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如何正確的使用紙色譜法分析樣品
2022年08月23日 17:16:36
來源：化工儀器網(wǎng) 點擊量：7017
紙色譜法又稱紙層析法,，是用紙作為載體,，通過分裂系的在同一介質(zhì)中分散速度不同來分析樣品成分的色譜法,，具有微量,、快速,、高效和敏捷度高等特點。從原理上來說,，紙色譜涉及分配,、吸附和離子交換等機理，相對復(fù)雜,，但是分配機理起主要作用,，因此紙色譜法屬于分配色譜。
【化工儀器網(wǎng) 行業(yè)百態(tài)】紙色譜法又稱紙層析法,，是用紙作為載體,，通過分裂系的在同一介質(zhì)中分散速度不同來分析樣品成分的色譜法，具有微量,、快速,、高效和敏捷度高等特點。從原理上來說,，紙色譜涉及分配,、吸附和離子交換等機理，相對復(fù)雜,，但是分配機理起主要作用,，因此紙色譜法屬于分配色譜。
由于紙色譜法適用于多官能團或高極性的親水化合物如醇類,、羥基酸,、氨基酸、糖類和黃酮類等化合物的分離檢驗,，因此在巖礦分析與鑒定以及藥品檢測領(lǐng)域有較為廣泛的應(yīng)用,。
其中，用于藥品檢測時根據(jù)檢測內(nèi)容的不同,，采取的措施也不同,。具體來說，當采用紙色譜法進行藥品鑒別時,，供試品在色譜圖中所顯主斑點的位置與顏色(或熒光),，應(yīng)與對照標準物質(zhì)在色譜圖中所顯主斑點相同；進行藥品純度檢查時,，取一定量的供試品,，經(jīng)展開后，按各品種項下的規(guī)定,，檢視其所顯雜質(zhì)斑點的個數(shù)和呈色深度(或熒光強度),；進行藥品含量測定時，將待測色譜斑點剪下經(jīng)洗脫后,，再用適宜的方法測定,。
紙色譜法的準備工作
紙色譜法根據(jù)操作方法的不同又可以分為上行法與下行法,，不過用到的儀器和材料大同小異。
進行紙色譜分析前應(yīng)準備好展開容器(通常為圓形或長方形玻璃缸,，缸上具有磨口玻璃蓋,，應(yīng)能密閉)、點樣器,、色譜濾紙,。其中點樣器需要保證能使點樣位置正確、集中,，一般采用平口微量注射器或定量毛細管(無毛刺),；而色譜濾紙需做到質(zhì)地均勻平整，具有一定機械強度不含影響展開效果的雜質(zhì),，也不會與所用顯色劑起作用,，以免影響分離和鑒別效果，必要時可進行處理后再用,。
而在進行上行法時,，需要在展開容器蓋上的孔中加塞，塞中插入玻璃懸鉤,，以便將點樣后的色譜濾紙掛在鉤上,，并除去溶劑槽和支架，并且使用的色譜濾紙長控制在 25cm左右,，寬度則按需要而定，必要時可將色譜濾紙卷成筒形,，點樣基線距底邊約 2.5cm,。
進行下行法時，需要在支架架起展開容器,，并用玻棒壓住色譜濾紙,，同時，色譜紙按纖維長絲方向切成適當大小的紙條,，使色譜濾紙上端能足夠浸入溶劑槽內(nèi)的展開劑中,，并使點樣基線能在溶劑槽側(cè)的玻璃支持棒下數(shù)厘米處，必要時,，可在色譜濾紙下端切成鋸齒形便于展開劑向下移動,。
紙色譜法的操作方法
進行紙色譜法時，應(yīng)先將供試品溶解于適宜的溶劑中制成一定濃度的溶液,，然后用微量注射器或定量毛細管吸取溶液,，點于點樣基線上，一次點樣量不超過 10µl,。
如果采用的是上行法,，則應(yīng)該在展開容器中加入適量展開劑,，靜置至展開劑蒸氣飽和后，再下降懸鉤,，使色譜濾紙浸入展開劑約 1cm,，展開劑即經(jīng)毛細作用沿色譜濾紙上升，除另有規(guī)定外,，一般展開至約 15cm 后,，取出晾干，按規(guī)定方法檢視,。展開可以單向展開,，即向一個方向進行；也可進行雙向展開,，即先向一個方向展開,、取出，待展開劑完全揮發(fā)后,，將濾紙轉(zhuǎn)動 90°,，再用原展開劑或另一種展開劑進行展開。亦可多次展開和連續(xù)展開等,。
如果采用下行法,，則應(yīng)該將點樣后的色譜濾紙的點樣端放在溶劑槽內(nèi)并用玻棒壓住，使色譜濾紙通過槽側(cè)玻璃支持棒自然下垂,，點樣基線在壓紙棒下數(shù)厘米處,。展開前，展開缸內(nèi)用各品種項下規(guī)定的溶劑的蒸氣使之飽和,，一般可在展開缸底部放一裝有規(guī)定溶劑的平皿,，或?qū)⒈灰?guī)定溶劑潤濕的濾紙條附著在展開缸內(nèi)壁上，放置一定時間,，待溶劑揮發(fā)使缸內(nèi)充滿飽和蒸氣,。然后小心添加展開劑至溶劑槽內(nèi)，使色譜濾紙的上端浸沒在槽內(nèi)的展開劑中,。展開劑即經(jīng)毛細作用沿色譜濾紙移動進行展開,，展開過程中避免色譜濾紙受強光照射，展開至規(guī)定的距離后,，取出色譜濾紙,，標明展開劑前沿位置，待展開劑揮散后,，按規(guī)定方法檢測色譜斑點,。
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