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產(chǎn)品名稱：A-673細胞,，人非小肺癌細胞

庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨

細胞規(guī)格：株

質控標準：無支原體、無污染,、符合標準

運輸方式：新鮮運輸和凍存管運輸

貨期：新鮮運輸需要1-2周,，凍存管運輸?shù)男枰?-3天

：/18916413500

A-673細胞，人非小肺癌細胞,，栩冉生物,，質粒的相關知識：
一.如何閱讀質粒圖譜
*步：首先看 Ori 的位置，了解質粒的類型（原核/真核/穿梭質粒）,。
第二步：再看篩選標記,，如抗性，決定使用什么篩選標記,。
--Ampr   水解β-內(nèi)酰胺環(huán),，解除氨芐的毒性；
--tetr   可以阻止四環(huán)素進入細胞,；
--camr   生成氯霉素羥乙?；苌铮怪ザ拘?；
--neor(kanr)氨基糖苷磷酸轉移酶 使G418（長那霉素衍生物）失活,；
--hygr   使潮霉素β失活。
第三步：看多克隆位點（MCS）,。它具有多個限制酶的單一切點,，便于外源基因的插入,。如果在這些位點外有外源基因的插入，會導致某種標志基因的失活,，從而便于篩選,。MCS決定了能不能放置目的基因以及如何放置目的基因。
第四步：再看外源DNA插入片段大小,。質粒一般只能容納小于10Kb的外源DNA片段,。一般來說，外源DNA片段越長,，越難插入,，越不穩(wěn)定，轉化效率越低,。
第五步：是否含有表達系統(tǒng)元件，即啟動子－核糖體結合位點－克隆位點－轉錄終止信號,，這是用來區(qū)別克隆載體與表達載體,。在克隆載體中加入一些與表達調(diào)控有關的元件即成為表達載體。選用哪種載體,，要以實驗目的為依據(jù),。
二.如何選擇載體
把目的基因通過基因工程手段送到生物細胞（受體細胞），需要運載工具（交通工具）攜帶外源基因進入受體細胞,，這種運載工具就叫做載體（vector）,。基因工程所用的vector實際上是用來攜帶目的基因片段進入受體細胞的 DNA,。
選擇載體主要依據(jù)構建的目的,，同時要考慮載體中應有合適的限制酶切位點。如果構建的目的是要表達一個特定的基因,，則要選擇合適的表達載體,。
載體選擇主要考慮下述3點：
1. 構建DNA重組體的目的：克隆載體/表達載體。
2. 載體的類型：
克隆載體的克隆能力：根據(jù)克隆片段大?。ù筮x大,，小選小）,。如<10kb選質粒,。
表達載體：根據(jù)受體細胞類型：原核/真核/穿梭，E.coli/哺乳類細胞表達載體,。
原核表達載體要選擇合適的啟動子及相應的受體菌,；表達真核蛋白時需注意閱讀框錯位問題；表達天然蛋白和融合蛋白所需載體亦有區(qū)別,。
3. 選用質粒做載體的4點要求：
（1）選分子量小的質粒,，即小載體（1~1.5 kb）：不易損壞,，在細菌里面拷貝數(shù)也多（也有大載體）；
（2）一般使用松弛型質粒在細菌里擴增不受約束,，一般10個以上的拷貝,，而嚴謹型質粒<10個。
（3）必需具備一個以上的酶切位點,，有選擇的余地,；
（4）必需有易檢測的標記，多是抗生素的抗性基因,。
無論選用哪種載體,，首先都要獲得載體分子，然后采用適當?shù)南拗泼笇⑤d體DNA進行切割,，獲得載體片段,，以便于與目的基因片段進行連接。

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