15596-026 TRIzol一步法總RNA提取試劑
- 公司名稱 生物試劑銷售中心
- 品牌 Invitrogen
- 型號 15596-026
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2015/9/22 15:29:09
- 訪問次數(shù) 1314
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名稱:TRIzol一步法總RNA提取試劑
貨號:15596-026
英文名稱:TRIzol Reagent;TRIzol
保存條件:廠商要求的保存溫度 | ||
數(shù)量:現(xiàn)貨供應(yīng),請! | ||
品牌:invitrogen | ||
規(guī)格:100ML | ||
上海試劑銷售強(qiáng)勢供應(yīng)TRIzol一步法總RNA提取試劑,,100%保證*,,!是各大實(shí)驗(yàn)室的*,!訂購: TRIzol一步法總RNA提取試劑簡介 : TRIzol 是一種新型總 RNA 抽提試劑,,可以直接從細(xì)胞或組織中提取總 RNA 。其含有苯酚,、異硫氰酸胍等物質(zhì),,能迅速破碎細(xì)胞并抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶。 TRIzol 在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持 RNA 的完整性,,因此對純化 DNA 及標(biāo)準(zhǔn)化 RNA 的生產(chǎn)十分有用,。 TRIzol一步法總RNA提取試劑的成分 : TRIzol 的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細(xì)胞,,使細(xì)胞中的蛋白,,核酸物質(zhì)解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質(zhì),,但不能*抑制 RNA 酶活性,,因此 TRIzol 中還加入了 8 -羥基喹啉、異硫氰酸胍,、 β- 巰基乙醇等來抑制內(nèi)源和外源 RNase ( RNA 酶),。 ※ 0.1% 的 8 -羥基喹啉可以抑制 RNase ,與氯仿聯(lián)合使用可增強(qiáng)抑制作用,。 ※ 異硫氰酸胍屬于解偶劑,,是一類強(qiáng)力的蛋白質(zhì)變性劑,可溶解蛋白質(zhì)并使蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)消失,,導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)降解,,核蛋白迅速與核酸分離,。 ※ β- 巰基乙醇的主要作用是破壞 RNase 蛋白質(zhì)中的二硫鍵。 TRIzol一步法總RNA提取試劑的使用方法 : 用勻漿器將組織磨碎,,加入 TRIzol 處理組織,。 5 分鐘后加入氯仿,以每分鐘 12000 轉(zhuǎn)離心 5 分鐘,,樣品即分成水樣層,、中間層和有機(jī)層,。 ※ RNA 存在于水樣層中,,收集水樣層后可以通過異丙醇沉淀 RNA 來還原。 ※ 在除去水樣層后,,有機(jī)層中的 DNA 和蛋白質(zhì)也能相繼以沉淀的方式還原:乙醇能使中間層的 DNA 沉淀析出,,在有機(jī)層中加入異丙醇能沉淀出蛋白質(zhì)。 每 100ml TRIzol 可以抽提 100 個六孔板中的樣品或 100 個 50-80mg 的組織樣品,。無論樣品是人,、動物、植物還是細(xì)菌組織,,該方法對少量的組織 (50-100mg) 和細(xì)胞 ( 約五百萬個 ) 及大量的組織 (≥1g) 和細(xì)胞 ( 超過一千萬個 ) 均有較好的分離效果,。 每一百萬細(xì)胞用 TRIzol 抽提可得 5-15 微克 RNA ,每毫克組織用 TRIzol 抽提可得 1-10 微克 RNA (產(chǎn)量因細(xì)胞和組織不同而異),。 TRIzol 操作上的簡便性允許其同時(shí)處理多個樣品,,所有的操作可以在一小時(shí)內(nèi)完成。 TRIzol 抽提的總 RNA 能夠避免 DNA 和蛋白質(zhì)的污染,,故而能夠作 RNA 印跡分析,、斑點(diǎn)雜交、 poly(A)+ 選擇,、體外翻譯,、 RNA 酶保護(hù)分析和單分子克隆( PCR ),。 ※ 如果是用于 PCR ,,當(dāng)兩條引物位于單一外顯子內(nèi)時(shí),建議用級聯(lián)擴(kuò)大的 DNase I(Cat. No. 18068) 來處理抽提的總 RNA ,。 ※ TRIzol 試劑能促進(jìn)不同種屬,、不同分子量大小的多種 RNA 的析出。例如,,從大鼠肝臟抽提的 RNA 經(jīng)過瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,,可見許多介于 7kb 和 15kb 之間的不連續(xù)的高分子量條帶( mRNA 和 hnRNA 成分),兩條優(yōu)勢核糖體 RNA 條帶位于 ~5 kb (28S) 和 ~2 kb (18S) ,,低分子量 RNA 介于 0.1 和 0.3kb 之間 (tRNA, 5S) ,。當(dāng)抽提的 RNA 用 TE 稀釋時(shí),,其 A260/A280 比值 ≥1.8 。抽提小 RNA 時(shí)宜 -70 ℃ 沉淀,。 TRIzol 對人體有害,,使用時(shí)應(yīng)戴一次性手套,注意防止濺出,。 acterial Enhancement Reagent. Store at 2°C to 8°C. |