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如何正確的使用紙色譜法分析樣品
2022年08月23日 17:16:36 來(lái)源:化工儀器網(wǎng) 點(diǎn)擊量:6857

紙色譜法又稱(chēng)紙層析法,,是用紙作為載體,通過(guò)分裂系的在同一介質(zhì)中分散速度不同來(lái)分析樣品成分的色譜法,,具有微量,、快速、高效和敏捷度高等特點(diǎn),。從原理上來(lái)說(shuō),,紙色譜涉及分配、吸附和離子交換等機(jī)理,,相對(duì)復(fù)雜,,但是分配機(jī)理起主要作用,,因此紙色譜法屬于分配色譜,。

  【化工儀器網(wǎng) 行業(yè)百態(tài)】紙色譜法又稱(chēng)紙層析法,是用紙作為載體,,通過(guò)分裂系的在同一介質(zhì)中分散速度不同來(lái)分析樣品成分的色譜法,,具有微量、快速,、高效和敏捷度高等特點(diǎn),。從原理上來(lái)說(shuō),紙色譜涉及分配,、吸附和離子交換等機(jī)理,,相對(duì)復(fù)雜,但是分配機(jī)理起主要作用,,因此紙色譜法屬于分配色譜,。
 
  由于紙色譜法適用于多官能團(tuán)或高極性的親水化合物如醇類(lèi)、羥基酸,、氨基酸,、糖類(lèi)和黃酮類(lèi)等化合物的分離檢驗(yàn),因此在巖礦分析與鑒定以及藥品檢測(cè)領(lǐng)域有較為廣泛的應(yīng)用,。
 
  其中,,用于藥品檢測(cè)時(shí)根據(jù)檢測(cè)內(nèi)容的不同,采取的措施也不同,。具體來(lái)說(shuō),,當(dāng)采用紙色譜法進(jìn)行藥品鑒別時(shí),供試品在色譜圖中所顯主斑點(diǎn)的位置與顏色(或熒光),,應(yīng)與對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在色譜圖中所顯主斑點(diǎn)相同,;進(jìn)行藥品純度檢查時(shí),取一定量的供試品,經(jīng)展開(kāi)后,,按各品種項(xiàng)下的規(guī)定,,檢視其所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)的個(gè)數(shù)和呈色深度(或熒光強(qiáng)度);進(jìn)行藥品含量測(cè)定時(shí),,將待測(cè)色譜斑點(diǎn)剪下經(jīng)洗脫后,,再用適宜的方法測(cè)定。
 
  紙色譜法的準(zhǔn)備工作
 
  紙色譜法根據(jù)操作方法的不同又可以分為上行法與下行法,,不過(guò)用到的儀器和材料大同小異,。
 
  進(jìn)行紙色譜分析前應(yīng)準(zhǔn)備好展開(kāi)容器(通常為圓形或長(zhǎng)方形玻璃缸,缸上具有磨口玻璃蓋,,應(yīng)能密閉),、點(diǎn)樣器、色譜濾紙,。其中點(diǎn)樣器需要保證能使點(diǎn)樣位置正確,、集中,一般采用平口微量注射器或定量毛細(xì)管(無(wú)毛刺),;而色譜濾紙需做到質(zhì)地均勻平整,,具有一定機(jī)械強(qiáng)度不含影響展開(kāi)效果的雜質(zhì),也不會(huì)與所用顯色劑起作用,,以免影響分離和鑒別效果,,必要時(shí)可進(jìn)行處理后再用。
 
  而在進(jìn)行上行法時(shí),,需要在展開(kāi)容器蓋上的孔中加塞,,塞中插入玻璃懸鉤,以便將點(diǎn)樣后的色譜濾紙掛在鉤上,,并除去溶劑槽和支架,,并且使用的色譜濾紙長(zhǎng)控制在 25cm左右,寬度則按需要而定,,必要時(shí)可將色譜濾紙卷成筒形,,點(diǎn)樣基線(xiàn)距底邊約 2.5cm。
 
  進(jìn)行下行法時(shí),,需要在支架架起展開(kāi)容器,,并用玻棒壓住色譜濾紙,同時(shí),,色譜紙按纖維長(zhǎng)絲方向切成適當(dāng)大小的紙條,,使色譜濾紙上端能足夠浸入溶劑槽內(nèi)的展開(kāi)劑中,并使點(diǎn)樣基線(xiàn)能在溶劑槽側(cè)的玻璃支持棒下數(shù)厘米處,,必要時(shí),,可在色譜濾紙下端切成鋸齒形便于展開(kāi)劑向下移動(dòng)。
 
  紙色譜法的操作方法
 
  進(jìn)行紙色譜法時(shí),應(yīng)先將供試品溶解于適宜的溶劑中制成一定濃度的溶液,,然后用微量注射器或定量毛細(xì)管吸取溶液,,點(diǎn)于點(diǎn)樣基線(xiàn)上,一次點(diǎn)樣量不超過(guò) 10µl,。
 
  如果采用的是上行法,,則應(yīng)該在展開(kāi)容器中加入適量展開(kāi)劑,靜置至展開(kāi)劑蒸氣飽和后,,再下降懸鉤,,使色譜濾紙浸入展開(kāi)劑約 1cm,展開(kāi)劑即經(jīng)毛細(xì)作用沿色譜濾紙上升,,除另有規(guī)定外,,一般展開(kāi)至約 15cm 后,取出晾干,,按規(guī)定方法檢視,。展開(kāi)可以單向展開(kāi),即向一個(gè)方向進(jìn)行,;也可進(jìn)行雙向展開(kāi),,即先向一個(gè)方向展開(kāi),、取出,,待展開(kāi)劑完全揮發(fā)后,將濾紙轉(zhuǎn)動(dòng) 90°,,再用原展開(kāi)劑或另一種展開(kāi)劑進(jìn)行展開(kāi),。亦可多次展開(kāi)和連續(xù)展開(kāi)等。
 
  如果采用下行法,,則應(yīng)該將點(diǎn)樣后的色譜濾紙的點(diǎn)樣端放在溶劑槽內(nèi)并用玻棒壓住,,使色譜濾紙通過(guò)槽側(cè)玻璃支持棒自然下垂,點(diǎn)樣基線(xiàn)在壓紙棒下數(shù)厘米處,。展開(kāi)前,,展開(kāi)缸內(nèi)用各品種項(xiàng)下規(guī)定的溶劑的蒸氣使之飽和,一般可在展開(kāi)缸底部放一裝有規(guī)定溶劑的平皿,,或?qū)⒈灰?guī)定溶劑潤(rùn)濕的濾紙條附著在展開(kāi)缸內(nèi)壁上,,放置一定時(shí)間,待溶劑揮發(fā)使缸內(nèi)充滿(mǎn)飽和蒸氣,。然后小心添加展開(kāi)劑至溶劑槽內(nèi),,使色譜濾紙的上端浸沒(méi)在槽內(nèi)的展開(kāi)劑中。展開(kāi)劑即經(jīng)毛細(xì)作用沿色譜濾紙移動(dòng)進(jìn)行展開(kāi),,展開(kāi)過(guò)程中避免色譜濾紙受強(qiáng)光照射,,展開(kāi)至規(guī)定的距離后,取出色譜濾紙,標(biāo)明展開(kāi)劑前沿位置,,待展開(kāi)劑揮散后,,按規(guī)定方法檢測(cè)色譜斑點(diǎn)。
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