripto-1/FITC 熒光素標記表皮生長因子相關(guān)肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Defensin β1 防御素β1抗體 規(guī)格 0.1ml
Guinea pig IgM/Cy3 熒光素Cy3標記豚鼠IgM 0.1ml
phospho-LATS2 (Ser83) 英文名稱: 磷酸化抑制基因LATS2抗體 0.1ml
頭包噻呋單克隆抗體 小鼠單抗 0.5
Anti-Cripto-1/FITC 熒光素標記表皮生長因子相關(guān)肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
GPRC5C 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體GPRC5C蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALT1 谷丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-phospho-Syndecan 4/FITC 熒光素標記抗磷酸化多配體聚糖4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Guinea pig IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格 0.3ml
Anti-Phospho-RIP2 (Ser176) /FITC 熒光素標記磷酸化受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PAL(Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase) ELISA Kit 小鼠L苯丙氨酸解氨酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD8/FITC 熒光素標記CD8蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh E2F8 轉(zhuǎn)錄因子E2F8抗體 規(guī)格 0.2ml
EHF IgM 流行性出血熱病毒 IgM(間接法二步法)
MIG6 英文名稱: 有絲分裂原誘導基因6抗體 0.2ml
ATEXPA10 英文名稱: 植物延長蛋白(擬南芥) 1ml
Anti-CD8/FITC 熒光素標記CD8蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml