種內(nèi)有:鐵細菌/腐生菌/硫酸鹽還原菌/大腸菌群/石油烴降解菌/細菌測試瓶
鐵細菌/腐生菌/硫酸鹽還原菌/細菌測試瓶方法原理:
采用絕跡稀釋法,即用無菌注射器將待測定的水樣逐級注入到測試瓶中,,進行接種稀釋后,,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng),,依據(jù)測試瓶陽性反應和稀釋的倍數(shù),,計算出水樣中細菌量總數(shù),。
操作步驟:
① 將同一品種測試瓶排成一組,,依次編上序號(按照估計的細菌量確定測試瓶個數(shù),,建議參考數(shù)值為:X×100的細菌量用3個測試瓶、X×101的細菌量用4個測試瓶,、X×102的細菌量用5個測試瓶,、X×103的細菌量用6個測試瓶)。
做二個平行樣重復試驗時應排為二組,;做三個平行樣重復試驗時應排為三組,。
② 用無菌注射器取1ml代表性水樣(采樣方法依據(jù)GB/T12997-1991、GB/T12998-1991,、GB/T14581-1993的規(guī)定進行)注入1號瓶內(nèi)稀釋,,充分振搖,待用(平行樣亦按此操作,,下同),; ③ 用另一支無菌注射器從1號瓶內(nèi)抽取1 ml經(jīng)充分振搖后的水樣注入2號瓶內(nèi)稀釋,充分振搖,,待用,;
④ 再用一支無菌注射器從2號瓶中內(nèi)抽取1ml經(jīng)充分振搖后的水樣注入3號瓶內(nèi)稀釋,,充分振搖,,待用,;
⑤ 依次類推稀釋直到后一瓶為止,待用,。
⑥ 將上述所有稀釋過的測試瓶放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),,按表1進行細菌生長的鑒別。
表1 細 菌 生 長 的 鑒 別 方 法
細菌瓶品種 | 規(guī)格型號 | 培養(yǎng)溫度 | 培養(yǎng) 時間 | 陽性反應特征 | |
細菌總數(shù)測試瓶 | KBC—BT | 37±2℃ | 24±2h | 瓶中液體由紅變黃,、或液體混濁,、或液體表面出現(xiàn)菌膜、或液體底部出現(xiàn)沉淀,。 | |
大腸菌群測試瓶 | 總大腸菌 | KBC—TCB | 37±2℃ |
24±2h |
瓶中液體由紫紅變黃 |
糞大腸菌 | KBC—TCB | 44±2℃ | |||
腐生菌測試瓶 | KBC—TGB | 現(xiàn)場采樣溫度±3℃ | 24±2h | 瓶中液體由紅變黃 | |
鐵細菌測試瓶 | KBC—FEB | 7d | 瓶中液體棕色褪去,,生成棕色或黑色沉淀 | ||
硫酸鹽還原菌測試瓶 | KBC—SRB | 7d | 瓶中無色液體變黑或生成黑色沉淀 | ||
石油烴降解菌測試瓶 | KBC—HDB
| 29±2℃ | 5d | 瓶中液體由紫紅變黃 |
細菌量計量:
1.在一定溫度下培養(yǎng)一定時間后,按瓶號列出稀釋梯度,,并依據(jù)細菌瓶陽性反應的個數(shù),,確定生長指標和級數(shù)(參見附錄及示例).
2.根據(jù)生長指標查表2或表3,確定細菌量基數(shù)并乘以級數(shù),,即為細菌量總數(shù),。
細菌量總數(shù)=細菌量基數(shù)×級數(shù)
二組平行樣重復試驗查表2
三組平行樣重復試驗查表3
3、細菌量總數(shù)結(jié)果報告示例見表4
注意事項
1,、測試瓶中若有白色沉淀為過量營養(yǎng)成份,,屬正常現(xiàn)象,,不影響測試,。
2、低溫條件(約4℃)下,,測試瓶儲存有效期為一年,。
3、測試瓶每一級稀釋時,,一定要用力振搖1~2分鐘,,以保證測試結(jié)果的準確性。
鐵細菌/腐生菌/硫酸鹽還原菌/細菌測試瓶