敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1價(jià)格
- 公司名稱 上海研生實(shí)業(yè)有限公司
- 品牌 ATCC
- 型號
- 產(chǎn)地 進(jìn)口/國產(chǎn)
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2018/5/7 16:24:43
- 訪問次數(shù) 403
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敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞,;GH-S1價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。
細(xì)胞名稱 敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1價(jià)格
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雌性敘利亞倉鼠的皮膚組織,。2002年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立,。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:
2傳代;3-4天一次
傳代情況 P4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次),。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),,晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61),。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,,細(xì)胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮、分散,,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,,計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化,、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,,計(jì)算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值,。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-Aurora A /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠,、、兔,、馬,、豬有絲分裂激酶A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-GATA-6/FITC 熒光素標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CLEC2D/OCIL CLEC2D蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Integrin Alpha 4/ITGA4(Integrin alpha 4) 整合素-α(抗原) 0.5ml
H1N1 Hemagglutinin 1 英文名稱: 甲型流感病毒血凝素抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh TRIM7/RNF90 糖原生成素相互作用蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-GATA-6/FITC 熒光素標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
L-LDH(Human L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人L-乳酸脫氫酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-10 白細(xì)胞介素-10抗體 規(guī)格 0.1ml
BMP-7(Mouse Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白7 96T
Protein CASP 英文名稱: CASP抗體 0.1ml
CK1 英文名稱: 細(xì)胞角蛋白1抗體 0.1ml
Anti-Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
Fibrinogen beta chain 英文名稱: 纖維蛋白原β鏈抗體 0.1ml
人巨細(xì)胞病毒UL23抗體 anti-HCMV UL23/HHV5 UL23 0.1ml
Anti-Parvalbumin/FITC 熒光素標(biāo)記微白蛋白/細(xì)小清蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyhr927) 磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti-human IgM/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗人IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
Anti-IFNGR1/CD119/FITC 熒光素標(biāo)記干擾素-gamma受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Plectin/FITC 熒光素標(biāo)記網(wǎng)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARMER ARMER抗體 規(guī)格 0.2ml
Donkey Anti-human IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
GCSH 英文名稱: 甘酸裂解系統(tǒng)H蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗猴IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-Plectin/FITC 熒光素標(biāo)記網(wǎng)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml