大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞；IEC-6價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。
細(xì)胞名稱  大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞；IEC-6價格
形態(tài)特性 上皮樣　

品牌 貼壁生長

特征特性 皮質(zhì)醇可抑制該細(xì)胞的生長,。該細(xì)胞表達(dá)腸上皮*抗原,，在20代以前保持恒定的生長速度和細(xì)胞形態(tài)，此后生長速度迅速下降,，細(xì)胞形態(tài)也發(fā)生改變,。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 5%FBS；0.01mg/ml Insulin  

傳代方法 1:3~1:6傳代,；每周換液2次,。

傳代情況 P24

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支?
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好,，以免中和后加入的消化液,，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）,。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次,，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻,，吸管分裝混合液,，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心,，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％,，計算貼壁率,。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d,，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-Histone H1/FITC 熒光素標(biāo)記抗組蛋白H1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-phospho-ATF2(pSer490/pSer498)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化活化復(fù)制因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ATR/ACTR/RAC3 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ATR抗體 規(guī)格 0.1ml

VIP (Vasoactive Intestinal peptide) 血管活性腸肽 0.5mg

GRAP2 英文名稱： 生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-mouse IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 規(guī)格 0.3ml

Anti-phospho-ATF2(pSer490/pSer498)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化活化復(fù)制因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
M-AChR ELISA Kit 大鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-T4 甲狀腺素T4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Glypican 5 磷脂?；嫉鞍拙厶?5抗體 規(guī)格 0.2ml

Beta-EP(mouse Beta-Endorphin) ELISA Kit 小鼠β內(nèi)啡肽 96T

NOSTRIN 英文名稱： 一氧化氮合酶轉(zhuǎn)運(yùn)誘導(dǎo)抗體 0.1ml

Angiotensin I 英文名稱： 血管緊張素I抗體 0.2ml

Anti-T4 甲狀腺素T4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml

GPRIN1 英文名稱： G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Apelin/Apelin 13 脂肪炎癥因子Apelin抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-IL-17/PE 熒光素PE標(biāo)記白介素-17抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-Raptor /FITC 熒光素標(biāo)記mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-PPAR Gamma /FITC 熒光素標(biāo)記過氧化酶活化增生受體γ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit Anti-Bovine IgM Whole serum 兔抗IgM抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml

兔抗非洲爪蟾IGC抗體 Anti-IGC 1ml

Dog IgM 兔抗犬IgM抗體 0.1ml

FUT11 英文名稱： 巖藻糖轉(zhuǎn)移酶11抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Rad17 (Ser645) 磷酸化細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-Bovine IgM Whole serum 兔抗IgM抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml