細(xì)胞名稱  長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞,；201184培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞系來源于一雌性長白山豬胚胎的皮膚。2011年由中科院昆明細(xì)胞庫建立,。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1：

2傳代,；3-4天一次  

傳代情況 P3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測

STR -

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞；201184培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）,。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次,，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮,、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻,，吸管分裝混合液,，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心,，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化,、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％,，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值,。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好,，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。
Anti-FOXO3A/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子FOXO3A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-NK-2R/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)激肽A受體/K物質(zhì)受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BTBD7 BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 規(guī)格 0.2ml

NGF-R(p75NTR) 神經(jīng)生長因子受體(抗原) 0.5mg

HCA25a 英文名稱： 肝癌相關(guān)抗原h(huán)ca25a 0.2ml

Rhesus antibody Rh RMND1 減數(shù)分裂同源蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-NK-2R/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)激肽A受體/K物質(zhì)受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Kim-1(Mouse Kidney injury molecule 1) ELISA KIT 小鼠腎損傷分子1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CD33L/OBBP1/FITC 熒光素標(biāo)記兔CD33L抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh DUSP26/MKP8 雙特異性蛋白磷酸酶26抗體(原活化蛋白激酶磷酸酶8) 規(guī)格 0.2ml

COX IgG VI 柯薩奇病毒 IgG Ⅵ(間接法二步法)

GPR24 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體24抗體 0.1ml

ACY3 英文名稱： 丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體 0.2ml

Anti-CD33L/OBBP1/FITC 熒光素標(biāo)記兔CD33L抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml

D4 GDI 英文名稱： 轉(zhuǎn)移抑制基因GDIA2抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh ANKRD13B 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-IQGAP1/FITC 熒光素標(biāo)記支架蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格 0.1ml

Anti-SARS putative orflab polyprotein/FITC 熒光素標(biāo)記SARS抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Beta-EP(human Beta-Endorphin) ELISA Kit 人β內(nèi)啡肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-HB-EGF/DTSF 肝素結(jié)合性表皮生長因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mitofusin 2/MFN2 線粒體融合蛋白Mfn2抗體 規(guī)格 0.1ml

E2/UBCE(Human E2/ubiquitin-conjugating enzyme) ELISA Kit 人泛素結(jié)合酶 96T

ROCK1 英文名稱： Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 0.1ml

CHD4 英文名稱： 染色質(zhì)解旋酶DNA結(jié)合蛋白Mi2β抗體 0.1ml

Anti-HB-EGF/DTSF 肝素結(jié)合性表皮生長因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml