sh 腫瘤標志物ELISA試劑盒
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 公司名稱 上海雙贏生物試劑有限公司
- 品牌
- 型號 sh
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2017/4/26 18:54:50
- 訪問次數(shù) 1027
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腫瘤標志物ELISA試劑盒對檢測標本的測定十分廣泛,,標本形態(tài)均為液體,。大部分 ELISA 檢測均以血清為標本(血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清),,這是因為血清標本只要待血清自然凝固,、血塊收縮后即可取得,來源方便,,操作簡單,。但不可因為簡單而掉以輕心,血清標本宜在新鮮時檢測,,應注意避免溶血,,保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑,。
腫瘤標志物ELISA試劑盒操作步驟:
實驗開始前,,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線,。如樣品濃度過高時,,用樣品稀釋液進行稀釋,,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔,、標準孔,、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,,加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘,。為保證實驗結果有效性,,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,,甩干,,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,,輕輕混勻,,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘,。
3. 溫育60分鐘后,,棄去孔內液體,甩干,,洗板3次,,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,,甩干,。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,,60分鐘,。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,,甩干,,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,,甩干,。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,,后3-4孔梯度不明顯,即可終止),。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結果的準確性,,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測,。
注意事項:
1) 在收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。
2) 我們提倡新鮮標本盡早檢測,,對收集后及時進行檢測。 1-3 天左右檢測的樣本可儲存在 4℃ 備用,。如有特殊原因需要周期性收集標本,,請將標本及時分裝后放在 -20℃ 或 - 70℃ 條件下保存,避免反復凍融,。
實驗技巧:腫瘤標志物(TumorMarker)是反映腫瘤存在的化學類物質,。它們或不存在于正常成人組織而僅見于胚胎組織,或在腫瘤組織中的含量大大超過在正常組織里的含量,,它們的存在或量變可以提示腫瘤的性質,,借以了解腫瘤的組織發(fā)生、細胞分化,、細胞功能,,以幫助腫瘤的診斷、分類,、預后判斷以及治療指導,。