大鼠胰腺星狀細(xì)胞
| 參考價(jià) | ￥7750.00 |
- 公司名稱 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
- 品牌其他品牌
- 型號(hào)
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間2025/4/9 10:53:01
- 訪問(wèn)次數(shù) 556
| 5×10^5 | 7750.00元 | 15 瓶可售 |
聯(lián)系方式：吳18201748966 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,，謝謝!
ELISA試劑盒,，ELISA kit,ELISA檢測(cè)試劑盒,，酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，ELISA試劑,，檢測(cè)試劑盒，試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X1609 | 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
| 組織來(lái)源 | 胰腺組織 | 種屬來(lái)源 | 大鼠 |
| 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
一,、細(xì)胞基本屬性：
細(xì)胞名稱 | 大鼠胰腺星狀細(xì)胞 | 商品貨號(hào) | A01X1609 |
組織來(lái)源 | 胰腺組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
種屬來(lái)源 | 大鼠 | 傳代特性 | 可傳2-3代 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介 |
大鼠胰腺星狀細(xì)胞分離自胰腺組織,；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,，腺泡分泌胰液,，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有酸氫鈉,、胰蛋bai酶原,、脂肪酶、淀粉等,。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸,，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用,。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞、β細(xì)胞,、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞,。α細(xì)胞分泌胰高血糖素，升高血糖,；β細(xì)胞分泌胰島素,，降低血糖；γ細(xì)胞分泌生長(zhǎng)抑,，以旁分泌的方式抑制α,、β細(xì)胞的分泌；PP細(xì)胞分泌胰多肽,，抑制胃腸運(yùn)動(dòng),、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,，活化的胰腺星狀細(xì)胞(PSC)是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細(xì)胞,，PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提,。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴，并表達(dá)Desmin蛋白,，活化后的PSC則表達(dá)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alpha-SMA),。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種，并分別具有特異的標(biāo)志物,。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的維生素A脂滴可以被油紅O染成紅色,，陽(yáng)性表達(dá)Desmin。激活狀態(tài)PSC陽(yáng)性表達(dá)alpha-SMA,。油紅O染色發(fā)現(xiàn),，原代分離的細(xì)胞培養(yǎng)6d，胞漿中仍可見(jiàn)明顯的脂滴,，傳代后,，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示,，細(xì)胞接種24h仍然表達(dá)Desmin,，48h后Desmin基本不再表達(dá)。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細(xì)胞開(kāi)始表達(dá)alpha-SMA,，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增長(zhǎng)和傳代次數(shù)的增加,，細(xì)胞表達(dá)alpha-SMA，而不再表達(dá)Desmin,，說(shuō)明細(xì)胞活化,。提示PSC接種24h后即啟動(dòng)了激活過(guò)程，至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細(xì)胞激活,，傳代后細(xì)胞處于高度激活狀態(tài),。原代胰腺星狀細(xì)胞可作為慢性胰腺炎新藥的細(xì)胞篩選模型，目前研究發(fā)現(xiàn)：胰腺受損時(shí),，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細(xì)胞活化,，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)、功能發(fā)生變化,，促使基質(zhì)增生,、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。 |
包被條件：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
傳代比例：
消化液：0.25%胰蛋bai酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：
一,、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。
二、在超凈工作臺(tái)中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦,。
三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。
四,、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質(zhì),。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小,，放入50ml的離心管中,，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶,，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI),，混勻后37℃水浴消化1-1.5h,。
六、室溫1 000×g離心8min,，去上清液,。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻,，1 000×g，20min,，4℃離心,，去上清。
八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶,，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮,，混勻,，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min,，去上清液,。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g,，60min,，4℃)，1000×g,，4℃離心10min,。
十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,，吸出后DMEM
漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min，室溫),，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml嘌呤霉素 )重懸浮,，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含嘌呤霉素的混合培養(yǎng)基,，隨后隔天換液,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
負(fù)鼠腎細(xì)胞OK（種屬鑒定）
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞CTLA4 Ig-24（種屬鑒定）
小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤M5076（種屬鑒定）
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H647(STR鑒定正確)
小鼠胚胎瘤細(xì)胞ATDC5（種屬鑒定）
人宮頸癌細(xì)胞C33A(STR鑒定正確)
大鼠正常肝細(xì)胞BRL3A（種屬鑒定）
小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞MOVAS（種屬鑒定）
人肝癌細(xì)胞QGY-7701 (STR鑒定正確)
人晶體上皮細(xì)胞SRA01/04(STR鑒定正確)
人張氏肝細(xì)胞Changliver(STR鑒定正確)
人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞帶熒光素酶MM.1S+LUC(STR鑒定正確)
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H23(STR鑒定正確)
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SK-N-SH(STR鑒定正確)
豬內(nèi)皮細(xì)胞PED(種屬鑒定)
Ensifer saheli薩赫勒劍菌
Stenotrophomonas maltophilia嗜麥芽糖寡養(yǎng)單胞菌
Enterobacter aerogenes產(chǎn)氣腸桿菌
Enterobacter cloacae陰溝腸桿菌
Salinicoccus roseus玫瑰色鹽水球菌
Salinicoccus hispanicus西班牙鹽水球菌
Brevibacillus laterosporus側(cè)孢短芽孢桿菌
Achromobacter denitrificans反硝化無(wú)色桿菌
Lactobacillus animalis動(dòng)物乳桿菌
Natrinema altunense阿爾通山堿線菌
大鼠胰腺星狀細(xì)胞Natrialba aegyptiaca埃及無(wú)色需堿菌
Haloterrigena thermotolerans耐熱鹽土生古菌
Halobiforma lacisalsi鹽湖鹽二形菌
Halorubrum xinjiangense新疆鹽紅菌
Halorubrum aidingense艾丁湖鹽紅菌
原代細(xì)胞使用方法：
是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈成纖維細(xì)胞樣,，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),。
客戶收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min,，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。
5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí),，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn),；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被,。
采購(gòu)中心
化工儀器網(wǎng)