細胞名稱  豹貓肌肉成纖維樣細胞；LCM4培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細胞系來源于一雄性豹貓的肌肉組織,。2004年由中國科學院昆明細胞庫建立,。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%NBS  

傳代方法 1：

2傳代,；3-4天一次  

傳代情況 P3

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 熒光法（-）

STR -

同工酶

染色體

使用權限 B類
豹貓肌肉成纖維樣細胞；LCM4培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好,，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化,，(根據經驗),，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打,，使細胞基本成單個懸浮,，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗,。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）,。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次,，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁,、懸浮、分散,，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻，吸管分裝混合液,，傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓,、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,，按公式計算出細胞數,。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液,，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％,，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,，計數每孔細胞的數目并計算平均值,。連續(xù)計數10d,，繪制細胞生長曲線
Anti-Eph receptor B2/FITC 熒光素標記Eph receptor B2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-MTNR1A/MTR-1A /FITC 熒光素標記褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C1orf159 1號染色體開放閱讀框159抗體 規(guī)格 0.2ml

CaMK2a(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II alpha) 鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗原 0.5mg

H-2Dd 英文名稱： I類組織相容性H-2抗原D-Dalpha鏈抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh RPUSD2 RNA尿苷酸合酶結構域蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-MTNR1A/MTR-1A /FITC 熒光素標記褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LIF peptide 白血病抑制因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烴受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CaM I (Ser 101) 磷酸化鈣調節(jié)素抗體 規(guī)格 0.1ml

過氧化物酶阻斷劑A 10ml 推薦用于冰凍切片,孵育20-30分鐘.

VNN2 英文名稱： 血管非炎性蛋白2抗體 0.2ml

DHCR7 英文名稱： 7脫氫膽固醇還原酶抗體 0.2ml

Anti-Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烴受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml

Golgi Complex 英文名稱： 高爾基復合體CFR1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh AMPK alpha 1/PRKAA1 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-Iumbrokinase/FITC 熒光素標記抗蚯蚓纖溶酶抗體/抗蚓激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗馬IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-phospho-SHC (Ser36) /FITC 熒光素標記磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-IFN- Beta/FITC 熒光素標記干擾素-β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) /FITC 熒光素標記磷酸化內分泌腺衍生血管內皮生長因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ARRDC2 抑制蛋白結構域蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml

Donkey Anti-human IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的驢抗人IgG 0.1ml

GBAS 英文名稱： 膠質母細胞瘤相關蛋白GBAS抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Monkey IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗猴IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) /FITC 熒光素標記磷酸化內分泌腺衍生血管內皮生長因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同,。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造,。