細(xì)胞名稱  犬胸腺細(xì)胞；cf2Th培養(yǎng)
形態(tài)特性

品牌 貼壁

特征特性 該細(xì)胞為幾種逆轉(zhuǎn)錄病毒的敏感株,，可用于擴(kuò)增逆轉(zhuǎn)錄病毒,。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS  

傳代方法 1:2-1:6，每周換液2-3次

傳代情況

凍存條件 90%FBS+10%DMSO

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

犬胸腺細(xì)胞,；cf2Th培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液,，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí),，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮,、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液,，傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,，待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心,，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液,，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率,。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-CT/FITC 熒光素標(biāo)記降鈣素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Laminin Beta1/FITC 熒光素標(biāo)記層粘連蛋白β1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CCDC114 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白114抗體 規(guī)格 0.2ml

Gelsolin 凝溶膠蛋白抗原 0.5mg

HA tag(12CA5) 英文名稱： HA tag標(biāo)簽單克隆抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh SLC7A9 離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白SLC7A9抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-Laminin Beta1/FITC 熒光素標(biāo)記層粘連蛋白β1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LFA-3/CD58 ELISA Kit 大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-AARS2 /FITC 熒光素標(biāo)記丙氨酰tRNA合成酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FLT3L FMS樣酪氨酸激酶3配體抗體 規(guī)格 0.2ml

ALT/GPT(Mouse Alanine Aminotransferase) ELISA Kit 小鼠丙酸轉(zhuǎn)酶/谷丙轉(zhuǎn)酶 96T

Motilin 英文名稱： 胃動(dòng)素抗體 0.1ml

AIF 英文名稱： 調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體 0.1ml

Anti-AARS2 /FITC 熒光素標(biāo)記丙氨酰tRNA合成酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

phospho-GSK3 Beta (Tyr216) 英文名稱： 磷酸化糖原合酶激酶3β抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh ANKS1B/AIDA1 β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-Inhibin BetaA/FITC 熒光素標(biāo)記抑制素βA抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-ROS/FITC 熒光素標(biāo)記活性氧簇ROS抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-IAA/FITC 熒光素標(biāo)記吲哚-3-乙酸抗體/植物生長素單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-P-AKT1/PKB1/2/3(pSer473) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白激酶B(pSer473)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ASAM/ACAM 脂肪細(xì)胞特異性粘附分子抗體 規(guī)格 0.1ml

Donkey Anti-rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml

GIT2 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Monkey IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗猴IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-P-AKT1/PKB1/2/3(pSer473) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白激酶B(pSer473)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。