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ELISA的類型
　　ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體,。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑：
（1）固相的抗菌素原或抗體,，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）；（2）酶標(biāo)記的抗原
或抗體,，稱為"結(jié)合物"（conjugate）,；（3）酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的情
況以及檢測(cè)的具體條件,，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法,。用于臨床檢驗(yàn)的ELISA主要
有以下幾種類型：
2.2.1　雙抗體夾心法測(cè)抗原

　　雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原zui常用的方法，操作步驟如下：
1） 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),，形成固相抗體,。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
2） 加受檢標(biāo)本,，保溫反應(yīng),。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物,。
　　洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì),。
3） 加酶標(biāo)抗體,，保溫反應(yīng),。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合,。*洗滌未結(jié)合
　　的酶標(biāo)抗體,。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
4） 加底物顯色,。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物,。通過(guò)比色,，測(cè)知標(biāo)本中抗原的量,。
　　在臨床檢驗(yàn)中,，此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原，例如HBsAg,、HBeAg,、
AFP、hCG等,。只要獲得針對(duì)受檢抗原的異性抗體,，就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合
物而建立此法。如抗體的來(lái)源為抗血清,，包被和酶標(biāo)用的抗體分別取自不同種屬的動(dòng)
物,。如應(yīng)用單克隆抗體，一般選擇兩個(gè)針對(duì)抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相
載體和制備酶結(jié)合物,。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性,，而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)
抗體一起保溫反應(yīng),，作一步檢測(cè),。
　　在一步法測(cè)定中，當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時(shí),，過(guò)量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)
抗體結(jié)合,，而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過(guò)剩的后帶現(xiàn)象,，此時(shí)反應(yīng)
后顯色的吸光值（位于抗原過(guò)剩帶上）與標(biāo)準(zhǔn)曲線（位于抗體過(guò)剩帶上）某一抗原濃度的
吸光值相同（參見(jiàn)1.3.2,，圖1-4），如按常法測(cè)讀,，所得結(jié)果將低于實(shí)際的含量,，這種現(xiàn)
象被稱為鉤狀效應(yīng)（hook effect），因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落,。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重
時(shí),，反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測(cè)定標(biāo)本中含量可異常
增高的物質(zhì)（例如血清中HBsAg,、AFP和尿液hCG等）時(shí),，應(yīng)注意可測(cè)范圍的zui高值。用
高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng),。
　　假使在被測(cè)分子的不同位點(diǎn)上含有多個(gè)相同的決定簇,，例如HBsAg的a決定簇，也可
用針對(duì)此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物,。但在HBsAg的檢測(cè)中應(yīng)注意亞型
問(wèn)題,，HBsAg有adr、adw,、ayr,、ayw4個(gè)亞型，雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應(yīng)
性,，這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問(wèn)題,。
　　雙抗體夾心法測(cè)抗原的另一注意點(diǎn)是類風(fēng)濕因子（RF）的干擾。RF是一種自身抗
體,，多為IgM型,，能和多種動(dòng)物IgG的Fc段結(jié)合。用作雙抗體夾心法檢測(cè)的血清標(biāo)本中如含
有RF,，它可充當(dāng)抗原成份,，同時(shí)與固相抗體和酶標(biāo)抗體結(jié)合，表現(xiàn)出假陽(yáng)性反應(yīng)。采用
F（ab'）或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑,，由于去除了Fc段,，從而消除RF的干擾。雙抗體
夾心法ELISA試劑是否受RF的影響,，已被列為這類試劑的一項(xiàng)考核指標(biāo)（參見(jiàn)6.2）,。
　　雙抗體夾心法適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原，但不適用于測(cè)定半抗原及小
分子單價(jià)抗原,，因其不能形成兩位點(diǎn)夾心,。
2.2.2 雙抗原夾心法測(cè)抗體
　　反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物,，以檢測(cè)相應(yīng)
的抗體,。與間接法測(cè)抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需
稀釋,，可直接用于測(cè)定,，因此其敏感度相對(duì)高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測(cè)常采
用本法,。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,，應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同，尋找合適的標(biāo)記方法,。
2.2.3 間接法測(cè)抗體

　　間接法是檢測(cè)抗體常用的方法,。其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體（抗人免疫球蛋白抗
體）以檢測(cè)與固相抗原結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法（見(jiàn)圖2-3）,。操作步驟如下：
1）將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),，形成固相抗原。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì),。
2）加稀釋的受檢血清,，保溫反應(yīng)。血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合,，形成固相抗原抗
　　體復(fù)合物,。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體,，血清中的其他成份在洗滌過(guò)程
　　中被洗去,。
3）加酶標(biāo)抗抗體?？捎妹笜?biāo)抗人Ig以檢測(cè)總抗體,，但一般多用酶標(biāo)抗人IgG檢測(cè)IgG抗
　　體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗體抗體結(jié)合,，從而間接地標(biāo)記上酶,。洗滌后,，
　　固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢抗體的量正相關(guān)。
4）加底物顯色
　　本法主要用于對(duì)病原體抗體的檢測(cè)而進(jìn)行傳染病的診斷,。間接法的優(yōu)點(diǎn)是只要變換包
被抗原就可利用同一酶標(biāo)抗抗體建立檢測(cè)相應(yīng)抗體的方法,。
　　間接法成功的關(guān)鍵在于抗原的純度。雖然有時(shí)用粗提抗原包被也能取得實(shí)際有效的結(jié)
果,，但應(yīng)盡可能予以純化,，以提高試驗(yàn)的特異性。特別應(yīng)注意除去能與一般健康人血清發(fā)
生反應(yīng)的雜質(zhì),，例如以E.Coli為工程酶的重組抗原,，如其中含有E.Coli成份，很可能與受過(guò)
E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗體發(fā)生反應(yīng),。抗原中也不能含有與酶標(biāo)抗人Ig反應(yīng)的物
質(zhì),，例如來(lái)自人血漿或人體組織的抗原,，如不將其中的Ig去除，試驗(yàn)中也發(fā)生假陽(yáng)性反
應(yīng),。另外如抗原中含有無(wú)關(guān)蛋白,，也會(huì)因竟?fàn)幬蕉绊懓恍Ч?br />　　間接法中另一種干擾因素為正常血清中所含的高濃度的非特異性。病人血清中受檢的
特異性IgG只占總IgG中的一小部分,。IgG的吸附性很強(qiáng),，非特異IgG可直接吸附到固相載體
上，有時(shí)也可吸附到包被抗原的表面,。因此在間接法中,，抗原包被后一般用無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)
（例如牛血清蛋白）再包被一次，以封閉（blocking）固相上的空余間隙,。另外,，在檢
測(cè)過(guò)程中標(biāo)本須先行稀釋（1:40~1:200），以避免過(guò)高的陰性本底影響結(jié)果的判斷,。
2.2.4 競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體

　　當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,，或不易得到足夠的純化抗原時(shí)，可用此法檢測(cè)特
異性抗體,。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競(jìng)爭(zhēng)與固相抗原結(jié)合,。標(biāo)本中抗體
量越多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少,，因此陽(yáng)性反應(yīng)呈色淺于陰性反應(yīng),。如抗原為高純
度的，可直接包被固相,。如抗原中會(huì)有干擾物質(zhì),，直接包被不易成功，可采用捕獲包被
法，即先包被與固相抗原相應(yīng)的抗體,，然后加入抗原,，形成固相抗原。洗滌除去抗原中的
雜質(zhì),，然后再加標(biāo)本和酶標(biāo)抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng),。競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體有多種模式，可將標(biāo)本
和酶標(biāo)抗體與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,，抗HBc 　　ELISA一般采用此法,。另一種模式為將標(biāo)本
與抗原一起加入到固相抗體中進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，洗滌后再加入酶標(biāo)抗體,，與結(jié)合在固相上的
抗原反應(yīng),。抗HBe的檢測(cè)一般采用此法,。
2.2.5 競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原
　　小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),，因此不能用雙抗體夾心法
進(jìn)行測(cè)定，可以采用競(jìng)爭(zhēng)法模式,。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相
抗體結(jié)合,。標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少,，zui后的顯色也愈淺,。
小分子激素、藥物等ELISA測(cè)定多用此法,。
2.2.6 捕獲包被法測(cè)抗體

　　IgM抗體的檢測(cè)用于傳染病的早期診斷中,。間接法ELISA一般僅適用于檢測(cè)總抗體或
IgG抗體。如用抗原包被的間接法直接測(cè)定IgM抗體,，因標(biāo)本中一般同時(shí)存在較高濃度的
IgG抗體,，后者將競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合固相抗原而使一部份IgM抗體不能結(jié)合到固相上。因此如用抗人
IgM作為二抗,，間接測(cè)定IgM抗體,，必須先將標(biāo)本用A蛋白或抗IgG抗體處理，以除去IgG的
干擾,。在臨床檢驗(yàn)中測(cè)定抗體IgM時(shí)多采用捕獲包被法,。先用抗人IgM抗體包被固相，以捕
獲血清標(biāo)本中的IgM（其中包括針對(duì)抗原的特異性IgM抗體和非特異性的IgM）,。然后加入
抗原,，此抗原僅與特異性IgM相結(jié)合。繼而加酶標(biāo)記針對(duì)抗原的特異性抗體,。再與底物作
用,，呈色即與標(biāo)本中的IgM成正相關(guān),。此法常用于病毒性感染的早期診斷。甲型肝炎病毒
（HAV）抗體的檢測(cè)模式見(jiàn)圖2-7,。
　　類風(fēng)濕因子（RF）同樣能干擾捕獲包被法測(cè)定IgM抗體,，導(dǎo)致假陽(yáng)性反應(yīng)。因此中和
IgG的間接法近來(lái)頗受青睞,，用這類試劑檢測(cè)抗CMV IgGM和抗弓形蟲(chóng)IgM抗體已獲成功,。
2.2.7 ABS-ELISA法
　　ABS為親和素（avidin）生物素（biotin）系統(tǒng)（system）的略語(yǔ)。親和素是一種糖蛋白,，分子
量60000,，每個(gè)分子由4個(gè)能和生物素結(jié)合的亞基組成。生物素為小分子化合物,，分子量
244,。用化學(xué)方法制成的衍生物素-羥基琥珀酰亞胺酯可與蛋白質(zhì)和糖等多種類型的大小分
子形成生物素標(biāo)記產(chǎn)物，標(biāo)記方法頗為簡(jiǎn)便,。生物素與親和素的結(jié)合具有很強(qiáng)的特異性,，
其親和力較抗原抗體反應(yīng)大得多，兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定,。由于一個(gè)親和素可與4個(gè)生
物素分子結(jié)合，因此如把ABS與ELISA法可分為酶標(biāo)記親和素-生物素（LAB）法和橋聯(lián)親
和素-生物素（ABC）法兩種類型,。兩者均以生物素標(biāo)記的抗體（或抗原）代替原ELISA系
統(tǒng)中的酶標(biāo)抗體（抗原）,。在LAB中，固相生物素先與不標(biāo)記的親和素反應(yīng),，然后再加酶
標(biāo)記的生物素以進(jìn)一步提高敏感度,。在早期，親和素從蛋清中提取,，這種卵親和素為堿性
糖蛋白,，與聚苯乙烯載體的吸附性很強(qiáng)，用于ELISA中可使本底增高,。從鏈霉菌中提取的
鏈霉親和素則無(wú)此缺點(diǎn),，在ELISA應(yīng)用中有替代前者的趨勢(shì)。由于ABS-ELISA較普通
ELISA多用了兩種試劑,，增加了操作步驟,，在臨床檢驗(yàn)中ABS-ELISA應(yīng)用不多。
ELISA知識(shí)講座之三
ELISA的試劑（上）
　　在臨床檢驗(yàn)中一般采用商品試劑盒進(jìn)行測(cè)定,。前文（2.2）已述,，ELISA中有三個(gè)必要
的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物,。
　　完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：
（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）,；
（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）,；
（3）酶的底物；
（4）陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品（定性測(cè)定中）,，參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測(cè)定
　　　中）,；
（5）結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；
（6）洗滌液,；
（7）酶反應(yīng)終止液,。
3.1　免疫吸附劑
　　已包被抗原或抗體的固相載體在低溫（2~8℃）干燥的條件下一般可保存6個(gè)月。有些
不完整的試盒,，僅供應(yīng)包被用抗原或抗體,，檢測(cè)人員需自行包被。以下簡(jiǎn)述固相載體和包
被過(guò)程,。
3.1.1　固相載體
　　固相載體在ELISA測(cè)定過(guò)程中作為吸附劑和容器,，不參與化學(xué)反應(yīng)?？勺鱁LISA中載
體的材料很多,，zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能,，抗體或蛋
白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來(lái)的免疫學(xué)活性,，加之它的價(jià)格低廉，所以被普遍采用,。聚
苯乙烯為塑料,，可制成各種形式。
　　ELISA載體的形狀主要有三種：微量滴定板,、小珠和小試管,。以微量滴定板zui為常
用，于EILSA的產(chǎn)品稱為ELISA板,，上標(biāo)準(zhǔn)的微量滴定板為8×12的96孔式,。為便
于作少量標(biāo)本的檢測(cè)，有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的,，放入座架后,，大小與標(biāo)準(zhǔn)ELISA板
相同。ELISA板的特點(diǎn)是可以同時(shí)進(jìn)行大量標(biāo)本的檢測(cè),，并可在特制的比色計(jì)上迅速讀出
結(jié)果?，F(xiàn)在已有多種自動(dòng)化儀器用于微量滴定板型的ELISA檢測(cè)，包括加樣,、洗滌,、保
溫、比色等步驟,，對(duì)操作的標(biāo)準(zhǔn)化極為有利,。聚苯乙烯經(jīng)射線照射后,，其吸附性能特別是
對(duì)免疫球蛋白的吸附性能增加，應(yīng)用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多,，但用于間接
法測(cè)抗體時(shí)空白值較大,。
　　良好的ELISA板應(yīng)該是吸附性能好，空白值低,，孔底透明度高,，各板之間、同一板各
孔之間,、同一板各孔之間性能相近,。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差
別，各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大,，因此,，每一批號(hào)的ELISA板在使用前須事先檢查其性能。
常用的檢查方法為：以一定濃度的人IgG（一般為10ng/ml）包被ELISA板各孔,，洗滌后每
孔內(nèi)加入適當(dāng)稀釋度的酶標(biāo)抗人IgG抗體,，保溫后洗滌，加底物顯色,，終止酶反應(yīng)后,，分
別測(cè)每孔溶液的吸光度?？刂品磻?yīng)條件,，使各孔讀數(shù)在吸光度0.8左右。計(jì)算全部讀數(shù)的
平均值,。所有單個(gè)讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差，應(yīng)小于10%,。
　　與聚苯乙烯類似的塑料是聚氯乙烯,。作為ELISA固相載體，聚氯乙烯的特點(diǎn)為質(zhì)軟板
薄,，可剪割,，價(jià)廉，但光潔度不如聚苯乙烯板,，孔底亦不如聚苯乙烯平整,。聚氯乙烯對(duì)蛋
白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值也略高,。
　　為比較不同固相在某一ELISA測(cè)定中的優(yōu)劣,，可應(yīng)用如下的試驗(yàn)：用其他免疫學(xué)測(cè)定
方法選出一個(gè)典型的陽(yáng)性標(biāo)本和陰性標(biāo)本，將它們進(jìn)行一系列稀釋后,，在不同的固相載體
上按預(yù)定的ELISA操作步驟進(jìn)行測(cè)定,，然后比較結(jié)果,。在哪一種載體上陽(yáng)性結(jié)果與陰性結(jié)
果差別zui大，這種載體就是這一ELISA測(cè)定項(xiàng)目的zui合適的固相載體,。
　　在ELISA中,，用作固相載體的小珠一般為直徑0.6cm的圓珠，表面經(jīng)磨砂處理后吸附
面積大大增加,。ELISA板孔的吸附面積約為200mm2,，小珠均為1000mm2，將近ELISA板
孔的5倍,。吸附面積的增大即意味著固相抗原或抗體量的增加,。再者，球型小珠的表面弧
度更有利于吸附的抗原決定簇或抗體結(jié)合位點(diǎn)的暴露面處于*反應(yīng)狀態(tài),，因此珠式
ELISA的反應(yīng)往往更為靈敏,。小珠的另一特點(diǎn)是更易于使洗滌*，使用特殊的洗滌器,，
使小珠在洗滌過(guò)程中滾動(dòng)淋洗,，其洗滌效果遠(yuǎn)較板孔的浸泡式為好。但由于磨砂工藝的難
度較大,，小珠的均一性較差,。
　　小試管作為固相載體也有較大的吸附表面，而且標(biāo)本的反應(yīng)量也相應(yīng)增加,。板式及珠
式ELISA的標(biāo)本量一般為100-200ul,，而小試管可根據(jù)需要加大反應(yīng)體積，標(biāo)本反應(yīng)量的增
加有助于試驗(yàn)敏感性的提高,。小試管還可以當(dāng)作比色杯,，zui后直接放入分光光度計(jì)中比
色。
　　也有應(yīng)用聚苯乙烯膠乳或其他材料制成的微粒作為ELISA固相載體的,。其優(yōu)點(diǎn)是表面
積極大,，反應(yīng)在懸液中進(jìn)行，其速率與液相反應(yīng)近似,。以含鐵的磁性微粒作為ELISA固相
載體,，反應(yīng)后用磁鐵的吸引進(jìn)行分離，洗滌方便,，試劑盒一般均配以特殊儀器,。
3.1.2 　包被的方式
　　將抗原或抗體固定在過(guò)程稱為包被（coating）。換言之,，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固
相載體表面的過(guò)程,。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分
子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于,。這種物理吸附是非特異性
的,，受蛋白質(zhì)的分子量,、等電點(diǎn)、濃度等的影響,。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同
的,，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表
面,。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力,，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露
于外,，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法,。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方
法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí),，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原
決定簇不能充分暴露,，在這種情況下，直接包被效果不佳,，可以采用間接的捕獲包被法,，
即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化,。此間接結(jié)
合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面,，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相
抗體的親和層析作用,，包被在固相上的抗原純度大大提高,，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采
用捕獲包被法（見(jiàn)2.2.4），試驗(yàn)的特異性,、敏感性均由此得以改善,，重復(fù)性亦佳。間接包
被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少,，僅為直接包被的1/10乃至于/100,。不易吸附在聚苯乙烯載體
上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如,，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包
被抗原,，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合,。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射
（例如30W紫外燈,，75cm照射12小時(shí)）,，以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白
質(zhì),，如聚賴氨酸,、魚(yú)精蛋白等作預(yù)包被,，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素生物素系
統(tǒng)作間接包被,，即用親和素先包被載體,，然后加入生物素化的DNA，這種包被方法均勻,、
牢固,，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。
　　脂類物質(zhì)無(wú)法與固相載體結(jié)合,，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA
板孔中,，開(kāi)蓋置冰箱過(guò)夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后,，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面,。抗心
磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式,。