采卵之前,，先往收集管中注入5mLPBS+肝素液(5mg/mL),，置恒溫槽中,，溫度37℃,，將長針與導(dǎo)管用PBS+肝素液沖洗2遍后準備采卵,。母牛站立保定,，操作人員對牛進行直腸檢查，并掏凈直腸內(nèi)的糞便,；清洗外陰,，并用0.1%新潔爾滅消毒外陰，然后將采卵針的探頭插入到陰道深部，到達陰道穹窿后,，根據(jù)所要穿刺的卵巢左側(cè)還是右側(cè)而把探頭放在穹窿的相應(yīng)一側(cè),。操作人員一手持探頭，另一手在直腸內(nèi)隔著直腸壁將卵巢牽引至貼在探頭端部,。

在進口牛用B超機監(jiān)視器上能清楚看到卵巢,，然后上下左右翻轉(zhuǎn)卵巢，根據(jù)圖像區(qū)分及確定卵泡數(shù)和黃體,，并把卵泡進行分級,，卵泡直徑2～5mm為小卵泡，5～10mm為中卵泡,，大于10mm的卵泡為大卵泡,，然后調(diào)整卵巢和探頭位置，使監(jiān)視器上卵泡位于穿刺引線上之后,，推進穿刺針,，對卵泡進行穿刺。同時用腳踏開關(guān)控制真空泵抽取卵泡液,，真空泵壓力在35～60mm汞柱之間調(diào)整,；從監(jiān)視器上可觀察到被抽取卵泡液的卵泡開始縮小，變得不規(guī)則,，直到卵泡液被*抽取,，卵泡在監(jiān)視器上消失，退出穿刺針,，再對第二個卵泡進行穿刺,，抽取卵泡液，直到該卵巢上2mm以上的卵泡均被穿刺后,，換另一側(cè)卵巢,，同法處理。

然后用PBS+肝素液沖洗采卵針及導(dǎo)管,，沖洗液也放入收集管,，將采得的卵泡液用胚胎收集濾杯過濾，卵母細胞在濾杯中,，用PBS液反復(fù)沖洗幾遍,，將濾杯中的卵母細胞倒入表面皿中，在體視鏡下進行觀察,、檢卵,。將檢出的符合要求的卵母細胞放進成熟液中，在5%CO2和39℃溫度的培養(yǎng)箱中進行成熟培養(yǎng),。