化工儀器網
資料下載
小鼠金屬硫蛋白酶聯免疫分析試劑盒實驗步驟
閱讀：180 發(fā)布時間：2018-6-21| 提 供 商 | 上海谷研實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 140.1KB |
|---|---|---|---|
| 資料圖片 | 下載次數 | 22次 | |
| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數 | 180次 |
| 免費下載 | 點擊下載 |
小鼠金屬硫蛋白酶聯免疫分析試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠金屬硫蛋白（MT）水平,。用純化的小鼠金屬硫蛋白（MT）抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入金屬硫蛋白（MT）,，再與 HRP標記的金屬硫蛋白（MT）抗體結合,，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經過*洗滌后加底物 TMB顯色,。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的金屬硫蛋白（MT）呈正相關,。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠金屬硫蛋白（MT）濃度,。
小鼠金屬硫蛋白酶聯免疫分析試劑盒操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）,、標準孔、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl（樣品zui終稀釋度為 5倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘,。
4.配液：將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置 30秒后棄去,，如此重復 5次,，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50μl,，空白孔除外,。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl,，再加入顯色劑 B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.測定：以空白空調零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。測定應在加終止液后 15分鐘以內進行。
小鼠金屬硫蛋白酶聯免疫分析試劑盒注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器,，并經常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內,，如標本數量多,，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔,。如標本中待測物質含量過高（樣本 OD值大于標準品孔*孔的 OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）,。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存,。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,，以英文說明書為準,。
小鼠金屬硫蛋白酶聯免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃,。
2．有效期：6個