大鼠肝癌細(xì)胞；Wrh-f2價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。
細(xì)胞名稱  大鼠肝癌細(xì)胞；Wrh-f2價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣

品牌 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,，其特征特性尚未公開,。

培養(yǎng)條件 10%FBS

傳代方法 無(wú)

傳代情況 1：

3傳代，3-4天傳1次  

凍存條件 C5

支原體檢測(cè) 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

STR 陰性　

同工酶

染色體 未做

貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好,，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。

操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）,。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次,，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻,，吸管分裝混合液,，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心,，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化,、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％,，計(jì)算貼壁率,。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值,。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-GRP/FITC 熒光素標(biāo)記促胃泌素釋放肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-P73 protein/FITC 熒光素標(biāo)記P73抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Bdkrb2/B2R 緩激肽B2受體抗體 規(guī)格 0.2ml

MYOG 肌紅蛋白抗原 0.5mg

GRP75 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體75抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh RAD9 細(xì)胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-P73 protein/FITC 熒光素標(biāo)記P73抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
L-Selectin/CD62L ELISA Kit 大鼠L選擇素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-AK-1/FITC 熒光素標(biāo)記腺苷酸激酶-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FBXL21/FBL3B FBXL21蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

HL(Mouse hepatic lipase) ELISA Kit 小鼠肝脂酶 96T

MTGR1 英文名稱： 髓易位基因相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml

A2LD1 英文名稱： A2LD1蛋白抗體 0.2ml

Anti-AK-1/FITC 熒光素標(biāo)記腺苷酸激酶-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

FAR1 英文名稱： 脂肪?；o酶A還原酶1抗體 0.2ml

周期素H抗體 Anti-Cyclin H 0.2ml

Anti-PAI-2/FITC 熒光素標(biāo)記纖溶酶原激活物抑制因子2抗體體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-VASP(Ser157) 磷酸化血管擴(kuò)張刺激磷蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

mouse IgG/Biotin 生物素化小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 1ml
Anti-HSP-70/FITC 熒光素標(biāo)記HSP-70蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ASBT/SLC10A2 頂膜鈉依賴性膽鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

Donkey Anti-Goat IgG/APC APC標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml

GLS2 英文名稱： 谷酰胺酰胺水解酶抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-mouse IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml