上海遠研生物歡迎您選購我公司的小鼠腫瘤排斥性抗原gp96(gp96)ELISA試劑盒，我們定以優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和完善的售后服務(wù)不負您的選擇,！如有更多需要可,！

小鼠腫瘤排斥性抗原gp96(gp96)ELISA試劑盒組成：

靈敏度：具體請查看說明書. 
產(chǎn)品用途: 科研ELISA檢測試劑盒.提供實驗代測服務(wù).

標本收集注意事項：

1） 在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。

2） 我們提倡新鮮標本盡早檢測,，對收集后及時進行檢測。

小鼠腫瘤排斥性抗原gp96(gp96)ELISA試劑盒的優(yōu)點：

一,、高效,、靈敏、特異的抗體,；

二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；

三,、吸附性能好,，空白值低，孔底透明度高的固相載體,；

四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型,；

五,、zui大限度的節(jié)省實驗經(jīng)費。

標本收集:

　　1. 收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,，無內(nèi)毒素試管,。

　　2. 血漿抗凝劑*使用EDTA,。避免使用溶血，高血脂標本,。

　　3. 標本應(yīng)清澈透明,，懸浮物應(yīng)離心去除。

　　4. 標本收集后若不及時檢測,，請按一次使用量分裝,，凍存于-20℃，-70℃電冰箱內(nèi),，避免反復(fù)凍融，3-6月內(nèi)檢測,。

　　5. 如果您的樣本中檢測物濃度高于標準品zui高值,，請根據(jù)實際情況，做適當倍數(shù)稀釋（建 議做預(yù)實驗,，以確定稀釋倍數(shù)）,。

　　注意事項:

　　1. 試劑盒使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標準品應(yīng)分裝后,，將其放在-20～-70℃貯存,。

　　2. 濃縮生物素化抗體，濃縮酶結(jié)合物體積小,，運輸中顛簸和可能的倒置,，會使液體沾到管壁 或瓶蓋。因此使用前請用手甩幾下或1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。取用前，請用移液器小心吹打4-5次使溶液混勻,。

　　3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后 再配制洗滌液,。（加熱溫度不要超過50℃）使用時洗滌液應(yīng)為室溫,。

　　4. 若需要分次使用標準品應(yīng)按照每一次用量分裝，將其放在-20～-70℃貯存,。避免反復(fù)凍 融,。

　　5. 不同批號的試劑盒組份不能混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。

　　6. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,，使用微量振蕩器（使用zui低頻率）,，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)前手工輕輕敲擊酶標板框混勻,。

　　7. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測,。

　　8. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,，嚴禁在不同的液體之間混用！否則將影響試 驗結(jié)果,。

　　9. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作,。特別是檢測血液或者其他體液標本時， 請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行,。

　　檢測前準備工作:

　　1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,，以平衡至室溫。

　　2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋（1:20）,。未用完的放回4℃,。

　　3. 標準品: 加入標準品/標本稀釋液0.5ml至凍干標準品中，靜置15分鐘,，待其充分溶解后,，輕輕混勻（濃度為1000 pg/ml）。然后根據(jù)需要進行稀釋,。（建議標準曲線使用以下濃度： 1000,、500、250,、125,、62.5、31.25,、15.6,、0 pg/ml）。復(fù)溶標準品原液（1000 pg/ml）若未用完請分裝后放入-20℃以下電冰箱內(nèi)保存,，保存兩個月,。已稀釋的標準品請廢棄。

　　4. 生物素化抗體工作液：按當次試驗所需要得用量,，使用前20分鐘,，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體（1:30）成工作濃度。當日使用,。若實驗次數(shù)過多導(dǎo)致生物素化 抗體量不足,，可向我們公司單獨購買生物素化抗體。（須提供抗體批號）

　　5. 酶結(jié)合物工作液：按當次試驗所需要得用量,，使用前20分鐘,，以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃 縮酶結(jié)合物（1:30） 成工作濃度。當日使用,。若實驗次數(shù)過多導(dǎo)致濃縮酶結(jié)合物量不足,， 可向我們公司單獨購買濃縮酶結(jié)合物。（須提供酶結(jié)合物批號）

　　洗滌方法:

　　1. 自動洗板機：要求注入的洗滌液為350ul,，注入與吸出間隔15－30秒,。洗板5次,。

　　2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干,，每孔加洗滌液350ul,，靜置30秒后甩盡液體，在厚迭吸水紙上拍干,。洗板5次,。

　　操作步驟:

　　1．從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗所需板條，未用的板條和干燥劑請放回鋁箔袋內(nèi)壓 實自封條,，密封口袋,，放回4℃。

　　2．空白孔加標準品和標本稀釋液,，其余相應(yīng)孔中加標本或不同濃度標準品（100ul/孔）,，用封板膠紙封住反應(yīng)孔，36℃孵箱孵育90分鐘,。

　　3．提前20分鐘準備生物素化抗體工作液。

　　4．洗板5次,。

　　5．空白孔加生物素化抗體稀釋液,，其余孔加入生物素化抗體工作液（100ul/孔）。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔,，36℃孵箱孵育60分鐘,。

　　6．提前20分鐘準備酶結(jié)合物工作液。避光室溫（22-25 ） ℃ 放置,。

　　7．洗板5次,。

　　8．空白孔加酶結(jié)合物稀釋液，其余孔加入酶結(jié)合物工作液（100ul/孔）,。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔,，36℃孵箱，避光孵育30分鐘,。

　　9．打開酶標儀電源,，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測程序,。

　　10．洗板5次,。

　　11．加入顯色底物（TMB）100ul/孔，避光36℃孵箱,，避光孵育15分鐘,。

　　12．加入終止液100ul/孔, 混勻后即刻測量OD450值（3分鐘內(nèi)）。在儀器保存讀數(shù)結(jié)果并打印一份紙質(zhì)結(jié)果,。

　　13．實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回電冰箱保存至有效期結(jié)束,。

　　建議保存酶標板框,，以備下次或者今后試驗使用。

　　結(jié)果判斷:

　　1. 每個標準品和標本的OD值應(yīng)減去空白孔的OD值,。

　　2. 手工繪制標準曲線,。以標準品濃度作橫坐標，OD值作縱坐標,，以平滑線連接各標準品的坐標點,。通過標本的OD值可在標準曲線上查出其濃度。

3. 若標本OD值高于標準曲線上限,，應(yīng)適當稀釋后重測,，計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

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