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大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）elisa指標(biāo)檢測(cè)試劑盒（北京elisa實(shí)驗(yàn)原理）

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    2013年07月08日
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酶聯(lián)免疫檢測(cè),elisa代測(cè),北京elisa廠家
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大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）elisa指標(biāo)檢測(cè)試劑盒（北京elisa實(shí)驗(yàn)原理）
檢測(cè)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值）,，計(jì)算樣品濃度,。
 
大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）elisa指標(biāo)檢測(cè)試劑盒（北京elisa實(shí)驗(yàn)原理）
樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,，收集血液后,，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),，請(qǐng)按一次用量分裝,，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）elisa指標(biāo)檢測(cè)試劑盒（北京elisa實(shí)驗(yàn)原理）
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘,。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,，這屬于正常現(xiàn)象,，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存,。
3. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液即可視為陰性對(duì)照或者空白,；預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋，直接取10μL加樣即可,。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻,。

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