用于生物科學(xué)研究領(lǐng)域的新型倒置顯微鏡系列

        TIRF、共聚焦,、FRET、光活化和顯微注射技術(shù)幫助科學(xué)家們克服了許多活細(xì)胞成像中的困難,。所有技術(shù)的核心就是Ti,，擁有這款強(qiáng)有力的新型倒置顯微鏡，您可以在尼康CFI60®光學(xué)系統(tǒng)的幫助下輕松使用上述技術(shù),。Ti系列共有三種型號,，改進(jìn)的系統(tǒng)速度，提升的靈活性和高效多模式特點(diǎn)使Ti成為用于研究和活細(xì)胞成像的理想系統(tǒng),。

 | 自動焦點(diǎn)校正系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定時間序列成像

Ti-E具備尼康*的*對焦系統(tǒng)（PFS,，Perfect Focus System），此系統(tǒng)具備在長時間時間序列成像過程中實(shí)時自動校正焦點(diǎn)漂移的功能,。無論是由于溫度變化還是外部機(jī)械震動而引起的焦點(diǎn)漂移都可*校正,。此系統(tǒng)同時具備自動確認(rèn)焦點(diǎn)的實(shí)用功能。

PFS原理示意

下圖中為使用油鏡時的原理示意圖,。此系統(tǒng)通過紅外激光確定玻片與液體的交界面,，以此為參照進(jìn)行焦點(diǎn)校正。并通過Offset透鏡調(diào)整焦點(diǎn)與參照面間的距離差距,。（此系統(tǒng)亦可用于干式物鏡,，并可兼容玻璃與塑料培養(yǎng)裝置）

更多信息請參考“第三代*對焦系統(tǒng)”,。

 | 高速電動控制與拍攝                                    

       同步高速控制若干電動部件，諸如物鏡轉(zhuǎn)換器,、熒光濾色塊,、光閘、聚光器轉(zhuǎn)換器和載物臺,，研究者可以進(jìn)行多維電動實(shí)驗(yàn),。更快的附件運(yùn)動和圖像獲取縮短整體的曝光時間，減少相應(yīng)的光毒性,，幫助研究者得到更有意義的數(shù)據(jù),。使用者可以專注于觀察和圖像獲取。新研發(fā)的控制器可以記錄和復(fù)制觀察條件,，實(shí)現(xiàn)用鼠標(biāo)控制載物臺,，整臺顯微鏡就像研究者眼睛和手的延伸部分。

HeLa細(xì)胞瞬時表達(dá)Venus-tubulin與mCherry-actin并使用Hoechst33342與DiD標(biāo)記,，多點(diǎn)快速拍照（圖像為偽色）,。

Photos courtesy of: Kenta Saito and Takeharu Nagai, Research Institute for Electronic Science, Hokkaido University

 | 可使用高數(shù)值孔徑物鏡的高質(zhì)量相差   

       尼康世界的光學(xué)設(shè)計(jì)者開發(fā)了*的外部相差單元。使用這一革新系統(tǒng),，將相差環(huán)整合至顯微鏡主體而不是物鏡里,，使用者不必使用相差物鏡來觀察相差圖像，并可以通過高數(shù)值孔徑物鏡來得到高質(zhì)量圖像,。另外使用不帶相差環(huán)的物鏡可以得到“全亮度”的熒光圖像,。

置于顯微鏡主體內(nèi)的相差環(huán)

       將原本置于相差物鏡中的相差環(huán)置于顯微鏡的主體的外部相差單元的光路設(shè)計(jì)，便于使用者使用高數(shù)值孔徑物鏡得到高分辨率的相差圖像,。根據(jù)所使用的物鏡,，有四種類型的相差環(huán)可供選擇（Ti-E/U/S通用）。

超高分辨率相差圖像

       使用尼康的高性能物鏡,，包括60x和100xTIRF物鏡,，具有世界zui高1.49的數(shù)值孔徑，并且整合球差校正環(huán),，可以得到其它標(biāo)準(zhǔn)相差物鏡*的高分辨率相差圖像,。

相差                                          落射熒光                                  TIRF

NG108細(xì)胞：生長錐標(biāo)記EGFP-fascin。
Photos courtesy of: Satoe Ebihara, Kaoru Katoh,  The National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (AIST）

       使用同款物鏡得到的“全亮度”熒光圖像由于沒有相差環(huán)導(dǎo)致的光線損失,，在同一系統(tǒng)中,，不僅可以進(jìn)行相差觀察，還可以得到更明亮的“全亮度”熒光圖像,、共聚焦圖像和TIRF圖像,。

C. elegans: Touch neurons stained with EGFP

Photos courtesy of: Motomichi Doi and Kaoru Katoh,  The National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (AIST)

用水浸物鏡來觀察相差圖像

        通過外部相差單元，即使使用水浸物鏡也可以得到清晰、高分辨率的相差圖像,。

用于圖像分析的高分辨率圖像

        由于相差圖像與TIRF觀察,、DIC觀察可以使用同樣的物鏡，得到的圖像可用于高精確性數(shù)據(jù)處理和圖像分析,，例如TIRF圖像的細(xì)胞輪廓定義,。 

 | 多層擴(kuò)展設(shè)計(jì)多端口支持                          

        具有左端口、右端口和底*端口的多圖像端口設(shè)計(jì)可以在每個端口連接一個相機(jī),。另外分層結(jié)構(gòu)的擴(kuò)展空間設(shè)計(jì)可以加入一個后端口,，這些特點(diǎn)方便用戶使用雙層熒光濾色塊盒和多相機(jī)進(jìn)行圖像獲取。 * Ti-E/B和Ti-U/B組合可選底端口,。

后端口確保多相機(jī)拍攝

        使用可選的后端口設(shè)計(jì)擴(kuò)展了圖像獲取能力,。與側(cè)端口結(jié)合使用可以用兩個相機(jī)獲取雙通道圖像。例如當(dāng)FRET (福斯特共振能量轉(zhuǎn)移)的熒光蛋白之間有觀察間隔,、CFP和YFP的強(qiáng)度差別很大時,，可以通過調(diào)節(jié)單個相機(jī)的靈敏度來得到高信噪比圖像進(jìn)行比較。

 分層結(jié)構(gòu)提高可擴(kuò)展性

        Ti采用的分層結(jié)構(gòu)充分利用了無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)的優(yōu)勢,，另外將PFS整合到物鏡轉(zhuǎn)換器,。可以通過墊高塊在光路中引入PFS之外的兩個可選部件,，利用該系統(tǒng)可以同時使用激光鑷,、光活化單元和落射熒光裝置。每層的電動熒光濾色塊盒可以單獨(dú)控制,。 

 | 精準(zhǔn)與快速的電動控制                           

非凡的快速圖像獲取

         對96孔板進(jìn)行三通道（雙通道熒光和相差）快速拍攝,，速度提高2倍以上。

數(shù)字控制集線器顯著提升了電動附件的速度

        尼康研發(fā)的數(shù)字控制集線器通過減少部件之間的通訊時間,，提高各附件的速度,，進(jìn)而顯著提高整體的操作速度。 PC控制對Ti的電動部件進(jìn)行優(yōu)化,，縮短從動作命令到移動之間的反應(yīng)時間，從而對整體施行高速控制,。 通過增加智能固件,，電動部件的整體操作時間顯著縮短，例如三通道（雙通道熒光和相差）連續(xù)圖像獲取需要的總時間大大縮短,，減少了對細(xì)胞的光毒性,。

高速電動控制與圖像獲取

        同步控制若干電動部件，諸如物鏡轉(zhuǎn)換器,、熒光濾色塊,、光閘、聚光器轉(zhuǎn)換器和載物臺,，研究者可以進(jìn)行多維電動實(shí)驗(yàn),。更快的附件運(yùn)動和圖像獲取縮短整體的曝光時間,，減少相應(yīng)的光毒性，幫助研究者得到更有意義的數(shù)據(jù),。

提升每個電動部件的速度

       操作和/或轉(zhuǎn)換物鏡,、濾光塊、XY載物臺,、激發(fā)/阻擋濾光片的速度大幅增加,，研究者可以專注于觀察和圖像獲取。新研發(fā)的控制器可以記錄和復(fù)制觀察條件,，實(shí)現(xiàn)用鼠標(biāo)控制載物臺,，整臺顯微鏡就像研究者眼睛和手的延伸部分。

 | 各種光學(xué)技術(shù)的*圖像                        

       尼康優(yōu)化的光學(xué)技術(shù)提供多種模式觀察標(biāo)本,，向研究者呈現(xiàn)細(xì)胞的每一個細(xì)節(jié),。

Nomarski 微分干涉（DIC） 

       高對比度和高分辨率的平衡對于觀察細(xì)微結(jié)構(gòu)至關(guān)重要。尼康*的DIC系統(tǒng)即使在低放大倍率下也可以得到高分辨率圖像,。新型DIC滑塊（干）提供高分辨率和高對比度兩種選擇,。濾光塊型DIC檢偏器可以置于電動濾光塊盒內(nèi)，將DIC觀察和熒光觀察的切換時間顯著縮短,。

相差

       相差圖像觀察時可以使用CFI Plan Fluor ADH 100x (Oil),。該物鏡與傳統(tǒng)相差物鏡相比減少了相差圖像的光暈，增強(qiáng)了圖像的對比度,。

暗場

       使用高NA的聚光鏡可以進(jìn)行暗場觀察,。可以對微粒子進(jìn)行長時間的觀察,，并避免光漂白,。

霍夫曼調(diào)制相差（HMC）®  

      HMC物鏡與HMC聚光鏡部件組合可以得到類似3D的高對比度、無光暈圖像,，可以應(yīng)用于培養(yǎng)在塑料培養(yǎng)皿中的透明樣本,。

 | 為Ti系列研發(fā)的新型物鏡                        

CFI S Plan Fluor ELWD/ELWD相差物鏡

       新研發(fā)的物鏡對近紫外（Ca2+）到近紅外波長范圍內(nèi)的光都有高通透性，并且改進(jìn)了色差校正,。在多種照明模式下都可以得到高質(zhì)量無色差的圖像,。

Plan Apochromat 20x物鏡

      新型20x物鏡加入尼康專有的VC物鏡系列，該物鏡的軸向色差校正至405nm,，是用于共聚焦觀察和光活化技術(shù)的理想物鏡,。

 | 人體工學(xué)設(shè)計(jì)                                             

         用于電動操作的所有按鍵和控制轉(zhuǎn)換器設(shè)計(jì)都非常人性化，研究者可以不受到顯微鏡操作的影響,，專注于研究,。

操作按鍵位于顯微鏡主體的兩側(cè)和前面

        熒光濾色塊的切換、物鏡轉(zhuǎn)換、Z軸粗/微調(diào),、PFS開/關(guān)控制,、透射照明開/關(guān)控制都可以通過位于顯微鏡主體的按鍵進(jìn)行快速切換。

新研發(fā)的人機(jī)學(xué)控制器

       通過手柄或人機(jī)學(xué)控制器可以控制高速電動XY載物臺和Z軸,。

顯微鏡主體前面的VFD屏幕和操作按鍵

    包括物鏡信息在內(nèi)的顯微鏡狀態(tài)和PFS的開/關(guān)狀態(tài)都會顯示在VFD屏上,。 

遠(yuǎn)程控制面板和預(yù)設(shè)按鍵

       通過遠(yuǎn)程控制面板可以操作顯微鏡，并確認(rèn)顯微鏡目前的狀態(tài),。另外可以通過預(yù)設(shè)按鍵來自動切換觀察條件,。只需單單一個按鍵就可以完成從相差到熒光觀察的切換。

原創(chuàng)傾斜式設(shè)計(jì)

        將顯微鏡主體的前部稍稍向后傾斜,，操作者眼點(diǎn)與標(biāo)本之間的距離縮短了約40mm,，增強(qiáng)了可操作性。

 | 三種機(jī)型給類應(yīng)用                                   

| Ti-E

旗艦型號具備全電動與自動多模式成像技術(shù)（可選底部端口型號）,。

| Ti-U

通用型型號可配置激光照明器與多種電動部件（可選底部端口型號）,。

| Ti-S

基本型號可用于特定類型應(yīng)用。