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色譜柱常見問題(一)
2020年06月02日 14:17:09 來源:化工儀器網(wǎng) 點擊量:6202

色譜柱是色譜的重要配件,,了解色譜柱有助于我們更好的使用色譜儀,。

  【化工儀器網(wǎng) 技術(shù)指導(dǎo)色譜柱是色譜的重要配件,了解色譜柱有助于我們更好的使用色譜儀,。
 
  1、色譜柱的柱子是否可以反沖,?什么樣的柱子可以反沖,,什么不可以?反沖后是正著用,,還是反著用,?
 
  一般的正相反相柱應(yīng)該都能反沖,只有兩端篩板孔徑不對稱的柱子不能反沖,,不過目前這樣的柱子已經(jīng)比較少見,。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉,反沖后還是正著用比較好,,以免柱子的兩頭都被污染,。因此,我們提倡正向使用,,反向沖洗,。
 
  2、拿到一根新柱的時候應(yīng)該怎樣進行活化及維護,?為什么要這樣做,?
 
  新柱活化實際上是一個平衡的過程,除了用流動相平衡外,,有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡,,特別是測定分子量比較高的多肽時。平衡方式即多進幾次樣品,,直到峰面積和保留時間穩(wěn)定,,再進行正式進樣測定。如果要加快平衡時間,,把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大,,或者不等洗脫完成,連續(xù)進樣多針,。
 
  用待測物對新柱平衡,,目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和。
 
  3,、測定多肽,,一般采用什么柱子,?
 
  分子量不高的多肽一般選用常規(guī)C18柱就能測定。也可以用離子交換柱,、水性C18柱和Hilic親水作用柱,。
 
  4、氨基柱在進酸性樣品時,,使用一段時間后,,柱效降低,峰形改變,,如何恢復(fù),?
 
  氨基柱測酸性樣品,應(yīng)該是用氨基柱的HILIC模式,。使用后,,用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱,沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動相洗去多余氨,。
 
  5,、柱子在什么情況下可以清洗篩板呢?
 
  柱頭污染了,,就取出污染的,,再裝一些填料。
 
  5,、如果柱子取下來放置一段時間,,需要做什么保護嗎?
 
  對一般的反相柱,,需要在洗干凈后放到純甲醇(乙腈)或者是80%左右的甲醇(乙腈)水中,,然后用堵頭塞緊柱兩頭,以免保存溶劑揮發(fā),。不需要做特殊的保護,。
 
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