細(xì)胞名稱  大鼠氣管上皮細(xì)胞,；RTE培養(yǎng)
形態(tài)特性 多角　

品牌 貼壁生長

特征特性

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 20%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,；3~4天1次。  

傳代情況 C6

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）　

STR -

同工酶

染色體 　

使用權(quán)限 A類
大鼠氣管上皮細(xì)胞,；RTE培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液,，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）,。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次,，細(xì)胞長至60%～70%融合時,，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮,、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻，吸管分裝混合液,，傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,，待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心,，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),，按公式計算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液,，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率,。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-H1N1/FITC 熒光素標(biāo)記抗流感病毒A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-PAX5/FITC 熒光素標(biāo)記配對盒基因5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BCAT2/BCAM 支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶2抗體 規(guī)格 0.1ml

CKLF1 趨化素樣蛋白 0.5mg

Granzyme K 英文名稱： 顆粒酶K抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-PAX5/FITC 熒光素標(biāo)記配對盒基因5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
M-AChR(Human muscarinic acetylcholine receptor) ELISA Kit 人毒蕈堿型乙酰膽堿受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml

Rhesus antibody Rh LAMA3/Laminin 5 alpha 3 層粘蛋白α3抗體 規(guī)格 0.1ml

NP9Human Nandrolone Phenylpropionate) ELISA Kit 人苯丙酸諾龍/苯丙酸去甲睪酮 96T

PFK1 英文名稱： 6磷酸果糖激酶1抗體 0.2ml

CCDC102B 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白102B抗體 0.2ml

Anti-Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
Rabbit Anti-rat IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml

Phospho-FoxO1 (Ser256) 英文名稱： 磷酸化叉頭蛋白家族1抗體 0.1ml

緊密連接蛋白-5抗體 claudin-5 0.1ml

Anti-P21/WAF1/CIP1 /FITC 熒光素標(biāo)記p21抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Pinin 橋粒相關(guān)蛋白DRS抗體 規(guī)格 0.2ml

Donkey Anti-Guinea IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)驢抗豚鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ACA-IgG(Mouse anti-cardiolipin antibody IgG) ELISA Kit 小鼠抗心磷脂抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CK5/6 /FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白5/6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Dnmt3 Beta DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3β抗體 規(guī)格 0.2ml

dog IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記狗IgG 0.3ml

LRRC15 英文名稱： 富含亮酸重復(fù)蛋白15抗體 0.2ml

赭曲霉毒素A檢測試劑盒 96孔/盒 糧食作物(玉米,、大米、豆類,、花生,、麥類等),、、飼料等

Anti-CK5/6 /FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白5/6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。