產(chǎn)品名稱：A431 A431細胞 細胞株

代號：A431

中文名稱：人皮膚鱗癌細胞

生長狀態(tài)：貼壁生長|懸浮生長|半貼壁半懸浮生長

細胞形態(tài)：上皮樣|成纖維樣|圓形|不規(guī)則

培養(yǎng)條件：DMEM|1640|MEM|IMDM+10% FBS

細胞規(guī)格：>5×100000cells/瓶.

特征特性：該細胞源自一位患有皮膚鱗狀細胞癌的85歲女性,，是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株,。該細胞在免疫抑制小鼠體內(nèi)可成瘤，在瓊脂上培養(yǎng)可形成克??；是一個超三倍體人細胞株。

傳代：1:3~1:8傳代,；每2~3天換液1次,。

庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨

運輸方式：運輸方式分為新鮮運輸和凍存管運輸兩種運輸方式

貨期：新鮮運輸需要1-2周，凍存管運輸?shù)男枰?/span>2-3天

慧穎細胞庫提供的所有細胞僅供科研使用

原代細胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細胞,、組織和器官后立即進行培 養(yǎng),；因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng),，此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì),，如果是正常細胞,，仍然保留二倍體數(shù)。不同的原代細胞傳代次數(shù)不同,，具體需咨詢客服人員或者自行查閱 相關資料,。

細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標志的培 養(yǎng)細胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講,，理論上可培養(yǎng)到40-50代,。

客戶應具有一定細胞培養(yǎng)知識與經(jīng)驗，并具備基本培養(yǎng)條件（細胞培養(yǎng)實驗室,，無菌操作臺,、CO2培養(yǎng)箱，可拍照倒置顯微鏡等）,，并按說明書要求準備好相應的無菌的培養(yǎng)基,、血清、雙抗,、細胞培養(yǎng)瓶,、培養(yǎng)板等。如果因客戶缺少基本培養(yǎng)經(jīng)驗和培養(yǎng)條件而導致細胞死亡或污染,，不在我司售后責任之內(nèi),。

潔凈區(qū)，并不是沒有細菌,，而是細菌的數(shù)量非常少,，國家標準100級的潔凈標準是浮游菌數(shù)不得超過5個每立方米，沉降菌數(shù)不得超過1個每培養(yǎng)皿.而國外的標準比我國的還要高一點,，要求的數(shù)量更少,。在我們的潔凈操作臺里，并不是真正一個細菌都沒有的,，所以在操作的時候還是要盡量利索迅速地完成操作,。盡量減少進入培養(yǎng)體系細菌的數(shù)量。 處理細菌污染的重要原則就是：無限地稀釋細菌的濃度,，無限地減少細菌的數(shù)量,！ 1）.將污染的培養(yǎng)液倒掉，轉(zhuǎn)燒瓶口,，加入10mlPBS,，適當晃動清洗培養(yǎng)瓶，然后倒掉,。轉(zhuǎn)燒瓶口,。  2）.繼續(xù)加入10mlPBS，同樣方法晃動,，清洗培養(yǎng)瓶,，然后倒掉,。 3）.繼續(xù)加入5mlPBS，同樣方法洗瓶,，主要是培養(yǎng)面,，然后倒掉。 4）.重復步驟3再洗,。 5）.重復步驟3再洗,。  6）.加入3-5ml雙抗，洗瓶,，靜置3-5分鐘,，然后吸出。 7）.加入3ml雙抗,，洗瓶,，靜置3-5分鐘，然后吸出,。 8）.再加入5mlPBS洗瓶,，然后吸出。  9）.加入10ml培養(yǎng)液,，加入2ml雙抗,，放置培養(yǎng)箱培養(yǎng)，5小時之后,，倒掉培養(yǎng)基,，加入PBS洗瓶兩次，然后加入胰酶消化,，吹打后置于離心機800-1000r/min離心,，然后洗一次,。置于新的培養(yǎng)瓶里培養(yǎng),，培養(yǎng)體系加入2ml雙抗。  10）.24h之后,，視情況換液,，若仍然污染嚴重，培養(yǎng)基渾濁,，重復以上步驟,，若看不到污染物，則繼續(xù)步驟1),、3）,、4）、6）,、8）,，然后加入培養(yǎng)液培養(yǎng),，培養(yǎng)體系加入2ml雙抗.  11).24h之后，若仍污染嚴重,，可再重復一次,，若還污染只能棄之（不過一般沒有出現(xiàn)這種情況），若鏡下不見污染物,，則換液PBS洗瓶,，正常培養(yǎng)。  以上是對于細菌污染（常見為金黃色葡萄球菌和大腸桿菌）,；若為霉菌或者真菌污染,，加入兩性霉素B清洗和培養(yǎng)，終濃度一般為2.5μg/ml（在30μg/ml時會有細胞毒性）,。另外也可以選擇在培養(yǎng)基里加3ug/ml的制霉菌素或放線菌素D,。其它操作同；若為支原體或者黑膠蟲污染,，基本上都是重新弄細胞了,。對于黑膠蟲污染，我們會預防為主,?；旧系聡?/span>SERANA胎牛血清、GIBCO胎牛血清中不含黑膠蟲,，我們建議購買,！以上方法主要是針對貼壁生長A431 A431細胞 細胞株，在操作的過程中,，一定要小心操作動作,，輕柔緩慢，切忌大動作魯莽,。防止細胞脫落,。

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：張昕

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