制備型/半制備液相色譜柱
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- 公司名稱 依利特(大連)分析儀器有限公司
- 品牌 依利特
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/8/28 15:57:33
- 訪問次數(shù) 9681
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制備型/半制備液相色譜柱的系統(tǒng)由儲液器,、泵、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測器、記錄儀等幾部分組成,。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi), 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運(yùn)動時, 經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來,。
制備型/半制備液相色譜柱的使用和維護(hù):
在日常分離分析工作中,色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,,色譜柱使用是否得當(dāng),,直接影響色譜柱的壽命,,稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞,。在色譜操作過程中,,需要注意下列問題,以維護(hù)色譜柱,。
(1) 柱子在裝卸,、更換時,動作要輕,,接頭擰緊要適度。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動,,以免柱床產(chǎn)生空隙,。
(2) 如果儀器用來做常規(guī)分析,樣品種類有限,,但分析次數(shù)多,,則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根柱,這樣有助于延長柱子的壽命,。
(3) 避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動,。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進(jìn)行,,在閥進(jìn)樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩,。
(4) 應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?/div>
(5) 如使用柱溫控制裝置時,應(yīng)注意在通人流動相后才能升溫,。
(6) 一般說來色譜柱不能反沖,,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì),。否則反沖會迅速降低柱效,。
(7) 選擇使用適宜的流動相,以避免固定相被破壞,。有時可以在進(jìn)樣器前面連接一個預(yù)柱,,分析柱是鍵合硅膠時,預(yù)柱為硅膠,,可使流動相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
(8) 避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi),,需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個保護(hù)柱,。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱,。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
(9) 經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì),。在進(jìn)行清洗時,對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,,每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,,即常規(guī)分析需要50-75mL。
(10) 保存色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,,柱接頭要擰緊,,防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間,。
(11) 色譜柱使用過程中,,如果壓力升高,一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,,這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗,;另一種可能是大分子進(jìn)人柱內(nèi),使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,,死體積增大。
(12) 在完成分離分析工作之后,,不應(yīng)立即停機(jī),,需及時對色譜分析系統(tǒng)進(jìn)行沖洗,一般0.5h以上,,以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì),。
使用注意:
拿到一根新柱時,一定要先看其使說明,,然后測柱效,,定期檢測柱效, 保留在新色譜柱上得到的色譜圖,,并記錄條件,, 定期檢測儀器的譜帶展寬。 若應(yīng)用于在線監(jiān)測,, 應(yīng)對色譜柱提供在線的物理保護(hù)和化學(xué)保護(hù),, 例如采取安裝在線過濾器, 自裝填料保護(hù)柱和預(yù)裝保護(hù)柱等,。在線過濾器的作用是防止顆粒在柱頭累計(jì),,優(yōu)點(diǎn)是基本不影響柱效, 在需要高柱效的時候常用, 常更換的消耗品是濾芯和墊圈保護(hù)柱的作用是防止柱子被化學(xué)污染,。 缺點(diǎn)是多數(shù)保護(hù)柱影響色譜柱的柱效,, 特別是在用微柱時,常用的是普通 自裝填料的保護(hù)柱,。
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