實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1,、了解超聲細(xì)胞破碎的基本原理
2,、掌握超聲細(xì)胞破碎的基本技術(shù)

實(shí)驗(yàn)原理
強(qiáng)聲波作用溶液時(shí)，氣泡產(chǎn)生,、長(zhǎng)大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),，空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。

材料和試劑
細(xì)菌10ml,、燒杯,、刨冰、75％酒精棉球

超聲波納米分散設(shè)備廠家

超聲波納米分散設(shè)備廠家

細(xì)胞破碎的方法:

一,、機(jī)械破碎法：是指利用搗碎機(jī),、研磨器或勻漿器 等將細(xì)胞破碎開來(lái) 。
1. 高速組織搗碎：將材料配成稀糊狀液,，放置于筒內(nèi)約1/3體積,，蓋緊筒蓋，將調(diào)速器先撥至zui慢處,，開動(dòng)開關(guān)后,，逐步加速至所需速度,。此法適用于動(dòng)物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等,。
2. 玻璃勻漿器勻漿：先將剪碎的組織置于管中,，再套入研桿來(lái)回研磨，上下移動(dòng),，即可將細(xì)胞研碎,，此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高，適用于量少和動(dòng)物臟器組織,。

二,、物理破碎法：指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細(xì)胞破碎開來(lái),。
1：用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,，使細(xì)胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動(dòng)力破碎細(xì)胞壁和細(xì)胞器）。
機(jī)制：可能與強(qiáng)聲波作用溶液時(shí),，氣泡產(chǎn)生,、長(zhǎng)大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān)，空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解,。
超聲波破碎的效率取決于聲頻,、聲能、處理時(shí)間,、細(xì)胞濃度和細(xì)胞類型等,。（使用時(shí)注意降溫，防止過(guò)熱）,。
2. 高壓破碎：細(xì)胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上,，被迫改變方向經(jīng)出口管流出。此過(guò)程中細(xì)胞經(jīng)歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,，從而破碎釋放內(nèi)含物。
這是一種溫和的,、*破碎細(xì)胞的較理想的方法,。
3. 反復(fù)凍融法：將細(xì)胞在-20度以下冰凍，室溫融解,，反復(fù)幾次,，由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹，使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎,。

使用前注意事項(xiàng)：

1．根據(jù)所處理的樣本體積選擇適當(dāng)探頭,，使用前后均須用酒精棉球擦洗探頭，換探頭須剛扳手更換;

2．AMPLITUDE旋鈕打開時(shí),，探頭不得在空氣中暴露,，特殊情況下(測(cè)試探頭)不應(yīng)超過(guò)10秒,；

3．使用前準(zhǔn)備好冰盒，樣品處理時(shí)必須置于冰浴中,，樣品濃度不可過(guò)大,。