豬成骨原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

豬成骨細(xì)胞分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方,，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成,。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),，起著保護(hù)和支持腦,、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部,，內(nèi)有顱腔,，容納腦，共8塊,。面顱為顱的前下部分,，包含眶、鼻腔,、口腔等結(jié)構(gòu),，構(gòu)成面部的支架，共15塊,。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞,，負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化,。骨不斷地進(jìn)行著重建,，骨重建過程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域，分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì),，分泌蛋白酶消化骨基質(zhì),，形成骨吸收陷窩；其后,，成骨細(xì)胞移行至被吸收部位,，分泌骨基質(zhì)，骨基質(zhì)礦化而形成新骨,；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵,。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機(jī)制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ),，也是藥物篩選,、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。

方法簡介：

公司實驗室分離的豬成骨細(xì)胞采用先用蛋白酶短時間消化,、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的豬成骨細(xì)胞經(jīng)ALP染色檢測,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3,、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。

大鼠骨髓瘤細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3  大鼠垂體瘤細(xì)胞;MMQ 腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞，SW-13細(xì)胞 Neuro-2a[N2a;Neuro-2a]細(xì)胞,，小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞  人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30  Ec109細(xì)胞,，食管癌細(xì)胞 人卵巢癌細(xì)胞 人原代輸尿管平滑肌細(xì)胞 人原代NK細(xì)胞

酸性葡糖苷酶α(GαA)重組蛋白 Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)

CD8A Protein Human 重組人 CD8A / MAL 蛋白

IL33重組人 IL33 / Interleukin-33 / NF-HEV 蛋白 Protein

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

CCL2重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 Protein

大鼠二(MDA)試劑盒 ，英文名： MDA ELISA Kit

Mouse ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 小鼠α干擾素(IFN-α)試劑盒

ELISA 小鼠內(nèi)皮細(xì)胞合酶(mouse eNOS)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforKLHELISAKit小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白

通用型大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)試劑盒20次

ELISAKitTGFβ2大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2

小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒   96T/48T

小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)試劑盒   96T/48T

小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)試劑盒   96T/48T

小鼠血管舒緩激肽(BK)試劑盒   96T/48T

豬成骨原代細(xì)胞小鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human vacuolating cytotoxin associated protein A (VacA) ELISA Kit 人空泡毒素相關(guān)蛋白A(VacA)試劑盒

Humanα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit 人α2抗纖溶酶(α2-AP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor(Mouseovariancancermarker-CA125)ELISAKit小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125

飲料乙比色法定量試劑盒20次

MouseIerleukin9,IL-9ELISAKit小鼠白介素9(IL-9)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD3D & CD3E重組食蟹猴 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白 Protein

Matriptase 蛋白裂解酶(一種新的癌基因 0.5mgMatriptase 蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗原

CD19重組人 CD19 / Leu-12 蛋白 Protein

CD28 Protein Human 重組人 CD28 / TP44 蛋白

BDNF Protein Mouse 重組小鼠 / 人 BDNF 蛋白