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藥品質(zhì)量檢測方法:柱色譜法
2022年08月24日 15:24:14 來源:化工儀器網(wǎng) 作者:小王 點擊量:5191

柱色譜法是在一根玻璃管或金屬管中迸行的色譜技術(shù),,用來分離大多數(shù)有機化合物,尤其適合于復雜的天然產(chǎn)物的分離,。柱色譜法分離容量能從幾毫克到百毫克級,,所以,適用于分離和精制較大量的樣品,。而柱色譜法細分又可以分成吸附柱色譜和分配柱色譜兩種,。

  【化工儀器網(wǎng) 行業(yè)百態(tài)】柱色譜法是在一根玻璃管或金屬管中迸行的色譜技術(shù),用來分離大多數(shù)有機化合物,,尤其適合于復雜的天然產(chǎn)物的分離,。柱色譜法分離容量能從幾毫克到百毫克級,所以,適用于分離和精制較大量的樣品,。而柱色譜法細分又可以分成吸附柱色譜和分配柱色譜兩種,。
 
  吸附柱色譜的色譜柱為內(nèi)徑均勻、下端(帶或不帶活塞)縮口的硬質(zhì)玻璃管,,端口或活塞上部鋪墊適量棉花或玻璃纖維,,管內(nèi)裝入顆粒應盡可能大小均勻的吸附劑(顆粒直徑若沒有特殊規(guī)定,一般采用 0.07~0.15mm),。色譜柱的大小,,吸附劑的品種和用量,以及洗脫時的流速,,均按各品種項下的規(guī)定進行選擇,。
 
  在吸附柱色譜中,吸附劑是固定相,,洗脫劑是流動相,,基于各組分與吸附劑間存在的吸附強弱差異,通過使之在柱色譜上反復進行吸附,、解吸,、再吸附、再解吸的過程,,完成分離,。因此,吸附柱色譜吸附劑的填充是一個非常重要的環(huán)節(jié),。
 
  一般來說,,吸附劑的填裝分為干法和濕法兩種。干法是將吸附劑一次加入色譜柱,,振動管壁使其均勻下沉,,然后沿管壁緩緩加入洗脫劑。若色譜柱本身不帶活塞,,可在色譜柱下端出口處連接活塞,,加入適量的洗脫劑,旋開活塞使洗脫劑緩緩滴出,,然后自管頂緩緩加入吸附劑,,使其均勻地潤濕下沉,在管內(nèi)形成松緊適度的吸附層,。操作過程中應保持有充分的洗脫劑留在吸附層的上面,。
 
  濕法是先將吸附劑與洗脫劑混合,攪拌除去空氣泡后,,再徐徐傾入色譜柱中,然后加入洗脫劑將附著在管壁的吸附劑洗下,使色譜柱面平整,。俟填裝吸附劑所用洗脫劑從色譜柱自然流下,,至液面和柱表面相平時,即加供試品溶液,。
 
  加入供試品時也需要注意,,除另有規(guī)定外,應先將供試品溶于開始洗脫時使用的洗脫劑中,,再沿管壁緩緩加入,,并且不能使吸附劑翻起。也可將供試品溶于適當?shù)娜軇┲信c少量吸附劑混勻,,再使溶劑揮發(fā)去盡使呈松散狀,,加在已制備好的色譜柱上面。如供試品在常用溶劑中不溶,,可將供試品與適量的吸附劑在乳缽中研磨混勻后加入,。
 
  洗脫同樣不能馬虎。除另有規(guī)定外,,通常按洗脫劑洗脫能力大小遞增變換洗脫劑的品種和比例,,分部收集流出液,至流出液中所含成分顯著減少或不再含有時,,再改變洗脫劑的品種和比例,。操作過程中應保持有充分的洗脫劑留在吸附層的上面。
 
  分配柱色譜的操作方法與吸附柱色譜基本一致,。不顧偶需要注意的是,,裝柱前,應先將固定液溶于適當溶劑中,,加入適宜載體,,混合均勻,待溶劑完全揮干后分次移入色譜柱中并用帶有平面的玻棒壓緊,。供試品可溶于固定液,,混以少量載體,加在預制好的色譜柱上端,。洗脫劑需先加固定液混合使之飽和,,以避免洗脫過程中固定液的流失。
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